王君
- 作品数：10 被引量：11H指数：2
- 供职机构：军事医学科学院微生物流行病研究所更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家科技攻关计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 贝氏考克斯体毒力与毒力相关蛋白芯片的研制被引量：2
- 2008年
- 目的:构建贝氏考克斯体毒力与毒力相关蛋白芯片。方法:根据贝氏考克斯体全基因组序列,筛选出约160个编码毒力及毒力相关蛋白的基因,采用PCR扩增基因片段,将获得的基因片段与pET32a表达载体连接,然后将该重组质粒转化大肠杆菌并使目的基因表达,采用Ni-NTA亲和层析柱纯化表达的目的重组蛋白。将纯化的重组蛋白点在醛基化玻片上制备蛋白芯片。结果:由贝氏考克斯体104个重组蛋白构建毒力与毒力相关蛋白芯片,通过荧光扫描仪分析蛋白芯片与贝氏考克斯体感染的小鼠血清反应,发现10个重组蛋白与该血清反应为强阳性。结论:所制备的毒力与毒力相关蛋白芯片具有贝氏考克斯体特异性,可用于贝氏考克斯体感染患者血清的检测。
- 王锡乐温博海陈梅玲王君孙长俭杨晓
- 关键词：重组蛋白蛋白芯片
- 一种重组超抗原SEB突变体,其制备方法及应用
- 本发明公开了一种重组超抗原B型金黄色葡萄球菌肠毒素突变体，还公开了其制备方法及应用。本发明提取来源于天然金黄色葡萄球菌的肠毒素SEB基因组，得到基因组后针对与毒性相关的氨基酸位点进行定点突变，获得本发明的金黄色葡萄球菌肠...
- 姜永强江华郑玉玲谷丽维郑欣王君王燕子
- 文献传递
- 心肌肌钙蛋白I、超敏C反应蛋白和尿酸联合检测在急性心肌梗死诊断中的意义被引量：6
- 2009年
- 目的 通过观察急性心肌梗塞（AMI）患者心肌肌钙蛋白Ⅰ（cWnⅠ、超敏C-反应蛋白（hs-CRP）和尿酸（UA）含量变化的测定，探讨阻止AMI的发生发展，达到抢救生命的临床意义。方法分别监测76例AMI患者cTnⅠ、hs—CRP，UA水平。结果单纯AMI患者cTnⅠ、hs—CRP，UA明显高于正常对照组（P〈0．01），其中合并二型糖尿病者（T2DM）hs-CRP，UA高于单纯AMI组（P〈0．05），而合并T2DM者心肌肌钙蛋白Ⅰ与单纯AMI组比较无显著性差异（P〉0．05）。结论cTnⅠ、uA和hs-CRP与AMI的发生发展密切相关，因此，cTnⅠ、hs-CRP和UA联合检测，有助于对AMI的早期诊断和预后评估。
- 黄华陈林兴蔡壁新王君
- 关键词：急性心肌梗死超敏C反应蛋白尿酸
- 汉赛巴尔通体重组外膜蛋白Pap31的研制和抗原性分析
- 第一部分: 【背景目的】: 汉赛巴尔通体(Bartonella henselae)是一类氧化酶阴性、营养条件要求苛刻的革兰氏阴性小杆菌。其所致人类疾病称为猫抓病(Cat-scratch disease, CSD),目...
- 王君
- 关键词：汉赛巴尔通体基因表达抗原性免疫反应性
- 文献传递
- 汉赛巴通体重组外膜蛋白Pap31的研制和抗原性分析被引量：2
- 2008年
- 目的克隆并表达汉赛巴通体Pap31外膜蛋白基因,并对其抗原性进行初步分析。方法采用PCR从汉赛巴通体基因组DNA扩增外膜蛋白基因pap31,将目的基因片段插入原核表达质粒pQE30,构建重组质粒pQE30/pap31;将构建的重组质粒转化大肠杆菌M15并诱导目的基因表达,以SDS-PAGE电泳以及免疫印迹法分析表达目的蛋白。结果在SDS-PAGE电泳分析发现pQE30/pap31转化菌高效表达一重组蛋白,经免疫印迹分析发现该蛋白与汉赛巴通体免疫血清发生强烈反应;经间接免疫荧光分析发现该重组蛋白免疫血清能特异识别汉赛巴通体。结论汉赛巴通体外膜蛋白基因pap31在大肠杆菌高效表达,表达的重组Pap31外膜蛋白具有良好的抗原性。
- 王君王锡乐陈梅玲李冠武温博海
- 关键词：外膜蛋白基因表达免疫反应性
- 贝氏柯克斯体膜蛋白和毒力相关蛋白基因的克隆与表达及重组蛋白的免疫印迹分析
- 贝氏柯克斯体是Q热病原体,为专性细胞内寄生菌和生物战剂。本研究依据贝氏柯克斯体国际标准株九里株的全基因序列,设计引物用PCR扩增包括Ⅳ型分泌系统、分泌性蛋白和膜蛋白在内的104个贝氏柯克斯体毒力及毒力相关的基因,并将它们...
- 王锡乐陈梅玲王君孙长俭温博海
- 关键词：贝氏柯克斯体重组蛋白免疫印迹
- 文献传递
- 葡萄球菌肠毒素C2的研究进展被引量：1
- 2011年
- 葡萄球菌肠毒素(staphylococcal enterotoxin,SE)是一种外源性超抗原,仅需微量即能高效刺激T淋巴细胞增殖,促使其产生细胞毒作用,并释放大量的细胞因子,引发机体自身免疫应答。大量研究表明,SE是一种很有前途的新型肿瘤免疫治疗制剂,目前国内已将SEC2应用于肿瘤患者的治疗及对肿瘤患者在进行放化疗时防止白细胞降低。该文综述了SEC2在生物学活性、结构特性、抑制肿瘤细胞生长作用等方面的研究进展。
- 谷丽维朱庆王君江华李建春
- 关键词：抗肿瘤作用
- 葡萄球菌肠毒素C2突变体的构建及其体外抗肿瘤活性分析
- 2012年
- 目的：利用基因定点突变的方法将葡萄球菌肠毒素C2（SEC2）的31位定点突变,以获得抑瘤效果增强的肠毒素。方法：利用基因定点突变的方法,将SEC2中31位的His用Asn替代,转入大肠杆菌中诱导表达,采用CM弱阳离子层析柱纯化蛋白,并用SDS-PAGE和Western印迹对其进行鉴定,通过MTS法检测其体外抗肿瘤活性。结果：构建了突变体蛋白SEC2（H31N）,并在大肠杆菌中实现了高效表达。体外实验表明,在相同浓度下,SEC2（H31N）对多种肿瘤细胞的抑制作用明显优于野生型SEC2,尤其在低浓度下此现象更为明显。对于5个受试细胞株,SEC2（H31N）的IC50均低于SEC2;SEC2（H31N）浓度分别为0.01~10、0.01和0.1 ng/mL时,对肿瘤细胞SMMC-7721、HepG2、A549的生长抑制率与SEC2相比均显著提高。结论：同野生型SEC2相比,突变体蛋白SEC2（H31N）对肿瘤生长的抑制作用得到了提高。
- 王君郑玉玲郑欣谷丽维陈思维江华
- 关键词：超抗原突变体抗肿瘤
- 葡萄球菌肠毒素B突变体的构建及其抗肿瘤活性分析
- 2012年
- 目的:通过对葡萄球菌肠毒素B(SEB)32位His进行定点突变,获得抑瘤效果显著增强的SEB突变体。方法:利用基因定点突变的方法,将SEB的32位His替换为Asn,将重组质粒转入大肠杆菌中诱导表达,用CM弱阳离子层析柱纯化获得重组蛋白,用SDS-PAGE和Western印迹对其进行鉴定,并用增殖实验检测其丝裂原活性,通过MTS法检测其体外抗肿瘤活性。结果:构建并高效表达了突变体蛋白SEB(H32N),纯化获得了足够纯度的突变体蛋白;体外实验表明,在相同浓度下,SEB(H32N)的丝裂原活性及体外抗肿瘤活性明显优于野生型SEB。结论:同野生型SEB相比,突变体蛋白SEB(H32N)对肿瘤生长的抑制作用得到了提高。
- 郑欣郑玉玲王君谷丽维吴应良江华
- 关键词：突变体抗肿瘤
- 五日热巴通体重组外膜蛋白HbpA的研制和抗原性分析
- 2008年
- 为克隆并表达五日热巴通体外膜蛋白HbpA的基因,并对其抗原性进行初步分析,采用PCR方法从五日热巴通体基因组DNA扩增hbpA基因,将目的基因片段插入原核表达质粒pET32a(+),构建重组质粒pET32a(+)-hbpA;将构建的重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)并诱导目的基因表达,以SDS-PAGE电泳以及免疫印迹实验分析表达的目的蛋白。SDS-PAGE电泳分析发现pET32a(+)-hbpA转化菌高效表达一48kDa重组蛋白;免疫印迹分析发现该蛋白与其免疫血清发生强烈反应;间接免疫荧光分析发现该重组蛋白免疫血清能特异识别五日热巴通体。实验结果表明五日热巴通体外膜蛋白HbpA的基因已在大肠杆菌中高效表达。
- 王君王锡乐陈梅玲李冠武温博海
- 关键词：外膜蛋白基因表达免疫反应性
