李泽君
- 作品数：143 被引量：370H指数：9
- 供职机构：中国农业科学院上海兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 2014~2016年江苏地区H9N2亚型禽流感病毒遗传进化及其分子特征的分析被引量：3
- 2018年
- H9N2亚型禽流感病毒(avian influenza virus, AIV)在我国广泛流行,给养禽业造成了巨大的经济损失,还对公共卫生安全存在潜在威胁. 2014～2016年, H9N2亚型禽流感病毒在江苏地区的活禽市场的鸡中的阳性率为8.39%～13.74%.选取10株H9N2分离株进行全基因组测序及遗传进化分析.结果表明, H9N2分离株的HA基因与早期的江苏分离株位于同一小分支上,且同源性较高,但NA基因与早期江苏病毒株的同源性较低,核苷酸同源性为91.4%～93.9%,氨基酸同源性为91.2%～93.8%.这些病毒株的基因型依然为B69,为目前的优势基因型.所有H9N2病毒分离株的HA蛋白的226位点为L.固相受体结合实验结果显示, H9N2分离株具有人源α2,6唾液酸受体的结合特性.
- 陈新武段旭彤王彦哲季雅宁石晓娜李雪松杨健美刘芹防陈鸿军滕巧泱李泽君
- 关键词：禽流感病毒H9N2进化分析
- 一种共表达不同亚型禽流感病毒基因且形成病毒样颗粒的真核表达载体的构建与鉴定被引量：1
- 2016年
- 动物流感DNA疫苗是非常有应用前景的新型疫苗之一,本研究构建了能同时表达禽流感病毒2种血凝素H5HA和H9HA以及1种神经氨酸酶N1NA的真核表达质粒。间接免疫荧光结果表明,构建的真核表达质粒转染MDCK细胞后,同时表达出H5HA、H9HA和N1NA蛋白;转染293T细胞上清通过血凝试验可检测到2-4血凝价;通过透射电镜观察到了病毒样颗粒。本研究用一种质粒同时表达不同亚型流感病毒蛋白并且形成了病毒样颗粒,为流感病毒多价DNA疫苗研究提供了坚实基础。
- 于周璐滕巧泱崔宏锐荣广玉李雪松杨健美陈鸿军李泽君
- 关键词：禽流感病毒样颗粒
- 高效表达HA蛋白的重组流感病毒及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种PR8重组流感病毒及其制备方法和应用，所述重组流感病毒含有H1、H3、H4、H5，H6、H7、H9或H10亚型流感病毒的HA和/或NA基因、含有PR8病毒的6个内部基因(PB1，PB2，PA，NP，M，N...
- 李泽君滕巧泱周洁文徐大伟
- 文献传递
- 一种鸭黄病毒及其疫苗、试剂盒
- 本发明属于生物工程领域，公开了一种鸭黄病毒，其囊膜蛋白E的氨基酸序列如SEQ ID NO：4所示或者与SEQ ID NO：4所示的氨基酸序列的同源性在98％以上。本发明还公开了一种用于预防上述的鸭黄病毒的疫苗，还公开了一...
- 李泽君颜丕熙闫丽萍滕巧泱
- 文献传递
- 蝙蝠流感病毒与H9N2亚型禽流感病毒M蛋白的免疫原性比较研究
- H17N10和H18N11两种新亚型的A型流感病毒的基因组序列在野生蝙蝠体内被报道之后,蝙蝠可能成为流感病毒新的贮存宿主而受到关注,蝙蝠流感病毒虽然与其他亚型流感病毒存在一定差异,但也具有IAVs变异能力强,易发生重组的...
- 黄敏刘宸瑞滕巧泱刘芹防李雪松陈鸿军李泽君杨健美
- 文献传递
- 鸭坦布苏病毒E基因DNA疫苗构建及免疫原性的初步研究被引量：15
- 2012年
- 鸭坦布苏病毒(DTMUV)感染引起产蛋鸭产蛋急剧下降。目前,没有预防该病的疫苗。为研究DTMUV DNA疫苗的免疫效果,本研究将DTMUV的E基因插入pCAGGS载体,构建了重组质粒pCAGGS-E。将pCAGGS-E转染293T细胞后,采用间接免疫荧光(IFA)和western blot检测E蛋白的表达情况。结果显示,两种方法均检测到了E蛋白的特异性表达。将pCAGGS-E用脂质体包裹后通过尾静脉注射免疫BALB/c小鼠,采用间接ELISA检测抗体的产生情况。结果表明,随着免疫次数的增加及免疫时间的延长,免疫小鼠的抗体滴度逐渐升高。本研究证明,编码E基因的重组质粒DNA免疫小鼠后能够诱导有效的免疫应答,为DTMUV DNA疫苗的研究奠定了基础。
- 徐大伟李国新李雪松姬希文李云章李泽君
- 关键词：DNA疫苗E基因
- 坦布苏病毒MM1775株反向遗传操作系统的建立
- 2015年
- 本研究将坦布苏病毒MM1775株全基因组分3段克隆,获得3个重组质粒,利用融合PCR方法扩增得到5'端含有T 7启动子的病毒全长c DNA,经体外转录得到感染性的RNA,将RNA转染DF-1细胞,48 h后出现细胞病变。当细胞病变达到90%,将细胞上清接种DF-1细胞,72 h后进行间接免疫荧光(indirect immunofulorescence,IFA)和RT-PCR鉴定,结果表明拯救病毒成功。序列测定结果显示,拯救毒的全基因组序列与亲本毒完全一致,表明MM1775反向遗传操作系统构建成功,为进一步研究坦布苏病毒致病性等相关分子机制奠定了基础。
- 闫大为吴晓刚李雪松石迎冯琳琳崔宏锐李国新李泽君
- H1N1亚型猪流感病毒HA1基因原核表达及鉴定被引量：1
- 2015年
- 本研究利用RT-PCR技术扩增禽源H1N1亚型猪流感病毒(Swine influenza virus,SIV)的HA1基因片段,将其连接至p Cold-TF载体上,菌液鉴定为阳性的克隆经测序验证正确后,提取质粒转化至高表达的表达宿主菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导并大量表达目的蛋白。表达产物经过纯化及SDS-PAGE电泳分析,表明重组蛋白以可溶性形式在上清中大量表达,大小约90 k Da,且在15℃、0.8 mmol/L IPTG条件下诱导24 h表达效果最好。通过Ni柱纯化后,经Western blot分析表明重组表达的蛋白能与禽源H1N1亚型SIV阳性血清发生特异性反应,具有较好的反应原性。
- 阮宝阳王林宫晓倩汪秀会刘晓敏汪琪单同领李泽君刘芹防陈鸿军滕巧泱童光志于海
- 关键词：HA1基因原核表达可溶性抗原性
- H5N1亚型高致病性禽流感病毒A/goose/Guangdong/1/96株反向基因操作系统的建立
- A/goose/Guangdong/1/96(GSGD/1/96)是我国分离的第一株H5N1亚型禽流感病毒,它不仅是97香港感染并致人死亡的H5N1亚型流感病毒HA基因供体株,而且是我国目前流行的H5亚型流感病毒的共同祖...
- 李泽君焦培荣于康震陈化兰
- 关键词：禽流感病毒H5N1亚型生物学
- 文献传递
- LC3蛋白敲除A549细胞系的构建及其对流感病毒复制的影响
- 2022年
- 微管相关蛋白1轻链3(LC3)是一种在流感病毒感染过程中被病毒M2蛋白招募至细胞膜处聚集的宿主细胞自噬相关蛋白。为了解其在流感病毒感染过程中行使的功能,利用CRISPR/Cas9技术构建LC3蛋白缺失细胞系,用以观察病毒生长复制的差异。设计sgRNA并插入至核心载体LentiCRISPRv2中,与辅助质粒共同转染293T细胞行慢病毒的包装。包装完成后用以感染A549细胞并进行嘌呤霉素压力筛选,对存活细胞的LC3蛋白含量进行检测,结果显示具有嘌呤抗性的细胞中未检测到LC3蛋白条带,LC3敲除细胞系构建成功。运用核染色法对比敲除细胞和正常细胞的细胞活性,发现缺失LC3蛋白细胞活性小幅度下降。流感病毒感染两种细胞绘制生长曲线,缺少LC3蛋白的条件下病毒复制水平下降。本研究构建的LC3蛋白缺失细胞系能够为将来研究LC3蛋白在细胞自噬与病毒感染过程中发挥功能,以及分子机制的研究提供了良好的细胞模型。
- 陆晨阳包旦奇马天馨牛世奇张婷任超超李雪松杨健美滕巧泱李泽君刘芹防
- 关键词：流感病毒
