杨志建
- 作品数：6 被引量：30H指数：3
- 供职机构：浙江大学化学工程与生物工程学系更多>>
- 相关领域：生物学自动化与计算机技术化学工程更多>>
- 粪产碱杆菌青霉素G酰化酶在大肠杆菌中的表达及其分离纯化
- 粪产碱杆菌(Alcaligenes faecalis,Af)青霉素G酰化酶(PGA)具有独特的酶学性质,预示着其在半合成抗生素工业有着良好的应用前景.该文将粪产碱杆菌青霉素G酰化酶(AfPGA)基因构建表达载体pKKFP...
- 杨志建
- 关键词：粪产碱杆菌青霉素G酰化酶纯化
- 文献传递
- 导电聚合物生物传感器的研究进展被引量：12
- 2003年
- 导电聚合物因其良好的导电性能,可作为分子导线使电子在生物活性物质与电极间直接传递,是构建生物传感器的一种新材料。主要讨论了导电聚合物生物传感器的构建、生物活性物质的固定化。简要地回顾了此类生物传感器在医学、食品工业和环境监测等领域中的应用。
- 杨志建蔡谨袁中一
- 关键词：导电聚合物生物传感器固定化
- 粪产碱杆菌青霉素G酰化酶的分离提取被引量：4
- 2006年
- 比较研究了几种破碎大肠杆菌细胞的方法,如渗透压法、超声波法、玻珠震碎法、玻珠研磨法、有机溶剂法、冻融法以及盐酸胍/EDTA法等,以确定出一种简单、快速、高效的破碎重组大肠杆菌细胞的方法获得粪产碱杆菌青霉素G酰化酶(AfPGA)用于后续试验。结果表明玻珠震碎法、超声波法和渗透压法是较优的细胞破碎方法,活力回收率分别为99.7%、78.4%、60.7%,其他方法均低于22%。而比活力以渗透压法为最高,达到4.40 U/mg。
- 孙健杨志建许国旺袁中一
- 关键词：大肠杆菌细胞破碎比活力
- 粪产碱杆菌青霉素G酰化酶在大肠杆菌中的高效表达
- 本发明公开了一种粪产碱杆菌青霉素G酰化酶(AfPGA)高效表达质粒psmlfpga的构建方法；利用该方法得到的质粒psmlfpga转化大肠杆菌宿主DH5α，得到大肠杆菌基因工程菌株CGMCC No.1023，其不需诱导便...
- 袁中一杨志建蔡谨
- 文献传递
- 粪产碱杆菌青霉素G酰化酶在大肠杆菌中的高效表达
- 本发明公开了一种粪产碱杆菌青霉素G酰化酶(AfPGA)高效表达质粒psmlfpga的构建方法；利用该方法得到的质粒psmlfpga转化大肠杆菌宿主DH5α，得到大肠杆菌基因工程菌株CGMCC No.1023，其不需诱导便...
- 袁中一杨志建蔡谨
- 文献传递
- 粪产碱杆菌青霉素G酰化酶在大肠杆菌中组成型表达及分离纯化被引量：13
- 2004年
- 将粪产碱杆菌青霉素G酰化酶基因构建重组表达质粒pKKFPGA ,pKKFPGA再转化宿主菌DH5α,所得重组菌不需诱导便能高效表达青霉素G酰化酶 ,表达量达 2 5 90u L ,比野生型粪产碱杆菌表达量高 4 32倍 ,其菌体比活力达 30 0 (u L) A6 0 0 。菌体破碎后的上清液经DEAE_SepharoseCL 6B离子交换层析和Butyl_SepharoseCL 4B疏水层析 ,即可得纯度提高 2 0倍、比活为 6 8 6u mg的青霉素G酰化酶 ,两步纯化的总收率达 91%。Western印迹分析表明 5 %的原前体青霉素酰化酶在胞内形成了包涵体 。
- 杨志建蔡谨孙健袁中一
- 关键词：青霉素G酰化酶粪产碱杆菌纯化包涵体大肠杆菌
