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多聚抗原肽免疫磁珠在制备单表位抗体中的应用被引量：3: 2007年; 目的:建立用多聚抗原肽(multiple antigen peptides,MAP)包被磁珠制备单表位抗体的方法。方法:通过Fmoc法固相化学合成UreB的8分支单表位MAP,将其作为免疫原免疫小鼠,获得多克隆抗血清。将MAP以共价偶联的方式包被磁珠制备免疫磁珠(immunomagnetic beads,IB),通过IB从多克隆抗血清中纯化单表位抗体,荧光偏振(fluorescence polarization,FP)法鉴定抗体的特异性,SDS-PAGE鉴定抗体纯度,紫外分光光度法测定其回收率。结果:合成的MAP具有较强的免疫原性,免疫小鼠后得到的抗体滴度高达1∶12800。MAP制备免疫磁珠的最佳包被浓度为100mg/L,包被效率最高可达79%。应用MAP免疫磁珠从抗血清中纯化得到的单表位抗体,经鉴定与其他抗原表位无反应性,其纯度为95%,抗体的回收率为5.8%。结论:MAP包被的磁珠可快速分离纯化出针对某一抗原表位的特异性抗体,其性质类似单克隆抗体。这一方案在快速制备少量高特异性抗体中具有广阔的应用前景。; 徐小洁张文红康磊韩锋产颜真阎小君; 关键词：免疫磁珠

幽门螺杆菌vacA基因毒性相关片段的克隆及序列分析被引量：11: 2000年; 目的 vac A 基因编码的蛋白是幽门螺杆菌的一个重要毒力因子,通过空泡化作用损伤上皮细胞.vacA 基因与 Hp 感染者的临床发病有着密切的关系,vacA 的基因型决定毒素蛋白体外表达水平的高低.我们从幽门螺杆菌88022菌株中扩增出vacA 基因毒性相关片段,进行序列测定和序列比较分析,为Hp 的临床检测奠定基础.方法以该菌株总 DNA 为模板,紧随 vacA 基因序列 s 区保守区域的引物(位于316bp～335bp 和1198bp～1218bp)扩增vacA 基因的一个903bp 片段,编码的氨基酸为34～334位,用13amHI 和 Pst Ⅰ双酶切后克隆入 pGEM-3Zf(-)质粒载体,以双脱氧法双向测定目的片段的序列,拼接出该片段的全序列,并与已知的 Hp vacA 基因序列作比较.结果所得序列与 Hp 国际标准株 CCUG17874(GeneBank gi619248)和 NCTCll638(GeneBank gi 495469)的 vacA 基因序列完全一致,氨基酸序列分析和所报道的结果一致.结论构建了 Hp vacA 基因毒性相关片段的重组克隆,为以后的进一步研究奠定了基础.; 江红阎小君苏成芝韩锋产冯永强侯瑜; 关键词：幽门螺杆菌 VACA基因聚合酶链反应

幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白A与胃十二指肠溃疡关系的病例对照研究被引量：21: 2000年; 目的本文从流行病学角度研究西安地区幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白 A(CagA)阳性 Hp 菌株感染与胃十二指肠溃疡发病的关系.方法采用病例对照研究方法,病例组与对照组的配比比例为1:2.病例组为本院消化科自1997-10/1998-10连续住院的患者,经内镜检查及病理检查证实为活动期胃溃疡和(或)十二指肠溃疡.对照组分为两组,对照1组为同期住院的本科及其他科住院的非胃十二指肠疾病患者,对照2组为同期普查健康人群.病例组与对照组的配比因素为性别、民族、年龄(相差5岁以内).采用问卷调查,内容涉及与胃十二指肠溃疡发病可能有关的32个因素,对所有因素进行量化,应用 SAS 软件进行处理.CagA 阳性 Hp 感染的检测结果分析采用 x^2检验.对所调查因素首先进行1:1及1:2单因素条件 Logistic 回归分析,有显著性意义的因素,计算近似相对危险度(odds ratio,OR)及其95%的可信区间(confidence interval,CI).两因素协同作用采用分层分析方法.对单因素分析时作用较大及调查结果较准确的因素,用多因素条件 Logistic 回归分析.血清中抗 CagA 抗体的检测采用斑点金免疫渗滤法(DIGFA).结果①在胃溃疡组与对照1组及对照2组的配对研究中,胃溃疡组的 CagA 阳性 Hp 感染率显著高于两个对照组,OR 分别为5.0与6.5,P 分别<0.05及<0.01.②在十二指肠溃疡组与对照1组及对照2组的配对研究中,十二指肠溃疡组的CagA 阳性 Hp 感染率显著高于两个对照组,OR 分别为9.33与11.00,P 分别<0.05及<0.01.③1:1及1:2单因素及多因素 Logistic 回归分析表明,Caga 阳性 Hp 感染、吸烟、饮酒、食酸辣食物、生活不规律、精神因素等因素与胃十二指肠溃疡发病呈正相关,而按时进餐与胃十二指肠溃疡发病呈负相关.cagA 阳性 Hp 感染与胃溃疡及十二指肠溃疡的发生具有密切的相关性(OR=16.61-84.49).④双因素分层分析中,吸烟、饮酒、生活不规律; 张玲霞张沥刘永国张宁霞阎小君韩锋产侯瑜; 关键词：幽门螺杆菌胃溃疡十二指肠溃疡细胞毒素类

血管紧张素Ⅱ诱导心肌成纤维细胞表达上调基因的分离和鉴定被引量：5: 2005年; 为了对成年大鼠心肌成纤维细胞(cardiac fibroblasts,CF)受血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ,Ang Ⅱ)刺激后上调基因表达谱进行筛选及分析,以受Ang Ⅱ刺激CF为实验方,未刺激CF为驱动方,进行抑制消减杂交(suppression subtractive hybridization,SSH),建立消减cDNA文库。经斑点杂交筛选文库后将表达变化显著的部分阳性克隆测序及同源性分析,共获得19个上调表达的基因,分别与细胞外基质、细胞周期、胞内信号转导、细胞骨架及细胞代谢等功能相关,并克隆到7个新的基因表达序列标签(expressed sequence tags,EST)。我们的数据证实了SSH可以有效地克隆成年大鼠CF受Ang Ⅱ 刺激后上调表达基因,对这些基因的研究将有助于阐明心肌重塑的分子机制。; 王新凤高广道杨予白周娟王亚文苏兴利王琰韩锋产白玉杰; 关键词：成纤维细胞抑制消减杂交

亚洲乙型肝炎病毒前C区突变检测的临床意义被引量：1: 1999年; 郭晏海闫小君任峰玲崔大祥侯瑜赵锦荣韩锋产苏成芝; 关键词：乙型肝炎病毒乙型肝炎突变 PCR

儿童幽门螺杆菌及CagA阳性幽门螺杆菌感染的流行病学调查被引量：3: 2003年; 幽门螺杆菌(H.pylori)是小儿慢性胃炎、十二指肠炎及消化性溃疡的重要病因之一,小儿H.pylori的感染直接影响到成年期的身体健康.成人H.pylori相关性胃疾病的发生与儿童期H.pylori感染密切相关.许多学者认为,成人H.pylori感染率及消化道疾病较高是与儿童期即已发生的H.pylori感染密切相关[1,2].; 张玲霞张沥张宁霞刘永国阎小君韩锋产侯瑜; 关键词：儿童幽门螺杆菌 CAGA阳性幽门螺杆菌感染流行病学

全自动(定量PCR)基因扩增诊断仪配套定量试剂的研制被引量：12: 2001年; 目的　研制一种能用于仪器操作的灵敏、快速、特异的定量试剂 .方法　使用一个生物素标记的上游引物 ,对HBVDNA及其竞争模板DNA进行不对称PCR扩增 ,使扩增出的单链带有生物素 ,并可结合在固定有链亲合素的微孔板的表面 .用标有辣根过氧化物酶的待测模板探针和竞争模板探针分别与两个微孔中固定的相应单链PCR产物杂交 ,而后加底物显色 ,测定吸光度进行分级定量分析 .结果　该定量方法可以检测 10拷贝数的模板 ,而且对简便处理的标本适应性强 ;以分级定量的形式定量时 ,具有良好的重复性 .结论　该试剂适用于仪器操作。; 郭晏海阎小君孟宪润崔大祥侯瑜韩锋产冯永强张菊赵锦荣; 关键词：定量PCR 探针杂交

主动式生物芯片系统的设计和仿真: 2005年; 为了克服现有被动式生物芯片的不足,本文设计了一种新型的主动式芯片系统,在该系统中引入负压发生装置及控制装置,对NC膜上发生的抗原抗体反应进行控制。对该系统进行仿真,结果表明它具有快速、稳定、鲁棒性好等优点,能满足实际要求。该系统将有助于提高抗原抗体反应的效率,改善芯片检测结果的重复性和准确性。; 朱文伟张文红朱文焕李丁罗进夏琳杨浩韩锋产董秀珍阎小君; 关键词：蛋白芯片抗原抗体反应压力控制

幽门螺杆菌CagA与胃十二指肠溃疡发病关系的病例对照研究被引量：10: 1999年; 张玲霞张沥张宁霞刘永国阎小君韩锋产侯瑜; 关键词：幽门螺杆菌十二指肠溃疡细胞毒素

西安市儿童CagA阳性幽门螺杆菌感染血清流行病学调查被引量：10: 1999年; 张玲霞张沥张宁霞刘永国阎小君韩锋产侯瑜; 关键词：流行病学胃炎消化性溃疡儿童幽门螺杆菌

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