李丁
- 作品数：28 被引量：68H指数：4
- 供职机构：第四军医大学药学系肿瘤生物学国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划军队医药卫生科研基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学电子电信更多>>
- 人骨肉瘤差异表达基因的筛选及克隆
- 该实验的目的就是对骨肉瘤进行差异基因筛选,力图找出其特异性或相对特异性差异表达基因,为骨肉瘤发病机理的研究提供基因水平的理论依据,并为其临床预防、早期诊断及基因治疗提供新思路.研究对象为5对同源性骨肉瘤组织和正常骨组织标...
- 李丁
- 关键词：骨肉瘤差异表达基因克隆
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- 宫颈癌患者人乳头瘤病毒16型E6基因的克隆及序列分析被引量：3
- 2003年
- 目的 分析中国陕西地区宫颈癌患者人乳头瘤病毒 16型 (HPV16型 )E6基因的结构特点。方法 采用PCR技术扩增了 1例HPV16阳性宫颈癌患者癌组织中HPV16E6基因 ,并对其进行了克隆及全序列分析。结果 成功地克隆了HPV16E6基因 ,与GenBank收录的原型相比 ,E6基因中有 2个碱基发生突变 ,推导其编码的氨基酸有 1个发生了变化。
- 高艳娥张菊阎小君宋天保李丁
- 关键词：人乳头瘤病毒16型E6基因宫颈癌
- 高通量人乳头瘤病毒分型基因诊断方法的研究被引量：13
- 2003年
- 目的 建立一种可靠、简便经济、快速、高通量的人乳头瘤病毒 (HPV)分型检测新方法 ,并推向临床应用。方法 以各型HPV通用引物行聚合酶链反应 (PCR)扩增 12 7例患者的尖锐湿疣组织和宫颈刮片 ,将荧光偏振检测技术与模板指导的末端延伸反应 (TDI FP)结合 ,应用探针杂交延伸反应对临床样本扩增产物进行HPV分型 :HPV6 ,11,16 ,18,31,33,35 ,5 8检测 ,并以DNA序列测定结果为参照。结果 在 78例患者的尖锐湿疣组织块中HPV检出率 10 0 %,其中两型混合感染 14例 ,占18%,三型混合感染 5例 ,占 7%,三型以上混合感染 1例。 49例患者的宫颈刮片HPV检出率为 77%,其中两型混合感染 6例 ,占感染者的 17%,三型混合感染 3例 ,占感染者的 8%,三型以上混合感染 1例。但DNA序列测定方法仅能检出单独一型感染 ,未检出多重混合感染 ,两法对单一型检出符合率10 0 %。结论 本研究初步建立了通用、特异、便捷 ,无需标记探针 ,可自动化高通量用于临床的人乳头瘤病毒分型基因诊断方法。
- 张菊高艳娥闫小君尹国武白玉杰李丁
- 关键词：人乳头瘤病毒基因诊断方法荧光偏振
- 抗原肽冲击Angiostatin修饰淋巴细胞对Siha细胞的体内外作用
- 2002年
- 抗原呈递不充分导致缺乏免疫应答及局部血管增生及人乳头瘤病毒HPV感染相关癌肿的发生发展。以HPV16抗原肽冲击、重组血管生长抑制因子逆转录病毒pLXSN-An-giostatin转染的淋巴细胞对HPV16阳性宫颈癌Siha细胞作用,可能会提供一种新的生物治疗方法。 pBS-Angiostatin,Siha细胞株由本室保存。PCR引物由上海生工公司合成。HPV16L2抗原肽由美联公司合成。采用分别酶切载体pLXSN,pBS-Angiostatin,回收pLXSN与An-giostatin,构建pLXSN-Angiostatin,转染PA317细胞的方法。
- 张菊阎小君程虹李丁陈蕤赵锦荣
- 关键词：血管生长抑制因子淋巴细胞SIHA细胞
- 聚合酶链反应荧光偏振技术在乙型肝炎病毒DNA检测中的应用及价值被引量：11
- 2004年
- 目的 探讨聚合酶链反应荧光偏振技术 (PCR FP)检测乙型肝炎病毒 (HBV)DNA的临床应用价值。方法 将PCR扩增得到的HBVDNA特定片段 ,与荧光素标记探针和PCR产物中的一条DNA链杂交 ,形成特异杂交体 ,用荧光偏振光检测仪检测特异杂交体 ,最终判断HBVDNA是否存在。并对对 10 2份乙型肝炎患者和 30份非乙型肝炎患者血清进行检测结果比较。结果 PCR FP检测HBVDNA的最低检测限为 1× 10 1拷贝 ,在 4 0份乙型肝炎表面抗原 (HBsAg)、乙型肝炎e抗体 (HBeAg)和抗乙型肝炎核心抗原 (抗HBc)均阳性患者血清标本中检出HBVDNA阳性率为 10 0 % ;33份HBsAg、抗乙型肝炎e抗体 (抗Hbe)和抗HBc均阳性患者血清HBVDNA阳性率为 81 8% ;2 9份HBsAg和抗HBc阳性患者血清HBVDNA阳性率为 72 4 % ;14份乙型肝炎患者和 30份非乙型肝炎患者血清均为阴性。方法的灵敏性和特异性分别为 86 %和 10 0 %。结论 PCR FP操作简单、灵敏、特异 ,适用于临床HBV基因检测。
- 郭晏海张菊赵锦荣白玉杰李丁韩峰产闫小君
- 关键词：聚合酶链反应乙型肝炎病毒DNA
- 主动式生物芯片系统的设计和仿真
- 2005年
- 为了克服现有被动式生物芯片的不足,本文设计了一种新型的主动式芯片系统,在该系统中引入负压发生装置及控制装置,对NC膜上发生的抗原抗体反应进行控制。对该系统进行仿真,结果表明它具有快速、稳定、鲁棒性好等优点,能满足实际要求。该系统将有助于提高抗原抗体反应的效率,改善芯片检测结果的重复性和准确性。
- 朱文伟张文红朱文焕李丁罗进夏琳杨浩韩锋产董秀珍阎小君
- 关键词：蛋白芯片抗原抗体反应压力控制
- 非对称PCR-FP技术同步检测HSV-1/-2、CMV和EBV被引量：2
- 2009年
- 目的应用非对称PCR-荧光偏振（FP）技术建立一种同步检测全血中4种主要疱疹病毒（单纯疱疹病毒1／2型，巨细胞病毒、EB病毒）的新方法。方法以人疱疹病毒属通用引物行非对称PCR，扩增从179例样本中抽提的DNA。PCR扩增产物与特异性单纯疱疹病毒1／2型（HSV-1／-2）、巨细胞病毒（CMV）和EB病毒（EBV）寡核苷酸探针混合物温育杂交，荧光偏振检测技术检测杂交液荧光偏振值，据荧光偏振值判断病毒感染类型，并以DNA序列测定结果为参照。结果与DNA序列测定的阳性检测符合率为100％，但DNA序列测定检测均未检出多重混合感染。非对称PCR-FP方法对HSV-1／-2检测的灵敏度达到1．0×10^3拷贝／ml．对EBV和CMV检测的灵敏度达到2．0×10^3拷贝／ml。结论本法对于4种主要疱疹病毒感染的筛查及预防、预后判断具重要价值。
- 张菊吴中亮李丁王香玲梁平郭宴海李宏伟颜真
- 关键词：人疱疹病毒荧光偏振同步检测
- 陕西省不同肝炎患者及献血者中SENV-H DNA的检测被引量：1
- 2006年
- 目的探讨SEN病毒H亚型在陕西省不同肝炎患者和献血者中的感染情况。方法采用巢式聚合酶链反应方法对收集的健康献血者和各型肝炎患者的血样(包括甲肝、乙肝、丙肝和非甲-非戊型肝炎患者)共计754份,进行SENV-H亚型DNA检测。结果SENV-H感染率在无偿献血者中为24.4%,在急性甲肝、慢性乙肝、慢性丙肝和非甲-非戊型肝炎患者中分别为32.7%、45.2%、65.0%和43.9%。结论SENV与HCV等经血传播病毒有相似的传播途径。
- 陈蕤穆士杰李丁张献清
- 关键词：流行病学巢式聚合酶链反应
- TDI-FP法检测肿瘤患者ERCC1 Asn118Asn基因多态性
- 2010年
- 目的建立一种可靠、敏感、全面的ERCC1 Asn118Asn基因多态性检测新方法,用于预测肿瘤患者对铂类的耐药性。方法以ERCC1基因第4个外显子Asn118Asn的一对引物行PCR扩增227例临床样本DNA,将荧光偏振检测技术与模板指导的末端延伸反应(TD I-FP)结合,应用探针杂交延伸反应对临床样本扩增产物进行ERCC1 Asn118Asn基因多态性检测,并以DNA序列测定验证检测结果。结果227例临床样本DNA中,119例(52.4%)ERCC1 Asn118Asn基因为C/C纯合子(AAC)基因型,88例(38.8%)为C/T杂合子基因型,20例(8.8%)为T/T纯合子(AAT)基因型。但DNA序列测定法检出杂合子基因型仅33例。结论本研究初步建立了特异性较好、操作简便、无需标记探针的临床标本ERCC1 Asn118Asn基因多态性检测新方法,有望用于肿瘤患者铂类耐药性的检测。
- 张菊李丁李小惠张贺龙郭宴海颜真刘文超
- 关键词：基因多态性
- 尖锐湿疣患者人乳头瘤病毒11型L1基因的克隆及序列分析被引量：7
- 2003年
- 目的克隆和分析HPV11的晚期表达基因序列L1及其编码的氨基酸序列,为HPV感染的检测和基因工程疫苗研制提供基础。方法采用PCR技术扩增了1例尖锐湿疣患者疣组织中HPV 11 L1基因,并对其进行了克隆及全序列分析。结果本例尖锐湿疣临床标本HPV 11 L1基因与GenBank收录的原型(收录号:M14119)比较有8个碱基变异。结论 中国地区尖锐湿疣HPV 11 L1基因存在着变异。
- 高艳娥张菊苏振兴阎小君宋天保陈蕤李丁张玉燕
- 关键词：尖锐湿疣人乳头瘤病毒11型L1基因
