李明华
- 作品数：4 被引量：0H指数：0
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- 相关领域：生物学更多>>
- 一种提高原核生物抗胁迫能力的多头绒泡菌蛋白PSTI1及其用途
- 本发明涉及一种提高原核生物抗胁迫能力的多头绒泡菌蛋白PSTI1及其用途，具体地说是提供一种从真核生物多头绒泡菌中分离的PSTI1蛋白和编码基因，以及利用该产品提高原核生物抗胁迫能力的用途。本发明通过实验证明在原核生物中过...
- 邢苗刘士德张建华陈汗英李明华
- 文献传递
- 多头绒泡菌微原质团瞬时表达系统的构建
- 2009年
- 真核生物多头绒泡菌的原质团是研究细胞周期的好材料。但尚无合适的表达体系可供选择。本研究用多头绒泡菌ardC actin基因启动子和终止子分别替换哺乳动物细胞表达质粒pDsRed1-N1的CMVIE和SV40 polyA片段,构建了多头绒泡菌红色荧光蛋白(RFP)表达质粒pXM1;用PardC-MCS-DsRed1-TardC替换pTB38表达盒PardC-hph-TardC,构建了多头绒泡菌RFP表达质粒pXM2。将多头绒泡菌转录延伸因子类似蛋白(PELF1)基因与质粒pXM2重组,构建了PELF1红色荧光融合蛋白(PELF1-RFP)表达质粒pXM2-pelf1。通过荧光显微镜和激光扫描共聚焦显微镜观察RFP表达发现,电转参数为4kV/cm(电场)、1A(电流)、70μs(电击时间)时,质粒pXM1和pXM2电转多头绒泡菌微原质团(≤500μm)后24～48h内,RFP荧光最显著;而PELF1-RFP则主要聚集在多头绒泡菌细胞核,说明本试验建立的表达系统可以用于研究特定蛋白在多头绒泡菌内的瞬时表达。
- 刘士德程彩霞林子扬张建华李明华周卓龙田生礼邢苗
- 关键词：多头绒泡菌
- 一种提高原核生物抗胁迫能力的多头绒泡菌蛋白PSTI1及其用途
- 本发明涉及一种提高原核生物抗胁迫能力的多头绒泡菌蛋白PSTI1及其用途，具体地说是提供一种从真核生物多头绒泡菌中分离的PSTI1蛋白和编码基因，以及利用该产品提高原核生物抗胁迫能力的用途。本发明通过实验证明在原核生物中过...
- 邢苗刘士德张建华陈汗英李明华
- 文献传递
- PSTI1可提高大肠杆菌应答胁迫能力
- 2011年
- 指出含典型34肽重复序列结构域(tetratricopeptide repeat,TPR)的胁迫诱导蛋白(stress-in-ducible protein-1,STI1)是真核生物特有的一类与胁迫应答有关的分子伴侣蛋白.作者从多头绒泡菌分离出一个STI1类似蛋白cDNA,因其编码蛋白含有两个非典型的TPR结构域,命名为PSTI1.为了解PSTI1对原核生物胁迫应答功能的影响,观察表达PSTI1的大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)与原菌株的增殖差异,发现PSTI1表达菌耐受盐、渗透压、重金属离子、氧化、缺氧和酸碱变化胁迫的能力均增强,但对高温敏感.PSTI1保守结构域TPR1能提高E.coli耐受渗透压胁迫的能力,但TPR2会使E.coli对盐和渗透压胁迫敏感,说明TPR1和TPR2在PSTI1调控胁迫应答中可能扮演不同角色.通过pull-down和质谱分析技术检测了与PSTI1作用的E.coli蛋白,发现PSTI1能与E.coli的HtpG(Hsp90)、La蛋白酶和过氧化氢酶HpII等作用,说明PSTI1具有原核生物非典型TPR结构域蛋白的类似功能,是类似STI1的胁迫应答蛋白.
- 刘士德陈汗英张建华田生礼李水明李慧丽李明华邢苗
- 关键词：多头绒泡菌CDNA文库大肠杆菌胁迫应答基因工程基因编码
