阎小君
- 作品数：137 被引量：552H指数：12
- 供职机构：第四军医大学药学系全军基因诊断技术应用研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省科学技术研究发展计划项目国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学自动化与计算机技术文化科学更多>>
- 应用聚合酶链反应突变和克隆HIV-lgag基因片段被引量：2
- 1992年
- 作者设计并合成了一对突变引物PGO1和PGO2,分别在两引物中设计了两个突变点,使突变后基因含有EcoRI、BamHI和ATG及TAA序列,以便于HlV-1gag基因序列的定向克隆和表达。用PCO1和PGO2作引物,采用PCR方法从HIV-1基因组DNA中扩增出一个长504bp的DNA片段,用EcoRl和BamHI双酶切位点将此片段定向克隆入pUC19质粒。将克隆基因插入M13mp18进行DNA序列分析,结果表明,该基因序列及读框完全正确,且在其5′末端突变出EcoRI位点和ATG起始码,3′末端突变出TAA终业码和BamHI位点,从而为该基因的表达研究奠定了基础。
- 吉昌华苏成芝阎小君
- 关键词：聚合酶链反应克隆免疫缺陷病毒
- 儿童幽门螺杆菌及CagA阳性幽门螺杆菌感染的流行病学调查被引量：3
- 2003年
- 幽门螺杆菌(H.pylori)是小儿慢性胃炎、十二指肠炎及消化性溃疡的重要病因之一,小儿H.pylori的感染直接影响到成年期的身体健康.成人H.pylori相关性胃疾病的发生与儿童期H.pylori感染密切相关.许多学者认为,成人H.pylori感染率及消化道疾病较高是与儿童期即已发生的H.pylori感染密切相关[1,2].
- 张玲霞张沥张宁霞刘永国阎小君韩锋产侯瑜
- 关键词：儿童幽门螺杆菌CAGA阳性幽门螺杆菌感染流行病学
- L1抗原冲击的树突细胞治疗尖锐湿疣的初步研究被引量：2
- 2002年
- 目的 :观察体外表达的HPV6 ,11L1抗原冲击的自身树突细胞免疫治疗 ,对人乳头状瘤病毒感染致反复复发生殖器尖锐湿疣的免疫及病理学作用及疗效。方法 :2 0 9例反复复发 3次以上 ,顽固型尖锐湿疣患者 ,按知情同意原则 ,分别予常规或L1抗原冲击的树突细胞免疫治疗。全体患者随访 6个月 ,疗程前后取疣体 ,分别行PCR ,HE及免疫组化染色观察。结果 :L1抗原冲击的自身树突细胞免疫治疗后 ,患者细胞免疫功能较常规疗法有显著改善 ,病灶处组织中大量免疫细胞浸润 ,空泡细胞减少 ,病毒感染清除或减轻。结论 :L1抗原冲击的树突细胞免疫对于改善反复复发、顽固型人乳头状瘤病毒感染的生殖器尖锐湿疣患者的细胞免疫功能 ,及病变局部免疫状态有显著作用。
- 张菊阎小君尹国武何玉宪段杰苏成芝
- 关键词：树突细胞尖锐湿疣乳头状瘤病毒
- 人乳头瘤病毒16型L1 N-端主要抗原基因的原核表达
- 2005年
- 目的 获得序列正确的人乳头瘤病毒 (HPV) 16型L1N -端主要抗原基因 ,构建其原核表达载体 ,并进行诱导表达。方法 采用PCR法从宫颈癌组织中获得HPV16型L1N 端主要基因重组表达质粒 ,转化E .coliDH5α ,4 2℃诱导表达 ,Westernblot分析表达产物。结果 获得了序列正确的人乳头瘤病毒HPV16型L1N -端主要基因 ,相对分子质量约为 5 10 0 0。表达蛋白能与乳头瘤病毒抗体及乳头瘤病毒感染患者的血清发生抗原抗体反应。结论 已成功构建HPV16型L1N -端主要基因表达载体 ,并获得有效表达。
- 陈蕤穆士杰张菊阎小君
- 关键词：HPV16抗原基因人乳头瘤病毒16型DH5Α原核表达载体基因表达载体
- 宫颈癌患者HPV16型E6蛋白的表达纯化及血清抗体检测被引量：8
- 2006年
- 背景与目的:人乳头瘤病毒16型(humanpapillomavirustype16,HPV16)是宫颈癌组织中最常见的高危HPV,其相应蛋白的血清抗体与宫颈癌的发生发展相关。本研究构建HPV16E6重组表达载体并表达纯化获得HPV16E6重组蛋白,用于检测不同人群血清相应抗体,初步探讨本地区HPV16E6血清抗体反应与宫颈癌的相关性。方法:将HPV16E6基因与pRSET-A融合表达载体连接,获得E6表达重组体,转化大肠杆菌BL21(DE3)并用异丙基硫代-$-D-半乳糖苷(isopropylthio-$-D-galactoside,IPTG)诱导表达。表达的包涵体变性后经Ni柱纯化,复性并经活性鉴定后,用以包被ELISA板,检测正常女性、慢性宫颈炎患者和宫颈癌患者血清抗体。同时采用荧光偏振方法分型检测宫颈癌组织HPVDNA。结果:pRSET-16E6表达重组体的工程菌经IPTG诱导后可表达Mr24×103的HPV16E6组氨酸融合蛋白,表达量占菌体蛋白的22.3%。表达形式为包涵体,重组蛋白纯度达95%以上,其活性经ELISA法证实。80例正常女性、46例慢性宫颈炎和32例宫颈癌患者血清抗体阳性率分别为5.0%、6.5%和31.2%,宫颈癌患者HPV16E6血清抗体阳性率显著高于正常人(P<0.002)及慢性宫颈炎患者(P<0.01),而正常人与慢性宫颈炎患者间的差异无显著性。32例宫颈癌患者癌组织中,HPVDNA阳性率90.6%,HPV16DNA阳性率46.9%。HPV16DNA阳性组血清HPV16E6抗体阳性率(46.7%)高于阴性组(17.6%),但两组间的差异无显著性(P>0.05)。结论:在pRSET-A/BL21中表达获得的HPV16E6融合蛋白,可用于宫颈癌相关HPV的血清学研究;宫颈癌患者HPV16E6血清抗体阳性率明显高于正常人和慢性宫颈炎患者。
- 高艳娥郭金珠张菊宋天保阎小君
- 关键词：人乳头瘤病毒16型E6蛋白血清抗体宫颈肿瘤
- PCR检测慢性胃炎患儿胃液中幽门螺杆菌DNA
- 1997年
- 目的检测慢性胃炎儿童胃液中幽门螺杆菌DNA，探讨其在临床诊断中的实用价值。方法应用PCR检测胃液中幽门螺旋菌DNA，应用Warthin-Starry银染色检测胃粘膜组织中的幽门螺旋菌。结果胃炎组与非胃炎组比较，敏感性为75.0％，特异性为96．2％，两组有显著性差异（P＜0．01）。PCR与Warthin－Starry银染色比较，PCR优于Warthin—Starry银染色法。结论PCR检测患儿胃液中的幽门螺旋菌DNA，具有敏感、快速、特异、高效等优点，是基因水平上检测幽门螺旋菌一项新技术，用于慢性胃炎的早期诊断，具有较好的实用价值，值得推广应用。
- 邹菊贤刘茂贤王茂贵阎小君
- 关键词：幽门螺杆菌胃液聚合酶链反应胃炎
- 尖锐湿疣患者人乳头瘤病毒11型L1基因的克隆及序列分析被引量：7
- 2003年
- 目的克隆和分析HPV11的晚期表达基因序列L1及其编码的氨基酸序列,为HPV感染的检测和基因工程疫苗研制提供基础。方法采用PCR技术扩增了1例尖锐湿疣患者疣组织中HPV 11 L1基因,并对其进行了克隆及全序列分析。结果本例尖锐湿疣临床标本HPV 11 L1基因与GenBank收录的原型(收录号:M14119)比较有8个碱基变异。结论 中国地区尖锐湿疣HPV 11 L1基因存在着变异。
- 高艳娥张菊苏振兴阎小君宋天保陈蕤李丁张玉燕
- 关键词：尖锐湿疣人乳头瘤病毒11型L1基因
- 幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白A与胃癌关系的病例对照研究被引量：1
- 2000年
- 近年来的研究表明，胃癌的发生是众多因素共同作用的结果，Hp的感染与胃癌的发生密切相关。但Hp感染后能否致病取决于其不同的毒力株。研究认为，产生细胞毒素相关蛋白A(CagA)的Hp菌株与胃癌的发生关系密切。本研究采用病例对照研究方法，旨在探讨胃癌高发区CagA阳性Hp感染与胃癌发病的关系。
- 张沥刘永国张玲霞张宁霞韩锋产阎小君侯瑜
- 关键词：幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白A胃癌CAGA毒力菌株
- 高危HPV16 E4基因的表达纯化及临床应用被引量：1
- 2008年
- 目的:构建人乳头瘤病毒(HPV)16 E4重组表达体并表达纯化获得HPV16 E4重组蛋白,用于检测不同人群血清相应抗体,初步探讨本地区HPV16 E4血清抗体反应与宫颈癌的相关性。方法:将HPV16E4基因与pRSET-A融合表达载体连接,获得E4表达重组体,转化大肠杆菌BL21(DE3)并用IPTG诱导表达。表达的包涵体变性后经Ni柱纯化,复性并经活性鉴定后,用以包被酶联免疫吸附实验(ELISA)板,检测正常女性、慢性宫颈炎和宫颈癌患者血清抗体。结果:pRSET-16E4表达重组体的工程菌经IPTG诱导后可表达Mr15×103的HPV16 E4组氨酸融合蛋白,表达量占菌体蛋白的30%。表达形式为包涵体,重组蛋白经Ni-NTA琼脂糖树脂纯化后,纯度达95%以上,其活性经ELISA法证实。80例正常女性、46例慢性宫颈炎和32例宫颈癌患者中,其血清抗体阳性率分别为10.00%,39.13%和28.13%,宫颈癌患者HPV16 E4血清抗体阳性率显著高于正常人,且慢性宫颈炎患者HPV16 E4血清抗体阳性率也显著高于正常人,但宫颈癌组HPV16 E4血清抗体阳性率与慢性宫颈炎组间的差异无统计学意义。结论:在pRSET-A/BL21中表达获得的HPV16 E4融合蛋白,可用于宫颈癌相关HPV的血清学研究;宫颈癌和慢性宫颈炎患者HPV16E4血清抗体阳性率均明显高于正常人。
- 高艳娥惠慧张菊樊江波阎小君
- 关键词：人乳头瘤病毒16型血清抗体宫颈癌
- 应用滴金免疫法检测血清甲肝病毒IgM抗体
- 2000年
- 甲型病毒性肝炎是由甲型肝炎病毒(HAV)引起的急性传染病。目前临床广泛使用的病原学检测方法多为酶联免疫法(ELISA)检测甲肝病毒IgM抗体(抗-HAV-IgM),该方法具有较高的灵敏度和特异度,但检测时间相对较长,一般不适合单人份检测,操作相对复杂。我们应用的滴金免疫法(Dot Immunogold Filtration Assay,DIGFA)快速检测血清抗-HAV-IgM具有简便、快速、准确等优点。现报告如下。
- 郭进军赵中夫张国英阎小君
- 关键词：滴金免疫法血清HAVIGM抗体
