林卿
- 作品数：12 被引量：20H指数：2
- 供职机构：复旦大学更多>>
- 发文基金：国家重点实验室开放基金上海市科学技术委员会资助项目上海市自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 重组血管内皮细胞生长因子在大肠杆菌的高效表达被引量：8
- 1997年
- 目的:使重组血管内皮细胞生长因子(VEGF)在大肠杆菌中得到高效表达.方法:通过构建表达重组VEGF的质粒PRL621/VEGF,并在大肠杆菌中高效表达.结果:表达量约占菌体总蛋白的40%.对形成包含体的表达产物进行变性,初步复性处理,得到重组人VEGF粗提液,鸡胚绒毛尿囊膜试验表明有促血管生长活性,N-端15个氨基酸序列分析结果,与天然VEGF蛋白质相应序列一致.
- 何延政张培华刘建平王顺德蒋米尔陆民黄新天林卿谢毅
- 关键词：血管内皮细胞大肠杆菌VEGF
- 靶向于组织因子的抗体、其制备方法和用途
- 本发明提供了靶向于组织因子的抗体、其制备方法和用途。具体地，本发明公开了一种新的组织因子(TF)单克隆抗体。本发明还公开了制备所述的单克隆抗体的方法。本发明的单克隆抗体能够高特异性地结合TF抗原，其具有很高的亲和力及很低...
- 余科张学赛林卿李晴柔
- 文献传递
- 检测人结肠癌组织端粒酶活性的TRAP方法研究被引量：2
- 1999年
- 对检测人结肠癌组织端粒酶活性的端粒酶重复序列扩增法（ＴＲＡＰ）进行了研究．当Ｍｇ２＋浓度为１８ｍｍｏｌ／Ｌ、退火温度为５５℃时，能得到可靠的检测结果．影响检测结果可靠性的另两个因素是抽提物的反应用量和阳性片段的污染．
- 顾少华江广平曹根涛盛继群刘建平戴建凉戴建凉林渊林卿刘为平谢毅
- 关键词：结肠癌组织端粒酶活性
- 人神经营养因子-3基因在大肠杆菌中的克隆和表达
- 1999年
- 目的 :获得人神经营养因子 - 3 (hNT - 3 )在大肠杆菌中的克隆并表达。方法 :采用PCR方法从 2 0周人胎脑cDNA文库中扩增hNT - 3基因 ,通过双酶切法在M 13mp18载体上克隆获得全长基因 ,将正确全长基因插入PBV2 2 0载体 ,通过选择合适宿主菌获得hNT - 3的高效表达。结果 :获得全长基因完全正确的hNT - 3基因 ,获得占细菌总蛋白 3 0 %的hNT - 3表达菌株。结论 :本研究获得了序列正确的hNT - 3基因克隆 ,并实现了在大肠杆菌中的高效表达。
- 章建程殷明戴建凉林卿余浩刘忠权
- 关键词：PCR扩增基因重组基因表达
- 基因多位点定点突变法机理的探讨被引量：1
- 1997年
- 用多个化学合成的寡聚脱氧核苷酸作为诱变引物,对枯草杆菌蛋白酶E(Subtilisin E或APr E)基因进行体外突变,借此系统地探讨了基因多位点定点突变中引物的类型和数量、引物的分布、引物间的相互位置、引物与模板DNA间摩尔数比等因素对突变效果的影响。
- 肖谷田谢毅王顺德林卿叶韫辉吴小舟
- 关键词：定点突变蛋白质基因工程突变
- 人16周胎儿脑cDNA文库的构建及鉴定
- 2000年
- 本文从 16周的胎儿脑中抽提总 m RNA,经过一系列酶促反应后合成 c DNA,分级分离柱除去小片段 DNA后克隆到λgt10载体中 ,转染宿主菌 C60 0 hfl,文库包装效率为 4 .2× 10 6pfu/μg,得到的原始克隆数为 2 .1× 10 6,c DNA插入片段平均大于 1.2 kpb.根据已知序列设计引物 ,从这个 c DNA文库中扩增出血管内皮生长因子 ( VEGF)的全长 c
- 杨岐生林卿谢毅
- 关键词：CDNA文库VEGF胎儿
- 用差异显示法从人胎脑基因文库分离一个编码序列被引量：4
- 1999年
- 人１８周、２２周胎儿脑、肝肾组织总ｍ ＲＮＡ 用ＤＤＲＴ－ＰＣＲ显示出差异的条带，回收胎脑和肝肾特异性表达的４８７条电泳条带．其中某些条带用３种组织的ｃＤＮＡ 探针作点杂交，筛选只对胎儿脑总呈阳性的ＤＮＡ 片段．以其中某一条带ＤＮＡ 为探针，从胎儿脑ｃＤＮＡ 文库筛选阳性克隆，得到ＧＣ５８．经Ｎｏｒｔｈｅｒｎ 杂交和ＤＮＡ 测序，表明它是人脑表达的序列，与数据库中ＫＩＡＡ０５１５有同源性，并编码一个有２７４个氨基酸的蛋白质，该蛋白质序列尚未见报道．探讨了ＤＤＲＴ－ＰＣＲ的条件和假阳性问题．
- 杨岐生林卿李奕谢毅
- 关键词：人脑DDRT-PCRDNA序列基因分离
- 脊椎动物前脑发育的研究进展被引量：2
- 1996年
- 胚胎早期神经系统的发生包括两个不可分开的阶段,即活化和转化过程。活化过程开始于原肠胚早期,是神经发生的诱导过程。稍晚的转化阶段发生了神经系统局部结构的形成,即区域化过程。活化的关键是原肠胚中胚层产生诱导性信号分子和外胚层对信号的应答,区域化也是诱导的结果,造成中枢神经系统有各种局部结构,即具有不同细胞谱系和功能的神经元节(neuromere)。
- 杨岐生林卿
- 关键词：脊椎动物发育
- 全文增补中
- 人18周胎儿脑cDNA文库的构建及鉴定被引量：2
- 1997年
- 许多脑基因的特异性表达对人脑的发育、分化有着重要的作用．为了研究这些基因的结构和功能，构建了一个人18周胎儿脑cDNA文库．抽提总mRNA后，经过一系列的酶促反应合成cDNA．分级分离柱除去小片段后克隆到λgt10载体中．转染宿主菌C600hfl后文库包装效率为4．6×106pfu／μg，cDNA平均插入片段大于1．2kbp．根据已知序列设计引物，从cDNA文库中扩增出神经生长因子（NGF）的全长编码基因．
- 林卿杨岐生殷明金丽娟肖谷田叶蕴辉刘建平王玮谢毅
- 关键词：胎儿胚胎学基因人类遗传学
- 20周人胎脑cDNA文库的构建被引量：1
- 2001年
- 为了研究舰船有害气体、噪声、磁场等特殊环境下人脑特异性基因表达的变化情况 ,构建了一个 2 0周人胎脑cDNA文库 ,实验从胎脑组织中抽提总mRNA后 ,经过一系列酶反应后合成cDNA ,分级分离柱除去小片段后克隆到λgt1 0载体 ,转染宿主菌E .coli.C6 0 0hf1后文库的包装效率为 4 .6× 1 0 6pfu/μg ,cDNA平均插入片段大于 1 .
- 殷明林卿戴建凉应康李奕刘忠权
- 关键词：滴度胎脑组织
