王尊
- 作品数：7 被引量：16H指数：3
- 供职机构：华中科技大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金卫生部临床学科重点项目国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学电气工程更多>>
- 三参数流式细胞术分析紫外线诱导的MOLT-4细胞旁观者效应
- 2009年
- 目的应用三参数流式细胞术探讨紫外线（UV）诱导的MOLT4细胞的旁观者效应（BSE）。方法以人类T细胞白血病细胞株MOLT-4为对象，以紫外线为诱导剂。将经UV照射的MOLT4细胞与DiD荧光阳性的MOLT-4细胞联合培养作为试验组，未经任何打击的DiD阳性细胞为对照组。用FITC—AnnexinV／PI法检测细胞凋亡率，用激光扫描共聚焦显微镜（LSCM）观察其荧光及形态学改变，以检测其旁观者效应。结果实验组中旁观者细胞凋亡及坏死比例在0、2、4、8、12、18、24h分别为6．84％、8．09％、9．88％、13．50％、22．50％、30．99％、37．93％。而对照组为4．28％、4．93％、5．22％、5．39％、6．54％、6．77％、7．14％。试验组旁观者细胞的凋亡及坏死比例随着时间的延长而逐步增高。LSCM观察可见部分旁观者细胞出现磷脂酰丝氨酸（PS）翻转、核边集、核浓集、核碎裂等形态学改变。结论在MOLT-4细胞株，用非离子射线——UV诱导的凋亡细胞对联合培养的旁观者细胞具有旁观者效应。
- 黄丹王尊张鹏陶德定胡俊波龚建平
- 关键词：旁观者效应流式细胞术脱噬作用紫外线
- 人重组Fas配体体外诱导细胞周期特异性凋亡模型的建立被引量：3
- 2007年
- 目的运用人重组Fas配体(rhFasL),体外诱导稳定而又典型的Fas介导的细胞周期特异性凋亡模型,为针对其细胞凋亡过程中的细胞周期机制研究、肿瘤的生物学治疗和自身免疫性疾病的防治等提供科学的研究平台。方法以白血病细胞系(Molt-4和Jurkat细胞系)和进入细胞周期的外周血淋巴细胞为载体,用人重组Fas配体诱导细胞6～36h后,用亚G1峰法、传统的AnnexinⅤ/PI和改良后的API法进行标记并用流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果改良后的API法显示人重组Fas配体诱导的细胞凋亡具有细胞周期特异性及始动位点;传统的AnnexinⅤ/PI显示在将细胞凋亡控制在10%～20%并以早期细胞凋亡为主时诱导的模型最典型;亚G1峰法只能检测晚期细胞凋亡和进行DNA直方图分析。结论人重组Fas配体体外诱导的细胞凋亡具有细胞周期特异性并始动于G1期,联合应用传统的Annex-in-Ⅴ/PI及改良后的API法能为建立稳定而又典型的体外Fas介导的细胞周期特异性凋亡模型提供技术支撑。
- 何小军肖田王尊葛军娜黄丹徐惠婷李小兰肖徽陶德定龚建平
- 关键词：细胞周期细胞凋亡流式细胞术
- CDK1 siRNA干扰在Taxol诱导细胞凋亡中的作用被引量：1
- 2009年
- 目的研究转染细胞周期依赖性蛋白激酶1（cyclin．dependent kinase1，CDK1）siRNA、以及转染后进行凋亡刺激对细胞周期和凋亡的影响，探讨CDK1在细胞凋亡中的确切作用，揭示细胞周期与细胞凋亡协调的分子机制。方法以人宫颈癌细胞株HeLa细胞为研究对象，脂质体转染CDK1siRNA，转染后48h加紫杉醇（Tax01）（20μg／m1）刺激凋亡，Western印迹检测CDK1和抗凋亡蛋白BCL2表达，AnnexinV／PI法检测细胞的凋亡，流式细胞仪分析DNA含量检测细胞周期。结果转染CDK1 siRNA后，CDK1蛋白的表达下降，细胞周期G2／M期比例增加，细胞凋亡率与对照相比没有明显升高。只加Taxol刺激12h后细胞凋亡率增加并伴有S期和G2／M期比例增加。转染CDKlsiRNA后再用Taxol刺激，其细胞凋亡率没有明显改变，G2／M期阻滞效应也没有叠加。BCL2蛋白只在加Taxol刺激组表达下降，与CDK1表达减少没有相关性。结论siRNA沉默导致的CDK1表达降低只导致细胞周期G2／M期阻滞，没有引起细胞凋亡；CDK1的表达降低对紫杉醇所诱导的细胞周期阻滞和细胞凋亡效应没有明显影响。
- 肖徽王尊于冬冬曹金鹏龚万军葛君娜陶德定胡俊波龚建平
- 关键词：紫杉醇细胞周期细胞凋亡
- 饥饿诱导肿瘤细胞自噬对细胞周期的影响被引量：8
- 2008年
- 背景与目的:无血清饥饿方法可以诱发细胞自噬,同时也可以引起细胞周期阻滞。虽然研究者们对细胞自噬与细胞周期已经进行了深入的研究,但是对于两者之间的关系还是知之甚少。本研究旨在通过研究细胞周期素(Cyclin)在饥饿诱导的细胞发生自噬时表达的变化,来探讨自噬对细胞周期的影响。方法:对照组:d-Hanks液代替培养基饥饿诱导处于对数生长期的HeLa细胞,收获饥饿0、3、6、12h的细胞。实验组:用d-Hanks液开始饥饿的同时加入3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA),收获饥饿0、3、6、12h的细胞,用流式细胞术和Western blot法检测细胞周期素和特异性标记自噬的兔抗人微管相关蛋白1轻链3Ⅱ(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC-3)。结果:饥饿3h对照组HeLa细胞中有LC-3表达,并随饥饿时间延长而逐渐增加。Cyclin E、Cyclin D3在饥饿3h开始减少,在饥饿6h降低至最低水平,而Cyclin A、Cyclin B1在饥饿6h开始下降。实验组HeLa细胞在饥饿3h时LC-3的表达水平较低,随饥饿时间的延长LC-3表达基本不变化,Cyclin D3、Cyclin E、Cyclin A、Cyclin B1表达的下降速度也较对照组减慢。结论:自噬参与饥饿诱导的Cyclin降解的水解过程,Cyclin D3、Cyclin E水解比Cyclin A、Cyclin B1出现早,降解速度快。
- 葛军娜黄丹肖田王尊李小兰肖徽陶德定龚建平
- 关键词：HELA细胞自噬细胞周期素细胞周期流式细胞术
- Cyclin E的表达与细胞凋亡关系的阐述
- 目的:细胞周期与细胞凋亡是细胞最主要的生命活动。细胞周期决定着细胞的生长、分裂和复制。细胞凋亡决定着细胞的衰老、死亡和清除。两者共同作用维持机体的稳定性。cyclin E在G1期合成,在G1进入S期时达到高峰,进入S期后...
- 王尊
- 关键词：细胞凋亡细胞周期细胞周期细胞周期检测点细胞周期素
- 文献传递
- 多机系统电磁转矩系数计算与应用
- 现代互联电力系统中，低频振荡现象时有发生，成为威胁系统安全稳定运行的重要因素。对低频振荡问题的分析工作具有重要的基础性意义，其负阻尼机制以明确的物理概念获得了广泛认同。多机系统中，阻尼特性的分析多使用数学理论为基础的模态...
- 王尊
- 关键词：互联电力系统低频振荡控制器
- 分选后晚G_1期凋亡细胞Cyclin E表达分析被引量：4
- 2009年
- 目的以G1期细胞凋亡为模型,检测细胞周期素Cyclin E是否与凋亡相关。方法收获紫外线照射后的人类急性淋巴细胞性白血病细胞,一部分采用流式细胞术将凋亡诱导后的细胞进行Cyclin E/DNA双参数分析和细胞周期特异性细胞凋亡API双参数分析;一部分利用流式细胞分选术将凋亡诱导后的细胞分为凋亡组和未凋亡组,Westernblot法检测并比较两组细胞Cyclin E蛋白表达情况。结果Cyclin E/DNA双参数分析观察到凋亡诱导后细胞周期阻滞过程中细胞Cyclin E表达水平明显升高。分选后Western blot检测观察到凋亡组Cyclin E表达明显低于未凋亡组。结论Cyclin E表达水平的升高可能对晚G期细胞的凋亡起到保护作用。
- 王尊黄丹葛军娜肖田魏欣李小兰肖徽陶德定龚建平
- 关键词：细胞周期细胞周期检测点细胞周期素
