汪劲松
- 作品数：14 被引量：44H指数：4
- 供职机构：军事医学科学院放射与辐射医学研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- A蛋白亲和层析法纯化动物血清抗体的效果比较被引量：9
- 1999年
- 比较ＨｉｔｒａｐＰｒｏｔｅｉｎ－ＡＳｅｐｈａｒｏｓｅ亲和层析系统，对不同动物血清或抗血清的纯化效率，提供抗体纯化提供依据。结果显示该方法简便快速，纯化的抗体纯度高，并能较好地保持免疫学活性。层析柱反复使用４０多次，纯化效率不变。但Ｐｒｏｔｅｉｎ－Ａ对不同动物血清的ＩｇＧ吸附能力不同。提示，应根据动物品种，选择合适的纯化方法。
- 邓瑞春张明伟白云秀汪劲松黄英毛宁
- 关键词：A蛋白抗体血清
- HGF修饰的MSCs治疗股骨头坏死的基础研究被引量：1
- 2010年
- 目的研究肝细胞生长因子(HGF)修饰的骨髓间充质干细胞(MSCs)治疗股骨头坏死(ONFH)的可行性。方法以40只新西兰兔为实验动物制作股骨头坏死模型,2周后随机分为MSCs组及HGF/MSCs组,透视下行股骨头钻孔后分别注入MSCs悬液及HGF/MSCs悬液,4周后处死动物,对股骨近端进行Micro-CT、组织学及免疫组化观察,了解两种方法对股骨头坏死灶的治疗差异。结果 HGF/MSCs悬液的Micro-CT影像学指标显示骨小梁数量增加,钻孔隧道消失,BMD(517.41±69.37)mg/ml,TMD(817.61±12.31)mg/ml,BVF0.61±0.11,主要指标均优于MSCs悬液组,组织学及免疫组化结果方面也有明显改善。结论 HGF/MSCs悬液可有效治疗股骨头坏死。
- 周密郭子宽王岩张树明张莉傅捷汪爱媛马建军汪劲松
- 关键词：肝细胞生长因子间质干细胞股骨头坏死
- 兔股骨头坏死钻孔减压模型的相关研究
- 2010年
- 目的评估兔股骨头钻孔减压后细胞注入的可行性。方法模拟临床手术,对20只股骨头坏死的新西兰兔于透视下行经皮股骨头钻孔减压及0.9%氯化钠注射液注入,并进行Micro-CT、组织学及免疫组化检查;对4只新西兰免进行经皮股骨头钻孔减压及印度墨水注入,观察墨水弥散情况。结果以2mm克氏针及骨髓穿刺针可有效完成钻孔减压及0.9%氯化钠注射液注入,印度墨水注入后分布较为均匀。结论模拟临床钻孔减压手术向兔股骨头内注入细胞悬液是可行的。
- 周密王岩郭子宽汪劲松张树明徐建强赵斌汪爱媛眭翔
- 关键词：股骨头
- 激素性兔股骨头坏死的动物模型研究被引量：1
- 2010年
- 目的研究内毒素脂多糖(LPS)+甲基强的松龙(MPSL)兔股骨头坏死模型的组织学、Micro-CT及免疫组化特点。方法22只新西兰兔静脉注射LPS10μg/kg,24h后肌注MPSL20mg/kg,1次/d,共3d。存活动物6周观察Micro-CT骨计量学、组织病理学等项目,并与20只未用药新西兰兔对比。结果LPS+MPSL造模后动物死亡2只,存活动物的骨坏死率为80.0%(16/20),骨陷窝空虚率为(33.6±2.4)%;Micro-CT骨计量学各项指标显著低于对照组,组织病理学显示造模组出现明显骨坏死灶。结论LPS与MPSL联合应用可有效建立骨坏死模型。
- 周密王岩张树明汪爱媛赵斌汪劲松张莉傅捷郭子宽
- 关键词：内毒素类脂多糖类股骨头坏死
- 基因工程半成品中大肠杆菌蛋白残余量测定方法研究—双抗体夹心ELISA法被引量：1
- 1998年
- 用大肠杆菌ＤＨ５α菌体蛋白免疫家兔制备抗血清，建立了双抗体夹心ＥＬＩＳＡ方法。经初步测定，该方法的灵敏度为１．５ｎｇ／ｍｌ，与间接ＥＬＩＳＡ法的灵敏度相似，比聚丙烯酰胺凝胶电泳的考马斯亮兰染色方法的灵敏度高将近７００倍，比银染色方法的灵敏度高将近３０倍。在２０～１００００ｎｇ／ｍｌ范围内呈直线关系，直线相关系数为０．９９６。经八次重复测定，显示很好的重复性。该方法可用于测定基因工程产品中ＤＨ５α菌体蛋白的残余量。
- 邓瑞春张明伟白云秀汪劲松黄英毛宁
- 关键词：ELISA基因工程大肠杆菌
- 肝细胞生长因子修饰兔骨髓间充质干细胞的实验研究被引量：4
- 2010年
- 目的研究重组腺病毒肝细胞生长因子对兔骨髓间充质干细胞的转染率及转染后细胞的分化特点。方法获取骨髓间充质干细胞并传代培养、鉴定,以MOI=150的重组腺病毒肝细胞生长因子(Ad-HGF)对其进行修饰,以Ad-GFP检测病毒72h转染率,观察转染后细胞的成骨及成脂分化特点。结果 Ad-HGF对MSCs感染效率为99.78%,成骨及成脂诱导14d后可见典型分化。结论以Ad-HGF对MSCs进行感染效果良好,可成为缺血性骨坏死较为有效的治疗手段。
- 周密王岩张树明汪劲松傅捷张莉徐建强娄晓郭子宽
- 关键词：肝细胞生长因子骨髓间质干细胞
- 肝细胞生长因子基因修饰的人脐带间充质干细胞对大鼠慢性肝损伤的治疗研究被引量：3
- 2013年
- 目的:研究肝细胞生长因子(HGF)基因修饰的人脐带间充质干细胞(MSC)对Wistar大鼠慢性肝损伤的治疗作用。方法:利用携带人HGF基因的重组腺病毒(Ad-HGF)对MSC进行基因修饰;通过皮下注射CCl4-橄榄油溶液建立大鼠肝损伤模型;56只Wistar雄性大鼠随机分为正常对照组、模型组、MSC组、HGF组和HGF/MSC组,分别尾静脉注射生理盐水、MSC、Ad-HGF或HGF/MSC,通过血清肝功能检测及肝组织的生化指标、病理切片等评价治疗效果。结果:利用腺病毒将HGF基因转入MSC并确定了最佳感染条件。CCl4-橄榄油诱导4周后,动物肝脏外观出现明显的脂肪变性和血清转氨酶明显升高,表明成功诱导了大鼠慢性肝损伤模型。经过4周治疗,治疗组动物的体重明显升高、肝指数明显降低,动物存活率高于模型组(模型组:50%;MSC组:70%;Ad-HGF组:70%;HGF/MSC组:90%)。肝功能指标测定结果显示,与模型组比较,HGF/MSC组动物的天门冬氨酸氨基转移酶(406.75±35.98 vs.513.75±12.71U/L,P<0.01)、丙氨酸氨基转移酶(124.6±10.6 vs.169.67±15.38 U/L,P<0.05)和总胆红素(14.6±2.08 vs.19.25±1.38g/dL,P<0.01)均明显降低,白蛋白含量(29.1±1.3 vs.22.05±2.61 g/L,P<0.05)明显升高;Ad-HGF组只有天门冬氨酸氨基转移酶(436.0±18.40 vs.513.75±12.71 U/L,P<0.05)明显降低;而单纯MSC治疗对肝功能改善不明显。丙二醛测定结果显示,治疗后动物肝组织中的过氧化反应均较模型组显著减弱。HGF/MSC组和MSC组动物肝组织中的羟脯氨酸含量与模型组比较明显降低(69.27±14.58,63.23±13.23 vs.96.59±15.05 mg/mL,P<0.01)。上述实验结果提示3种治疗方式对CCl4-橄榄油引起的大鼠肝损伤均有一定的治疗效果,可减轻CCl4导致的肝损伤程度,增加动物体重,降低肝脏指数,减轻肝组织的过氧化反应,提高动物的存活率,其中HGF/MSC治疗效果最为明显,而且细胞注射没有引起动物的不良反应。结论:3种治疗方式均可改善CCl4导�
- 陈瑶瑶李艳琪刘杨汪劲松刘冬梅吴祖泽靳继德
- 关键词：肝细胞生长因子间充质干细胞CCL4慢性肝损伤
- 血小板裂解物支持人骨髓基质细胞的扩增被引量：2
- 2009年
- 目的探讨血小板裂解物体外培养、扩增人骨髓基质干细胞的可行性。方法将富含血小板血浆以冻融裂解法处理,培养人骨髓基质干细胞;体系中加入不同浓度的裂解物,MTT法检测细胞体外增殖情况;流式细胞仪分析细胞表型特征,并应用细胞化学染色法观察细胞体外成骨和成脂肪能力。结果血小板裂解物培养的骨髓基质干细胞呈典型的成纤维细胞形态,均一呈现CD14、CD31、CD34、CD45及HLA-DR阴性和CD73、CD90、CD105、CD166阳性,具备体外成骨、成脂分化能力。此外,与经筛选的胎牛血清比较,低浓度血小板裂解物即具有支持骨髓基质干细胞扩增的能力。结论血小板裂解物可替代胎牛血清,用于骨髓基质干细胞的体外扩增。
- 楼晓汪劲松靳继德何梓铭吴祖泽郭子宽
- 关键词：骨髓基质细胞血小板细胞培养扩增
- 肝细胞生长因子基因修饰间充质干细胞治疗股骨头坏死的探索性研究被引量：3
- 2009年
- 目的探讨肝细胞生长因子基因修饰自体骨髓间充质干细胞治疗股骨头坏死的可行性,并评价其疗效。方法对1例ARCOⅢB股骨头坏死患者,手术过程中局部注射肝细胞生长因子基因修饰的自体骨髓间充质干细胞1×107个,随访观察评价其临床疗效和影像学改变。结果治疗过程顺利,术后无感染及过敏等严重并发症发生。术后随访9个月,患者髋关节疼痛指数较治疗前明显降低,髋关节临床症状Harris评分分值由治疗前的63分提高到治疗后的76分,髋关节活动度Harris评分由治疗前分值2.5分提高至4.2分。CT扫描显示损伤局部出现重建性骨修复,低密度区范围缩小,密度增高。ARCO分期由ⅢB改善至ⅢA。结论肝细胞生长因子基因修饰的自体骨髓间充质干细胞治疗股骨头坏死,安全有效,本次探索为进一步临床研究奠定了基础。
- 楼晓宫恩年商丰元魏成刚施志超汪劲松吴祖泽郭子宽
- 关键词：股骨头坏死间充质干细胞肝细胞生长因子
- SPK1基因转染对大鼠骨髓间充质干细胞的影响被引量：2
- 2010年
- 目的观察鞘氨醇激酶-1(SPK-1)基因修饰对大鼠骨髓间充质干细胞生物学特性的影响。方法分别用携带SPK-1和绿色荧光蛋白(GFP)的腺病毒载体,感染大鼠骨髓间充质干细胞后用WesternBlot的方法检测SPK1蛋白表达,用[32P]ATP掺入法检测SPK-1酶活性,用MTT法测定细胞增殖,用特殊诱导剂在体外向成骨和成脂细胞诱导后检测碱性磷酸酶的活性及油红O染色,用AnnexinV-PI双标法检测去血清诱导后细胞凋亡比例。结果Ad-SPK感染大鼠骨髓间充质干细胞后可有效表达SPK-1蛋白且有较高的酶活性;基因转染不影响MSC的增殖和向成骨、成脂细胞的分化,但可显著抑制去血清诱导的细胞凋亡。结论腺病毒介导的SPK-1基因转染不影响MSC的增殖、分化等干细胞基本特性,但可显著增强其抗凋亡能力。
- 边素艳盖鲁粤叶平郭子宽李庆芳汪劲松王华
- 关键词：骨髓间质干细胞
