毛峰峰
- 作品数：30 被引量：90H指数：5
- 供职机构：第四军医大学实验动物中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 关于医学实验动物学教学改革趋势的几点思考被引量：2
- 2011年
- 鉴于医学实验动物学教学的重要性，笔者依据教学组以往的教学经验并结合国际实验动物学发展趋势．从教学内容、教学方式、教学方法等方面对实验动物学教学改革趋势进行了思考，以期为我们以后的教学实践提供指导。
- 毛峰峰梁书强赵勇张彩勤张海师长宏
- 关键词：医学实验动物学教学改革
- 结核分枝杆菌Rv1759c结构域与IL-2融合蛋白的表达与鉴定被引量：1
- 2011年
- 目的:构建结核分枝杆菌(MTB)Rv1759c结构域(Rv1759cD domain,Rv1759cD)与人IL-2(hIL-2)融合基因,并在大肠杆菌中表达获得重组的融合蛋白Rv1759cD-IL-2。方法:用PCR方法从MTB H37Rv基因组扩增Rv1759cD基因片段,测序后与hIL-2基因构建融合基因,并克隆到表达载体pProEX HTa。融合基因在大肠杆菌DH5α中诱导表达,经SDS-PAGE分析后,分别与His mAb、IL-2mAb和结核病人血清进行Western-blot鉴定,采用Ni-NTA亲和层析纯化蛋白。结果:获得的Rv1759cD基因经测序与GenBank公布的序列完全一致,与hIL-2基因连接后,构建的融合基因在大肠杆菌中有效表达。表达蛋白相对分子量为30KDAa,与预测值相符;Western-blot结果显示,在相对分子量30KDAa处分别与His mAb和鼠抗IL-2 mAb形成结合带,并与结核病人血清出现特异性结合。通过Ni-NTA亲和层析,可得到纯化的目的蛋白。结论:成功表达、纯化和鉴定了Rv1759cD-IL-2融合蛋白,并有可能作为新型结核病疫苗的靶抗原。
- 师长宏江鹰毛峰峰赵勇张彩勤赵善民白冰陈涛
- 关键词：结核分支杆菌IL-2
- 自噬相关基因LC3-I的基因表达及单克隆抗体的制备
- 2013年
- 目的：通过克隆LC3．I基因，体外原核表达LC3-I蛋白后制备抗LC3单克隆抗体，作为自噬研究中的标记分子检测自噬的发生和发展过程。方法：RT．PCR方法从RAW264．7细胞基因组中克隆LC3基因，亚克隆至pQE80L原核表达载体后转化E．cobDH5a进行诱导表达，SDS—PAGE电泳及Westemblot鉴定表达蛋白。蛋白纯化后免疫BALB／c小鼠。采用淋巴细胞杂交瘤技术，制备分泌抗LC3．I杂交瘤细胞株，体内诱生腹水制备mAb，间接ELISA法测定其效价，辛酸一硫酸铵沉淀法及亲和层析法纯化mAb。结果：成功克隆了LC3一I基因，并对其在E．coilDH5a进行诱导表达，SDS-PAGE分析表明在相对分子量Mr为20×10^3有特异条带，Westernblot验证表达产物具有一定的生物学活性。建立了3株稳定分泌特异性抗LC3-ImAb的杂交瘤细胞株，诱导产生的腹水获得的抗体效价在10^5-10^7之间，结论：在E．coli中对LC3-I进行表达，并制备特异性较强抗LC3-I蛋白的单克隆抗体。为自噬研究提供了良好的标记分子，可对自噬形成和发展进行有效的检测。
- 赵勇李羽伍静张彩勤白冰毛峰峰师长宏张海
- 关键词：原核表达抗体单克隆
- 朱鹮低致病性禽流感病毒的分离与鉴定被引量：3
- 2011年
- 为了掌握朱鹮禽流感病毒流行情况,利用鸡胚分离方法从病死朱鹮脑组织标本中分离出禽流感病毒毒株,并将所分离的病毒进行血凝试验、血凝抑制试验、鸡胚最小致死量平均死亡时间(MDT)、半数致死量(LD50)及1日龄鸡脑内接种致病指数(ICPI)试验。结果表明,所分离的病毒均能够凝集鸡、肉鸭、绵羊、山羊、猪、人、兔等的红细胞,且这种血凝性可被H9型标准抗体血清所抑制,所分离毒株的MDT为48 h,LD50指数为50%,ICPI为1.544。以上结果表明所分离的病毒为低致病力禽流感毒株。
- 李六斤毛峰峰师长宏张海赵勇张彩勤白冰
- 关键词：朱鹮禽流感病毒
- 表达HBHA和hIL-12融合蛋白的重组耻垢分枝杆菌在小鼠体内诱导的免疫应答及保护力被引量：1
- 2012年
- 目的:测定表达肝素结合血凝素(HBHA)和人白细胞介素12(hIL-12)融合蛋白的重组耻垢分枝杆菌在小鼠体内诱导产生的免疫应答及对结核分枝杆菌感染的保护作用。方法:将表达HBHA和hIL-12融合蛋白的重组耻垢分枝杆菌采用同源加强免疫的方法免疫小鼠,检测小鼠外周血中IFN-γ、IL-2和IL-12的表达水平;用结核分枝杆菌感染免疫小鼠,检测小鼠肺部荷菌量和组织病理变化。结果:表达HBHA和hIL-12融合蛋白的重组耻垢分枝杆菌诱导小鼠产生以IFN-γ、IL-2分泌量增加为主的Th1型免疫应答,并能有效减少感染小鼠肺部结核分枝杆菌的荷菌量和病理损伤。结论:表达HBHA和hIL-12融合蛋白的重组耻垢分枝杆菌免疫小鼠可诱导产生与卡介苗相当的保护作用,可能成为控制结核病的有效疫苗。
- 赵善民赵勇张彩勤毛峰峰白冰张海师长宏徐志凯
- 关键词：耻垢分枝杆菌肝素结合血凝素人白细胞介素12保护力
- 裸鼠荷瘤实验中常见问题的解析和总结被引量：3
- 2012年
- 目的探讨裸鼠荷瘤过程中的出现的常见问题,提高裸鼠荷瘤的成功率。方法通过分析实验过程中影响裸鼠荷瘤的各种因素,寻求裸鼠荷瘤常见问题的解决方案。结果总结了在裸鼠荷瘤实验中的各种影响因素,并提出了合理的建议。结论裸鼠肿瘤模型的制备是研究肿瘤学、免疫学、药品与生物制品的安全性评价以及有效性筛选等研究课题的基础,本文为制备良好的裸小鼠肿瘤模型提供合理的建议。
- 赵勇伍静毛峰峰赵善明张彩琴白冰师长宏
- 关键词：裸鼠肿瘤
- 近红外荧光染料IR-783介导的肿瘤成像被引量：5
- 2014年
- 目的评估近红外荧光染料IR-783在犬自发性肿瘤中的特异性成像。方法将IR-783染料(5μmol/kg)腹腔注射荷瘤裸鼠,通过活体成像仪检测IR-783的代谢周期,在此基础上,将IR-783染料(1.5μmol/kg)通过后肢静脉注射入自发肿瘤犬体内,5 d后手术切除肿瘤组织,分别进行荧光成像、组织切片HE染色、冰冻切片荧光观察。结果 IR-783染料注射荷瘤裸鼠后可以在肿瘤部位检测到特异性荧光,连续观察8 d,仍有较强的荧光。IR-783注射自发肿瘤犬5 d后,可在肿瘤组织中检测到特异性荧光。结论近红外荧光染料IR-783能够被肿瘤组织特异性吸收,可用于犬自发性肿瘤的特异性诊断,具有重要的临床应用前景。
- 张彩勤张海赵勇毛峰峰白冰师长宏
- 关键词：裸鼠
- 表达HBHA和hIL-12融合蛋白的重组耻垢分枝杆菌对结核分枝杆菌感染小鼠的免疫治疗作用被引量：4
- 2012年
- 评价表达HBHA和hIL12融合蛋白的重组耻垢分枝杆菌用于结核分枝杆菌感染小鼠的免疫治疗效果。结核分枝杆菌H37Rv感染小鼠4周后,用表达HBHA和hIL12融合蛋白的重组耻垢分枝杆菌免疫治疗,检测免疫小鼠肺部荷菌量和组织病理变化。重组耻垢分枝杆菌可有效控制感染小鼠肺部结核分枝杆菌的荷菌量,减轻病理损伤。但在降低肺部荷菌量方面不如化疗药物。表达HBHA和hIL12融合蛋白的重组耻垢分枝杆菌可有效控制结核分枝杆菌在小鼠体内的增殖,可能成为联合化疗药物控制结核病的有效候选疫苗。
- 赵善民张彩勤赵勇毛峰峰白冰张海师长宏徐志凯
- 关键词：重组耻垢分枝杆菌结核分枝杆菌HBHA
- 大、小鼠微生物检测质量控制探讨被引量：2
- 2012年
- 实验动物质量直接影响科研数据的准确性,通过定期微生物检测,可对实验动物质量进行控制,因此对检测结果进行质量控制是对检测工作进行日常管理和监督的有效和必要的手段。实验室通过总结近年检测工作经验,对微生物检测质量控制工作进行探讨,为实验动物质量检测提供相关资料。
- 白冰张海毛峰峰赵勇张彩勤赵善民师长宏
- 关键词：小鼠
- 小茴香挥发油的抗炎镇痛作用被引量：34
- 2011年
- 目的:研究小茴香挥发油的抗炎、镇痛作用,为指导临床合理用药提供科学依据。方法:应用二甲苯致小鼠耳廓肿胀、蛋清致大鼠足肿胀2种动物模型进行抗炎药效学实验;采用醋酸致小鼠扭体反应进行镇痛实验。结果:小茴香挥发油能显著抑制上述各种动物模型的炎症反应及醋酸引起的小鼠扭体反应。结论:小茴香挥发油具有抗炎和镇痛作用。
- 滕光寿刘曼玲毛峰峰韩燕杨鹏石磊畅敏
- 关键词：小茴香挥发油抗炎镇痛
