牛军伟
- 作品数:5 被引量:4H指数:1
- 供职机构:中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 稳定表达猪繁殖与呼吸综合征病毒受体CD163的HEK293细胞系的建立被引量:3
- 2015年
- 为构建稳定表达猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)受体CD163的HEK293细胞系,本研究采用RT-PCR方法从猪肺泡巨噬细胞(PAM)总RNA中扩增CD163基因并将其克隆至真核表达载体pc DNA3.1(+)中,构建重组质粒pc DNA-CD163。将该重组质粒转染HEK293细胞,并利用G418筛选、纯化,获得了稳定表达CD163受体蛋白的HEK293CD163细胞系。RT-PCR、流式细胞术及western blot检测结果表明,该细胞系在传代至15代后,CD163在HEK293细胞中仍然能够稳定表达。在该细胞系中接种PRRSV后进行间接免疫荧光及噬斑试验检测表明,病毒能够通过CD163感染HEK293CD163细胞并在其中增殖。该细胞系的建立为进一步研究PRRSV的侵入细胞和致病机制提供了病毒在体外增殖的易感细胞系。
- 牛军伟郭龙军谷伟红黄明明李忍骆晓蕾王玉娥
- 关键词:猪繁殖与呼吸综合症病毒
- 马立克氏病病毒囊膜糖蛋白Ⅰ的原核表达及多克隆抗体的制备
- 2013年
- 提取感染MDV 814A3毒株的鸡胚成纤维细胞(CEF)总基因组,利用PCR技术扩增获得gI基因。将鉴定正确的gI基因克隆至pET-32a(+),构建原核表达载体pET-gI。将诱导表达获得的gI重组蛋白免疫新西兰大白兔,产生的抗血清能够与MDV814A3病毒发生特异性反应。本试验所制备的gI重组蛋白和多克隆抗体将在MDV检测、血清学诊断等方面具有重要应用价值。
- 李巧玲崔红玉牛军伟王云峰
- 关键词:马立克氏病GI基因原核表达多克隆抗体
- 马立克氏病病毒gE蛋白单克隆抗体的制备及鉴定被引量:1
- 2013年
- 为了获得分泌抗鸡马立克氏病病毒(MDV)gE囊膜糖蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞,将pGEX-6P-1表达的重组蛋白gE作为抗原,免疫BALB/c小鼠,通过淋巴细胞杂交瘤技术,共筛选获得4株能够稳定分泌抗MDV gE蛋白抗体的杂交瘤细胞株。抗体亚型鉴定结果表明,4株均为IgG1型,轻链为κ链。间接免疫荧光结果显示,4株杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体均能特异性识别MDV,并具有一定的中和活性。本研究对MDV诊断、抗原表位分析及鉴定等具有重要的应用价值。
- 李巧玲崔红玉牛军伟闫帅高明杨红亚赵妍王云峰
- 关键词:马立克氏病病毒原核表达单克隆抗体
- 猪FcγRⅢ双抗体夹心ELISA方法的建立及其在PRRSV感染猪中的初步应用
- 2016年
- 利用自行制备的FcγRⅢ多克隆抗体作为捕获抗体,鼠源抗FcγRⅢ特异性单克隆抗体作为示踪抗体,辣根过氧化物酶标记羊抗鼠Ig G作为检测系统,建立了检测可溶性FcγRⅢ(s FcγRⅢ)水平的双抗体夹心ELISA方法。利用建立的该ELISA方法对感染猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)血清进行检测,结果显示,猪感染PRRSV后,血清中s FcγRⅢ的水平明显增高,因此s FcγRⅢ的水平可能作为PRRSV感染的预警标志。该研究结果为进一步阐释FcγRⅢ在PRRSV感染中发挥的作用奠定了基础。
- 谷伟红郭龙军牛军伟田志军冯力王玉娥
- 关键词:多克隆抗体夹心ELISA猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒
- 猪源金属蛋白酶ADAM17免疫调节作用及分析
- 本研究则从猪源ADAM17角度出发,推测分析猪源ADAM17在免疫调节中的作用。首先对ADAM17分子在猪体内转录图谱进行绘制,进而探知ADAM17对免疫细胞表面IgG Fc受体的剪切分析。
通过对不同组织中A...
- 谷伟红郭龙军牛军伟黄明明王玉娥
- 关键词:免疫调节
- 文献传递