曹樱
- 作品数：5 被引量：8H指数：1
- 供职机构：集美大学食品与生物工程学院更多>>
- 发文基金：福建省自然科学基金国家自然科学基金福建省教育厅科技项目更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程环境科学与工程更多>>
- 一株甲基对硫磷降解菌——米曲霉JMUPMD-2的分离与鉴定被引量：6
- 2011年
- 对一株新分离的、能以甲基对硫磷为唯一磷源生长的菌株——JMUPMD-2利用形态观察和rDNA ITS序列分析对JMUPMD-2进行鉴定;用气相色谱法检测培养过程中甲基对硫磷浓度的变化,确定甲基对硫磷降解速率。该菌株的rDNA ITS序列与米曲霉(Aspergillus oryzae)的同源性为99%,菌落形态和显微形态都与米曲霉特征相符,因此鉴定为米曲霉;以350μg/L甲基对硫磷为唯一磷源和350μg/L甲基对硫磷及1 g/L K2HPO4组成的混合磷源分别培养该菌株,200 h后的分解量分别为189μg/L及28μg/L。该菌株的胞内提取液具有明显的甲基对硫磷降解酶活性。
- 解顺昌倪辉蔡薇曹樱李利君肖安风黄高凌杜凤君蔡慧农
- 关键词：甲基对硫磷ITS序列米曲霉菌种鉴定
- 4株法夫酵母产虾青素菌株的发酵性能比较被引量：1
- 2013年
- 在摇瓶实验的基础上,比较4株法夫酵母产虾青素突变株的发酵特性。结果表明:这4株菌中,JMU-MVP14和JMU-7B12分别为虾青素产量最高(24.32mg/L)和最低(0.93mg/L)的菌株,JMU-17W和JMU-MVP14分别为生物量最高(8.13g/L)和最低(3.20g/L)的菌株。对JMU-668菌株和JMU-MVP14菌株发酵时添加糖代谢产物、高浓度葡萄糖以及在低溶氧状态时的发酵情况进行比较,结果表明:JMU-668发酵时添加乳酸、乙醇、柠檬酸,其生物量、虾青素产量都得到显著提高;添加甘油时生物量减少,虾青素产量显著提高。JMU-MVP14发酵时添加乳酸、乙醇、甘油,其生物量、虾青素产量都提高了,但效果不显著;添加乙酸时生物量提高,虾青素产量减少;添加柠檬酸时生物量减少。此外,添加高浓度葡萄糖,对这两株菌的虾青素合成有促进作用;在低溶氧状态下发酵,可促进JMU-668菌株虾青素的合成,而对JMU-MVP14菌株虾青素的合成产生抑制作用。
- 曹樱洪清林蔡慧农倪辉李利君肖安风
- 关键词：法夫酵母虾青素摇瓶发酵
- 法夫酵母中产类胡萝卜素特性与其合成相关基因表达关系的研究
- 2016年
- 为研究法夫酵母中类胡萝卜素合成代谢调控机理,通过高效液相色谱法和实时定量PCR技术分别对JMU-VDL668和JMU-N3法夫酵母菌株中类胡萝卜素和类胡萝卜素合成相关基因的表达差异进行分析,并研究了在JMU-VDL668菌株培养过程中添加β-胡萝卜素对其产虾青素的影响。结果显示,法夫酵母类胡萝卜素代谢途径的关键酶crt E,crt YB,crt I和crt S基因在JMUVDL668菌株中的表达水平整体低于JMU-N3菌株,而JMU-N3菌株中没有检测到crt R基因的表达。在JMU-VDL668菌株培养过程中添加β-胡萝卜素发现,在72 h和96 h添加时能促进虾青素的合成,其中96 h添加时所得虾青素比对照组提高了83%。结果表明,这两株菌的产类胡萝卜素特性与类胡萝卜素合成相关基因的表达量存在一定的正相关关系,且JMU-VDL668菌株中总类胡萝卜素细胞产率在一定范围内,可能存在反馈调节机制。
- 郑晨华杜希萍李利君李天丽曹樱倪辉
- 关键词：法夫酵母虾青素实时定量PCR代谢调控
- 法夫酵母虾青素合成酶基因的原核表达研究及其表达差异分析
- 虾青素（astaxanthin）是一种抗氧化性能极强的天然类胡萝卜素，具有着色、抗肿瘤、增强免疫力等多种生物学功能，被广泛的利用于水产养殖、医药、保健食品等行业中。法夫酵母是一种重要的天然虾青素资源，其体内的β-胡萝卜素...
- 曹樱
- 关键词：法夫酵母高产菌株
- 法夫酵母β-胡萝卜素转化酶(Asy)基因的克隆及可溶性表达研究被引量：1
- 2013年
- 【目的】从高产虾青素的法夫酵母(Phaffia rhodozyma)7B12菌株中克隆β-胡萝卜素转化酶基因(β-Carotene converting enzyme gene,asy),并将该基因在大肠杆菌(Escherichia coli)中进行可溶性表达,为深入研究该酶的性质及应用提供基础。【方法】采用cDNA末端快速扩增技术,克隆得到asy基因全长cDNA序列,将其克隆到表达载体pET32a中,通过优化温度和IPTG浓度提高其可溶表达量;进一步在E.coli BL21(DE3)中共表达携带asy基因的重组质粒和pACCAR16Δcrtx质粒(携带由乙酰辅酶A合成β-胡萝卜素的基因链),用液相色谱分析共转化菌株中类胡萝卜素种类的变化,鉴定可溶性表达的Asy酶活性。【结果】法夫酵母7B12菌株asy基因的cDNA序列与GenBank能检索到的唯一一条asy基因mRNA序列(Accession No.DQ002007.1)一致性达到97%,该序列总长1 971 bp,最大开放阅读框为1 614 bp,编码538个氨基酸,在E.coli BL21(DE3)中表达的Asy融合蛋白分子量约为70 kD;条件优化后转化asy基因的重组菌在26°C、0.5 mmol/L IPTG的条件下诱导时,可溶性融合蛋白比例达85%。与pACCAR16Δcrtx单质粒转化相比,共转化pACCAR16Δcrtx及asy基因的菌株类胡萝卜素产物的成分发生了明显的变化,其中α-胡萝卜素的含量明显减少,伴随出现了3种新的色素,根据出峰时间判断其中一种为β-胡萝卜素和虾青素的中间产物——β-隐黄质。【结论】从法夫酵母中克隆得到asy基因,通过优化诱导温度及IPTG浓度等条件提高了该基因在E.coli BL21(DE3)中的可溶性表达量,经鉴定可溶性的Asy融合蛋白具有转化β-胡萝卜素的活性。
- 曹樱蔡慧农李利君倪辉苏文金
- 关键词：法夫酵母可溶性表达活性分析
