文思远 作品数:60 被引量:296 H指数:11 供职机构: 军事医学科学院放射与辐射医学研究所 更多>> 发文基金: 国家高技术研究发展计划 北京市自然科学基金 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 理学 更多>>
基因芯片法测定P450 2C9基因多态性及其与甲苯磺丁脲代谢的关系 目的:研究甲苯碘丁脲的人体代谢过程与中国健康志愿者P450 2C9基因多态性的关系.方法:利用基因芯片技术测定169例中国健康志愿者P450 2C9基因分型,直接测序法对结果进行验证;不同P450 2C9*1/*1(n=... 陈騉 王睿 文思远 李健 王升启关键词:甲苯磺丁脲 遗传药理学 基因多态性 基因芯片 文献传递 MEPE/OF45在肿瘤转移和耐药性中的作用 肿瘤的迁移性和抗药性是肿瘤发展、恶化、治疗以及复发过程中两个重要的关注点。在很多情况下,高转移性的肿瘤细胞也会表现出对放射或化疗的抗性。本研究首次报道了蛋白分子MEPE/OF45在肿瘤迁移性和耐药性中都起到了重要的作用。... 文思远关键词:肿瘤转移 肿瘤耐药性 文献传递 金纳米颗粒聚集以及金纳米探针-微阵列技术研究进展 被引量:7 2006年 金纳米颗粒(GNP)探针正引起科学家们越来越多的兴趣。本文主要综述了基于GNP自组装聚集反应的生物检测和微阵列-金标银染检测的最新进展,对GNP在电化学等其他领域的研究前沿也进行了探讨。引用文献41篇。 逄键涛 文思远 王升启关键词:金纳米颗粒 微阵列 生物检测 几种性传播疾病病原体检测芯片的制备 被引量:1 2004年 目的 :为了同时多样本检测和鉴别淋病奈瑟球菌、沙眼衣原体和解脲脲支原体 3种重要的性传播疾病病原体 ,制备了寡核苷酸检测芯片。方法 :针对 3种病原体和荧光素酶基因设计特异的引物和寡核苷酸探针 ,采用硫代和氨基双功能探针修饰技术制备寡核苷酸芯片 ,以荧光标记多重不对称PCR技术为基础 ,通过将单链PCR产物与芯片杂交实现对性传播疾病病原体的检测。结果 :对 10种与待检病原体无关的菌及定量有限稀释的荧光素酶和 3种病原体基因质粒模板进行芯片检测 ,结果表明芯片对待检病原体特异 ,其检测 4种基因的灵敏度均为 5×10 3 拷贝质粒。对 2 4份性传播疾病患者标本进行芯片检测 ,沙眼衣原体感染率为 10 0 % ,与淋病奈瑟球菌混合感染率为 83.3% (2 0 / 2 4 ) ,与传统PCR诊断结果完全一致。在 2 4份标本中 ,淋病奈瑟球菌、沙眼衣原体和解脲脲支原体三重感染病例芯片诊断为 3例 ,混合感染率为 12 .5 % (3/ 2 4 ) ;而传统PCR诊断为 4例 ,混合感染率为 16 .7% (4/2 4 ) ,两种方法的符合率为 75 %。结论 :该芯片是一种可靠检测 3种病原体的方法 ,它可快速提供有关患者混合感染的情况 ,因而为指导个性化治疗提供及时可靠的诊断依据。 石岗 文思远 陈苏红 王升启关键词:性传播疾病 寡核苷酸芯片 寡核苷酸探针 淋病奈瑟球菌 解脲脲支原体 RT-PCR快速检测3种烟草病毒技术 被引量:6 2007年 为了快速提取植物叶片的总RNA,并对烟草病毒进行检测,对提取及检测方法进行了研究。结果表明:以黄瓜叶片、白肋烟叶片为试材,用TRIzol试剂盒在1 h内提取到纯度高、完整性好的总RNA。设计烟草花叶病毒、黄瓜花叶病毒和马铃薯X病毒的特异性引物,RT-PCR检测,从感病叶片中分别扩增出313,326,392 bp的目的片断,而健康叶片中无此扩增带。构建这3种病毒重组质粒,对核苷酸序列与GeneBank中报道的进行比较,同源性分别为99.36%,97.55%,98.21%。用这种方法快速、可靠,为烟草病毒的检测提供科学依据。 谷瑞华 王进忠 文思远 王升启 张爱环 魏艳敏关键词:烟草花叶病毒 黄瓜花叶病毒 马铃薯X病毒 RT-PCR 百合病毒的DNA芯片检测技术研究 被引量:20 2005年 根据已知的黄瓜花叶病毒,百合无症病毒、百合斑驳病毒基因核苷酸序列,设计引物和探针,制备寡核苷酸芯片。用Cy3标记核苷酸引物,不对称RT-PCR扩增产物与芯片上的寡核苷酸探针杂交,荧光扫描仪检测并分析信号。研究制备的基因芯片能够检测侵染百合的3种重要病毒核酸的特异性荧光信号,该项技术具有特异、灵敏、快速的优点。 王进忠 贾慧 文思远 王升启 张民照 赵祥云 董金皋关键词:黄瓜花叶病毒 百合无症病毒 百合斑驳病毒 基因芯片 基因芯片法测定中国人群细胞色素P450 2D6的基因多态性 被引量:6 2006年 目的:根据细胞色素P4502D6基因序列的多态性分布特点,针对在中国人群药物代谢中具有潜在作用的突变位点C188T和G4268C,设计寡核苷酸探针,制备寡核苷酸芯片,探讨基因芯片技术应用于CYP2D6基因分型的可行性,观察中国人群细胞色素P4502D6的基因多态性。方法:实验于2005-02/08进行。以克隆并已测序的细胞色素P4502D6基因重组质粒作为标准样品,扩增产物与芯片进行杂交,制备基因芯片,测定312名中国健康志愿者(已签署知情同意书)细胞色素P4502D6基因分型,并使用直接测序法对结果进行验证。结果:312名全部进入结果分析。①312名中国健康志愿者中CYP2D62和CYP2D610的变异频率分别为CYP2D62W10W8.3%,2H10W13.5%,2M10W10.6%,2M10H17.0%,2M10M34.6%,2H10H9.6%,2H10M6.4%。②对部分样本采用直接测序的方法进行进一步确证,结果完全吻合。结论:①CYP2D62和CYP2D610突变型等位基因在中国人群中出现的频率较高。②基因芯片法简便、快捷,适用于中国人群细胞色素P4502D6基因分型研究。 李芹 王睿 许力 文思远 王升启关键词:细胞色素P450 寡核苷酸序列分析 肝细胞靶向pH敏脂质体介导的硫代反义寡核苷酸对HCV5′NCR基因表达的抑制作用 被引量:3 2001年 反义寡核苷酸是一种阴离子大分子物质 ,细胞生物利用度较低且易被细胞溶酶体酶降解 ,为了增强反义药物在病变靶细胞内的有效浓度 ,根据受体介导的内吞作用原理 ,针对肝细胞专一性表达的去唾液酸糖蛋白受体 ,设计及制备了一种肝靶向性脂质体 ,这种脂质体同时具有pH敏性。采用竟争抑制实验及鸡红细胞溶血实验分析了其肝细胞靶向性及pH敏性 ;应用肝靶向pH敏脂质体作为药物运载工具 ,介导反义寡核苷酸HCV3 63作用于转基因细胞HepG2 .970 6细胞 ,通过荧光素酶活性检测 ,观察了硫代反义寡核苷酸对HCV 5′NCR调控功能的抑制活性。结果显示 ,不同浓度半乳糖溶液对 5 % 18 gal脂质体有一定的抑制作用 ,浓度超过 2 0mmol L时 ,达到饱和 ,最大抑制率为 3 8% ;溶血实验显示脂质体与红细胞膜融合作用有显著的pH值依赖性 ,pH <6时 ,血红素释放量明显增加 ;肝靶向pH敏性脂质体介导的HCV3 63对HepG2 .970 6细胞中HCV 5′NCR调控基因具有显著的剂量依赖性抑制作用 ,浓度为 1 0 μmol L时 ,抑制率达 86%。综上 ,所制备的脂质体具有一定的肝细胞靶向性及显著的pH敏感性 ,这种脂质体能够增强HCV特异性硫代反义寡核苷酸的细胞内抑制活性 ,这为针对肝炎病毒的反义寡核苷酸的体内活性评价提供了有用的转运体系。 王小红 王升启 文思远 管伟 毛秉智关键词:丙型肝炎病毒 反义寡核苷酸 肝靶向性 脂质体 基因表达 WLL-1株博卡病毒(Bocavirus)全基因组序列分析 被引量:12 2007年 Human bocavirus,which was firstly discovered in 2005,is a new human parvovirus associated with lower respiratory tract infection in children.In this study,a human bocavirus,named WLL-1 isolate,was identified in Wenlin County, Zhejiang Province.The genome of bocavirus WLL-1 has been sequenced and analyzed.Phylogenetic analyses showed that WLL-1 shares 99% homology with other bocaviruses recently reported,but also has some special variations. 林峰 曾爱平 杨恩 林海燕 郑昌华 陈弘 李桦 李旭阳 郁明素 杨宁敏 金大智 余光创 伯晓晨 文思远 王升启关键词:人博卡病毒 基因组测序 中国健康人群P4502C9基因多态性与甲苯磺丁脲代谢的关系 被引量:10 2005年 目的研究甲苯磺丁脲人体代谢过程与中国健康志愿者P4502C9基因多态性的关系。方法不同P4502C91/1(n=53)、1/3(n=9)及3/3(n=1)基因型的健康志愿者单次口服甲苯磺丁脲500mg后,用HPLC方法测定血和尿中的甲苯磺丁脲及其代谢产物浓度,研究甲苯磺丁脲的药代过程。结果P4502C91/3与P4502C93/3基因型的受试者与P4502C91/1基因型相比,AUC(0-∞)增加20%和116%,t1/2增加60%和813%,CL0为68%和11%,CLform仅为39%和3%。结论P4502C91/3对甲苯磺丁脲的代谢活性较P4502C91/1显著降低,P4502C93/3代谢活性更低,并呈现基因剂量关系。 王睿 陈騉 文思远 李健 王升启关键词:细胞色素P450 甲苯磺丁脲 基因多态性