李葳
- 作品数：35 被引量：168H指数：8
- 供职机构：中国动物卫生与流行病学中心更多>>
- 发文基金：陕西省自然科学基金国家自然科学基金农业部农业行业标准制定和修订项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 己烯雌酚完全抗原的合成和多克隆抗体的制备被引量：4
- 2005年
- 采用混合酸酐法 ,将己烯雌酚与牛血清白蛋白或卵清蛋白偶联形成完全抗原。经紫外分光光度计扫描鉴定 ,并通过聚丙烯酰胺电泳实验 ,推算出牛血清白蛋白与DES HS的结合比是 1∶2 5～ 1∶30。以己烯雌酚 -牛血清白蛋白为抗原免疫家兔 ,制备出多克隆抗体 ,经酶联免疫吸附试验和琼脂扩散试验进行鉴定 ,并采用酶联免疫吸附方法进行效价测定 ,抗血清效价均超过了 1∶1 0 0 0 0。
- 曲志娜刘爽路平雷利辉陈德坤李葳孙淑芳张衍海郑增忍郭福生蒋正军
- 关键词：己烯雌酚多克隆抗体酶联免疫吸附测定法雌激素
- 运用RT-PCR一步法和Nested-CR法快速检测FMDV的研究被引量：6
- 1997年
- 将Ｏ、Ａ型ＦＭＤＶＲＮＡ分离纯化，用ＲＴ－ＰＣＲ法扩增其聚合酶编码基因，可检测到Ａ型１０－６倍稀释、Ｏ型１０－４倍稀释乳鼠肌肉毒。Ｎｅｓｔｅｄ－ＰＣＲ扩增该基因内部片段，进一步说明该方法准确可靠。ＲＴ－ＰＣＲ一步完成使整个检测时间不超过１２小时。
- 蒋正军尹燕博龚振华马洪超孙淑芳蔡丽娟郭福生李葳吴时友黄运生林庆燕丁有胜骆德海陈义民
- 关键词：口蹄疫病毒FMDV聚合酶链反应
- 口蹄疫3ABC蛋白基因的克隆与序列分析的研究被引量：1
- 2003年
- 摘要:采用RT-PCR扩增FMDV的3ABC蛋白DNA,将其与pUCm-T载体连接,构建pUCm-3ABC重组质粒,序列分析表明,pUCm-3ABC重组质粒的插入DNA与多种血清型FMDV的相同DNA区段有较高的同源性,提示可进一步用pUCm-3ABC重组质粒研究FMDV3ABC蛋白的表达抗原。
- 龚振华郑增忍刘俊辉陆明哲郭福生蒋正军王玉东张衍海黄秀梅李葳李玉清
- 关键词：口蹄疫基因克隆传染病
- 己烯雌酚人工抗原的合成和酶免疫检测方法的建立被引量：2
- 2006年
- 通过化学方法合成己烯雌酚单羧甲基醚,并通过核磁共振和质谱进行鉴定;分别用混合酸酐法和碳二亚胺法将其与牛血清白蛋白(BSA)和鸡卵清蛋白(OVA)偶联,合成己烯雌酚人工抗原,经紫外扫描、聚丙烯酰胺凝胶电泳和动物免疫试验证实人工抗原合成成功,并制备了抗己烯雌酚的特异性多克隆抗体,同时建立了己烯雌酚的酶免疫检测方法,这对动物性食品中己烯雌酚的残留检测有重要意义。
- 古艳丽曲志娜陈德坤郑增忍路平刘爽李葳张桂金谭维泉
- 关键词：己烯雌酚人工抗原酶免疫检测
- 绿脓杆菌引起狐狸流产的临床病原学和病理学诊断被引量：10
- 1998年
- 绿脓杆菌引起狐狸流产的临床病原学和病理学诊断尹燕博徐瑞李葳孙淑芳蔡丽娟（农业部动物检疫所青岛２６６０３２近两年来，山东半岛地区某乡镇狐狸养殖场每逢春季约有一半以上的母狐狸发生空怀、死胎和流产。一般在配种后２０天左右表现精神沉郁、食欲减少、尿白（个别有...
- 尹燕博徐瑞李葳孙淑芳蔡丽娟
- 关键词：狐狸流产绿脓杆菌病原学病理学
- 非洲猪瘟间接ELISA诊断试剂盒的研究被引量：30
- 2000年
- 用带有编码非洲猪瘟病毒衣壳蛋白Ｐ７２ 基因的重组杆状病毒（Ｂａｃｐ７２）作载体，在ｓｆ９细胞中表达并得到重组Ｐ７２蛋白，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ可得到分子量在 ７２ｋＤａ左右的电泳带。用标准阳性非洲猪瘟血清对 Ｐ７２蛋白进行 ＥＬＩＳＡ检测，证明该蛋白具有生物学活性。用Ｐ７２作为间接法的包被抗原，对ＥＬＩＳＡ反应条件进行了优化。确定最佳包被液为ＰＢＳ（ｐＨ７．２）、最佳封闭液为１％ＰＣＴ、最佳血清稀释液为４％ＰＥＧ６０００／ＰＢＳ、最佳冲洗液为０．５Ｍ ＮａＣｌ／０．５％Ｔｗｅｅｎ－２０／ＰＢＳ（ｐＨ７．２）。本实验反应体系采用５０μｌ的微量法，可节约试剂及抗原。反应在２小时内即可完成，达到了快速诊断的目的。包被了抗原并用封闭液封闭后的酶标板密封后保存于－２０℃的冰箱中，至少可以保存５个月。阻断试验和交叉试验表明ＥＬＩＳＡ法有良好的特异性。间接ＥＬＩＳＡ比Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ法具有更高的灵敏性。血清学调查没有得到阳性结果，与我国实际情况相符。用Ｂａｃｐ７２表达的非洲猪瘟病毒Ｐ７２蛋白抗原作为间接ＥＬＩＳＡ的检测抗原来检测非洲猪瘟血清具有快速、简单、无感染的特点。本实验为非洲猪瘟ＥＬＩＳＡ检测试剂盒的最终组装提供了实验依据。
- 蒋正军马世东蔡丽娟单文鲁王树双尹燕博龚振华李葳宣华
- 关键词：非洲猪瘟ELISA
- PCR与病毒分离检测PPV感染的相关性研究被引量：1
- 2004年
- 以PPVVP2基因为模板设计、合成了1对引物 ,成功地从PPV兔体传代的组织及其细胞培养物中扩增出了312bp的特异性片段。敏感性试验表明 ,PCR扩增可以检测10-4TCID50 的病毒含量。利用该方法对12份PPV兔体传代的组织上清进行检测 ,查出了10份阳性 ;同时利用病毒分离、HA检测 ,查出了7份阳性。这些结果表明 ,本试验建立的PCR检测方法具有敏感性好、特异性强等特点 。
- 刘俊辉龚振华郭福生孙淑芳李葳王娟黄秀梅蒋正军王玉东郑增忍张衍海
- 关键词：PCRPPV猪细小病毒
- 猪链球菌病病原和病理学诊断被引量：9
- 1997年
- 对两个邻近的规模化养猪场发生的猪链球菌病进行了病原和病理学诊断。病猪主要表现为关节和皮下脓肿，融合性、小叶性肺炎，纤维素性心外膜炎和心包炎。两株分离物ＬＫ—１株和ＬＫ—２株经生化特性检查符合致病性链球菌的基本特征，经综合防制特别是猪链球菌蜂胶灭活疫苗的应用。
- 尹燕博徐瑞李葳蒋正军郭福生蔡丽娟孙淑芳
- 关键词：链球菌病病原学病理学猪病
- 多重RT-PCR检测猪口蹄疫病毒、猪水泡病病毒和猪水疱性口炎病毒的研究被引量：7
- 2006年
- 建立了一种同时检测猪口蹄疫病毒(FMDV)、猪水泡病病毒(SVDV)和猪水疱性口炎病毒(VSV)三种病原体的多重RT-PCR方法。参照文献报道的基因序列,设计合成了三对特异性引物;PCR扩增条件进行优化后,用这三对引物对同一样品中的FMDV、SVDV、VSVRNA模板进行扩增,结果同时得到了三条特异性条带,大小与试验设计相符:FMDV(208bp)、SVDV(862bp)、VSV(638bp),且对猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合症病毒(PRRSV)和猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)核酸扩增结果为阴性;三种病毒RNA模板检出的最小量均为10fg。试验证明,此方法经济、快速、敏感、特异,可用于FMDV、SVDV和VSV这三种猪水泡性疾病的鉴别诊断及流行病学调查。
- 祁会彩龚振华杨增岐郑增忍潘康锁李葳黄秀梅郭福生蒋正军
- 关键词：多重PCR猪口蹄疫病毒猪水泡病病毒
- 应用对流免疫电泳试验诊断水貂病毒性肠炎的研究初报
- 1989年
- 水貂病毒性肠炎,是一种由细小病毒引起的、以胃肠粘膜炎症和坏死变化为特征的、高度接触性的传染病。它具有较高的发病率和死亡率,是迄今世界公认的水貂三大病毒性传染病之一。 自1952年C.Wills确定本病病原为病毒以后,世界许多国家例如:丹麦、芬兰。
- 李增光王素月仰惠芬隋锡俭杨倩刘忠元李葳
- 关键词：对流免疫电泳水貂病毒性肠炎
