王振坤 作品数:6 被引量:6 H指数:2 供职机构: 哈尔滨医科大学附属第一医院 更多>> 发文基金: 哈尔滨市科技创新人才研究专项资金项目 黑龙江省青年科学基金 黑龙江省博士后基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
阵发性睡眠性血红蛋白尿与HLA-A^*基因的关联研究 2009年 目的探讨阵发性睡眠性血红蛋白尿(PNH)和人类主要组织相容性复合体(HLA-A*)基因易感的分子机制。旨在研究此基因多态性在PNH发病机制中的作用。方法采用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)技术,分别检测单个核细胞中的采用聚合酶链式反应和顺序特异性引物(PCR-SSP)基因分析方法,对31PNH患者及29例无血缘关系的健康人的HLA-A*各等位基因及亚基因进行了检测分析,并将该方法与其它检测HLA等位基因的方法进行对比。结果HLA-A*03基因与PNH组呈正相关(RR=4.697,P<0.05),其它HLA-A*各等位基因未见异常,均无统计学差异。结沦本项研究结果提示,HLA-A*03基因可能是北方汉族人PNH的致病易感基因之一,为揭示PNH的发病机制中免疫遗传学所起的作用提供了重要信息和依据。尽管目前HLA基因分型方法已有多种,但本文所采用的方法(PCR-SSP)具有快速、简便、敏感、准确和可靠等优点,值得推广应用。 曹峰林 王树叶 李金梅 汤海蒂 王振坤关键词:阵发性睡眠性血红蛋白尿 细胞因子 基因多态性 杠柳苷对急性淋巴细胞白血病作用机制研究 被引量:2 2013年 目的:探讨香加皮提取物杠柳苷(Periplocin from cortex periplocae,CPP)对人类急性淋巴细胞白血病(ALL)细胞株Jurkat的抑制作用及作用机制。方法:CASY快速细胞计数法检测CPP对人Jurkat的敏感性。将AnnexinV/PI双染试剂盒染色结合流式细胞术检测CPP作用不同时间,诱导Jurkat凋亡坏死细胞比例。采用CPP作用Jurkat 12h,实时定量PCR检测CPP对葡萄糖转运蛋白(Glut)、人己糖激酶-II(HK-II)及缺氧诱发因子(HIF-1α)基因拷贝数的影响。结果:CPP对Jurkat有显著的细胞毒作用,其半数抑制浓度为(48.33±6.24)nM。CPP能诱导Jurkat凋亡,凋亡率随着作用时间的延长及剂量的增加而明显增高,呈时间、剂量依赖性。CPP作用于Jurkat细胞12h后,CPP不能抑制HIF-1αmRNA的表达,而能显著抑制糖酵解相关的Glut、HK-II基因的表达。结论:CPP能有效抑制ALL细胞株Jurkat的生长,其机制与诱发凋亡、抑制糖酵解密切相关。 杨东光 周晋 王振坤 叶向梅 李洋 王洪玲 曹峰林关键词:杠柳苷 急性淋巴细胞白血病 糖酵解 葡萄糖转运蛋白 CIK细胞抗白血病的研究进展 2011年 细胞因子诱导的杀伤细胞(Cytokine—induced killer,CIK)是由多种细胞因子诱导而成的对多种肿瘤具有杀伤活性的细胞毒性T细胞,且是一种非主要组织相溶性复合体(MHC)限制的免疫效应细胞,同时表达CD3和CD56,其增殖能力强、杀瘤活性高、副作用小,是目前白血病细胞免疫疗法中最具前景的细胞之一。文章综述了CIK细胞的特点、抗白血病机制和科研及临床的应用现状。 王振坤 曹峰林关键词:免疫治疗 白血病 三氧化二砷抗肿瘤机制的研究进展 被引量:2 2009年 近年来,三氧化二砷在白血病等各种恶性肿瘤治疗的基础研究和临床实践方面已取得了长足的进步。本文从其诱导肿瘤细胞凋亡、对癌细胞的靶向作用、对抑癌基因的去甲基化作用以及抑制肿瘤细胞生长和肿瘤新生血管形成等方面对三氧化二砷抗癌作用机制的研究进展进行综述。 王振坤 张迎媚 周晋关键词:三氧化二砷 抗肿瘤 齐墩果酸诱导人白血病NB4细胞凋亡的研究 被引量:2 2011年 目的 探讨齐墩果酸(OA)对人白血病细胞(NB4)的增殖抑制及诱导凋亡作用.方法 选用不同浓度梯度的OA分别处理NB4细胞,用CASY细胞活力分析仪检测OA对NB4细胞的生长抑制情况;DAPI染色实验检测细胞经OA处理后的核形态变化;凝胶电泳检测NB4细胞基因组DNA的降解;流式细胞仪法检测细胞凋亡率.结果 80μmol/L OA对NB4细胞生长有明显的抑制作用,并表现为时间依赖性;经齐墩果酸处理后NB4细胞发生凋亡,细胞核呈浓缩和核碎片形态.结论 实验证明齐墩果酸在体外能够诱导人白血病NB4细胞凋亡,并抑制其生长. 王振坤 曹峰林 张丽坤 段雅雅 孟红彬 隋美娟 周晋关键词:齐墩果酸 人白血病细胞 细胞凋亡 γ-生育三烯酚联合亚砷酸对急性早幼粒细胞NB4生长的抑制作用及机制 2018年 目的:研究γ-生育三烯酚联合亚砷酸对急性早幼粒细胞NB4生长的抑制作用及可能的分子机制。方法:采用CCK-8、细胞周期实验检测细胞增殖、利用激光共聚焦显微镜、Annexin V/PI染色、Caspase活性检测、Western Blot等方法测定细胞凋亡。采用1μmol/L ATO及不同浓度(0、15、30、45μmol/L)的γ-生育三烯酚处理NB4细胞24、48和72小时,通过CCK-8检测细胞的增殖情况,流式细胞术、激光共聚焦显微镜检测细胞周期和凋亡情况,检测Caspase3,8,9的活性,Western Blot检测细胞中c-caspase-3、Bcl-2和survivin的蛋白表达。结果:γ-生育三烯酚联合亚砷酸显著抑制NB4细胞增殖(P<0.01),且随着作用时间延长和γ-生育三烯酚浓度的增加,其增殖抑制作用增强;细胞周期阻滞在S期,S期的比例由38.21%±2.99上升到50.31%±5.03;γ-生育三烯酚联合亚砷酸诱导NB4细胞凋亡,1μmol/L ATO联合15、30μmol/L的γ-生育三烯酚处理48h后,细胞活率分别为82.27%±3.16、66.97%±3.17、12.63%±2.66;1μmol/L ATO联合30μmol/L的γ-生育三烯酚处理后,NB4细胞caspase-3,-8,-9的活性均较ATO单独用药组显著增高,c-caspase-3表达增高而Bcl-2和survivin蛋白的表达无明显变化。结论:生育三烯酚联合亚砷酸对急性早幼粒细胞NB4的生长具有抑制作用,此作用可能与抑制增殖并诱导凋亡相关,其作用靶点可能与促进Cas-pase诱导的凋亡有关。 李洋 史策 杨东光 卫佳 王振坤 张鑫关键词:亚砷酸 NB4细胞 CASPASE-3