王耀萍
- 作品数：27 被引量：55H指数：5
- 供职机构：中国科学院生物物理研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学理学航空宇航科学技术医药卫生更多>>
- 应用动态光散射对一些蛋白质结晶性能的研究被引量：10
- 2000年
- 动态光散射是研究生物大分子溶液物化行为和结晶性能的重要工具。以溶菌酶为模型蛋白 ,对其溶液的DLS研究表明 ,一定范围的蛋白质浓度不会影响蛋白质聚合性质 ,而起沉淀剂作用的盐对多色散性的影响较大。考虑这些研究结果 ,应用DLS研究对空间微重力下晶体生长样品的质量做了考察 ,这对于提高空间样品准备水平 ,进而提高空间实验成功率是一重要途径。
- 吕鹤书舒占永龚海韵韩毅王耀萍毕汝昌
- 关键词：动态光散射溶菌酶蛋白质
- 不同重力条件下生长的溶菌酶晶体的结构被引量：1
- 1998年
- 利用我国返回式卫星和国内研制的蛋白质结晶装置 ,先后进行了 2次空间蛋白质晶体生长实验 ,均获得了质量较好的溶菌酶晶体 .为了探索微重力对溶菌酶晶体结构的影响 ,对
- 董君王耀萍韩青毕汝昌
- 关键词：微重力溶菌酶晶体结构晶体生长
- 麦芽四糖淀粉酶的晶体培养及初步衍射研究被引量：2
- 1997年
- 麦芽四糖淀粉酶是水解方式独特、其产物又具有较广泛应用价值的一种淀粉酶。应用悬滴汽相扩散法，用从产碱菌发酵培养液分离纯化得到的麦芽四糖淀粉酶成功地培养出了质量较好的单晶体。测得该种晶体属正交晶系，空间群为Ｐ２１２１２１，晶胞参数ａ＝４６．６Ａ。，ｂ＝６５．８Ａ。，ｃ＝１７０．９Ａ。，一个不对称单位含一个麦芽四糖淀粉酶分子。用ＭａｒＲｅｓｅａｒｃｈＩＰ面探测器收集了一套分辨率高于２．７Ａ。的衍射强度数据。
- 马建华王耀萍韩毅毕汝昌朱静严自正
- 关键词：淀粉酶麦芽四糖淀粉酶生物物理衍射
- α－苦瓜子蛋白晶体结构中的次级相互作用的研究──Ⅰ结构中氢键相互作用的分析被引量：1
- 1994年
- α－苦瓜子蛋白是一种单链核糖体失活蛋白，具有Ｎ－糖苷酶活性，２．０Ａ分辨率的三维结构已经测定。α－苦瓜子蛋白中总共有３５３个氢键，其中主链原子间氢键１６５个，主链原子与侧链原子间氢键５４个，侧链原子间氢键２１个，蛋白分子中原子与溶水剂的氢键１１３个，主链Ｃ＝Ｏ，主链ＮＨ及侧链分子结构中有９５％的残基能生成氢键，Ａｓｐ．Ｇｌｕ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ具有较强的生成多个氢键的能力，并对１３个没有任何氢键的残基作了分析。Ａｎ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、ＧｌＵ、Ｇｌｎ在α螺旋中出现税率较大，Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｔｙｒ、Ｉｌｅ、Ｔｈｒ在β结构中占了一半以上，Ａｒｇ容易形成远程的氢键，而Ｓｅｒ、Ｔｈｒ则容易形成近程氢键。某些氢键，特别是保守残基间的氢键，对形成蛋白分子局部特征构象和活性部位的特征构象有影响，α－苦瓜子蛋白的特定折叠方式对其与溶剂水分子成氢键有影响。
- 王耀萍陈世芝董贻诚任景山
- 关键词：氢键
- 1.73分辨率天花粉蛋白晶体中的水结构被引量：1
- 1994年
- 本文报道的天花粉蛋白晶体中水的结构模型,包括了133个水分子,其中118个同蛋白的原子成氢键。天花粉蛋白内部有4个分立的水分子,其中2个水分子W251和W252分剔与A5螺旋变形部位的残基156Gln和157Ser的侧链成氢键,对维持活性部位的构象有贡献。晶体中水结构的比较结果表明,核糖体接近蛋白时,会诱导蛋白活性部位残基的构象发生变化,使各催化基团按催化效果最佳的构象排布,并激活一个水分子(W257)直接参与核糖体失活作用。
- 高奔马星奇王耀萍吴伸陈世芝董贻诚
- 关键词：天花粉核糖蛋白晶体
- 能自动原位监测汽相扩散速率的生物大分子结晶装置
- 能自动原位监测汽相扩散速率的生物大分子结晶装置，包括一底座，在上放置结晶室外壁，在外壁中间腰部粘接带有中心通道的隔板，在底座中心固接一重量敏感器，穿过隔板中心通道与重量敏感器上置放的支架底盘接有一支架，支架上端放置滴有大...
- 舒占永毕汝昌李明王欣敏王耀萍
- 文献传递
- 固氮酶铬铁蛋白的晶体生长(英文)被引量：1
- 2002年
- 在合适的结晶条件下 ,从含Cr无氨培养基中生长的固氮菌 (AzotobactervinelandiiLipmann)突变种UW3 中纯化出的CrFe蛋白可从溶液中析出深棕色斜四棱柱晶体 ,晶体最大的两条对角线长度分别可达 0 .2 5mm和 0 .12mm。PEG 80 0 0、MgCl2 、NaCl、Tris和Hepes缓冲液的浓度及结晶方法等对该蛋白的出晶率、晶核数目、晶体大小和质量都有明显影响。CrFe蛋白结晶所需的上述化合物的最适浓度与在Mn中生长的固氮菌突变种UW3 的MnFe蛋白和缺失nifZ固氮菌突变种的ΔnifZMoFe蛋白结晶所需的最适浓度有所不同。结果表明 。
- 张华峰王耀萍吕玉兵赵颖代小虎董志刚黄巨富
- 关键词：固氮菌突变种晶体生长
- 天花粉蛋白1.73分辨率结构测定及其精化被引量：8
- 1993年
- 本文报道了用面探测器收集一套1.73分辨率天花粉蛋白(TCS)正交晶体的X射线衍射数据,利用已知的α苦瓜子蛋白模型,取10—4范围的TCS强度数据,应用分子置换法测定了晶体结构,并且采用限制参数最小二乘法在10—1.73分辨率范围内修正模型结构。修正结果,晶体学R因子为0.186,键长标准偏差为0.013,键角标准偏差为2.48°,一个不对称单位中找到133个水分子。本文详细描述了天花粉蛋白分子的结构、温度因子、氢键、结合水、保守残基的分布以及分子间相互作用。保守残基14Tyr的羟基与157位的羰基氧形成的氢键,对维持活性部位构象有重要作用;保守残基160Glu和它在活性部位的构象对酶的催化活性起着关键性作用。
- 高奔马星奇王耀萍吴伸陈世芝董贻诚
- 关键词：晶体结构分辨率天花粉蛋白
- 我国第2次空间蛋白质晶体生长实验被引量：6
- 1996年
- 1994年7月,在我国返回式卫星FSW-2上进行了第2次空间蛋白质结晶实验.该次实验中的晶体生长状况明显优于首次空间实验结果,参加实验的10种蛋白质中有9种蛋白质在空间长出了晶体,48个样品的单晶产生率达70％以上.其中3种蛋白质在空间长出较大单晶体,能用于X射线衍射实验和收集强度数据.这3种蛋白质中,除了在首次空间实验中长出较大晶体的溶菌酶,还有由于结晶条件优化而结晶效果明显改进的酸性磷脂酶A_2和斑头雁氧合血红蛋白.微重力条件对蛋白质晶体生长的良好效应在本次实验中得到进一步证实.
- 王耀萍潘冀燊牛秀田周元聪华子千徐谦吴伸韩青李宏民刘延顺滕脉坤何海辉林胜祥毕汝昌
- 关键词：蛋白晶体生长
- 棕色固氮菌缺失nifE的突变种固氮酶钼铁蛋白的结晶(英文)被引量：2
- 2003年
- 从限氨固氮培养基中培养棕色固氮菌 (AzotobactervinelandiiLipmann)缺失nifE的突变种DJ35中 ,分离纯化得到缺失FeMoco的钼铁蛋白 (ΔnifEAv1 )。在一定条件下结晶得到深棕色短斜四棱柱晶体。结晶溶液中各组分的浓度以及结晶方法等对其晶核数目、晶体大小和质量有明显影响。目前用气相扩散的悬滴法所得的最大晶体的二维边长分别为 0 .1 2mm和 0 .1 3mm。
- 赵颖赵剑峰吕玉兵汪志平王耀萍黄巨富
- 关键词：棕色固氮菌
