张莉莉 作品数:40 被引量:86 H指数:6 供职机构: 江西省科学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家高技术研究发展计划 长江学者和创新团队发展计划 更多>> 相关领域: 轻工技术与工程 医药卫生 农业科学 生物学 更多>>
马尾松毛虫质型多角体病毒结构蛋白的抗体制备及免疫性 2014年 质型多角体病毒的病毒粒子结构蛋白是由衣壳蛋白VP1(Capsid protein,CP)、塔状蛋白VP3(Turret protein,TP)和大突起蛋白VP5(Large protrusion protein,LPP)组成,这3个蛋白分别由病毒基因组片段S1、S4和S7编码.为了解质型多角体病毒结构蛋白的免疫定位情况,本研究从马尾松毛虫质型多角体病毒湖南株中提取病毒核酸,回收、纯化S1、S4和S7片段,经RT-PCR扩增得到对应片段的ORF全长或抗原区的片段,克隆于原核表达载体上,在大肠杆菌BL21菌株中进行了表达,免疫家兔制备了多克隆抗体.Western blot结果显示DpCPV基因组的S1、S4和S7片段分别编码其结构蛋白VP1、VP3和VP5,与推测的结果一致.免疫胶体金的方法也证明S1、S4和S7编码的蛋白定位于病毒粒子衣壳的外表面.本研究首次通过免疫学方法确定了质型多角体病毒结构蛋白在病毒粒子上的定位,为质型多角体病毒的结构蛋白功能和侵染机制研究提供了免疫学方面的基础,对质型多角体病毒的研究有较重要的意义. 靳亮 王洪秀 刘金瑾 王金昌 张莉莉 杨罡 张小华 郑国华关键词:马尾松毛虫质型多角体病毒 结构蛋白 免疫定位 一种可直接用于PCR扩增的聚合氯化铝提取土壤总DNA的方法 被引量:2 2016年 为了研究湿地土壤微生物群落结构及其因时间和环境改变而产生的变化,找出与环境因子密切相关的微生物,有必要建立一种土壤微生物群落多样性代表全、提取率高的土壤总DNA提取方法。这有利于完成实验后,同一个土壤样品还留有足够的总DNA供多次使用,并可构建特定时空下的总DNA样品库,为科技水平更发达的未来留下一批不可再得的全息DNA样品。通过综合比较已报道的微生物总DNA提取方法的优缺点,设计出一种新的提取方案,关键步骤包括用焦磷酸钠溶解并洗脱样品的腐植酸;联合使用蛋白酶K-SDSCTAB和热激裂解细胞;加入聚合氯化铝再次沉淀去除残存的腐植酸并同步去除蛋白。结果用聚合氯化铝提取土壤总DNA的方法所获得的DNA量明显高于常规试剂盒法,每个1.5 m L提取管可得到25.831μg DNA;OD260nm/OD280nm比值达到或接近理想水平;OD260nm/OD230nm比值在0.550.73之间,说明还有盐污染,但可直接用于PCR扩增。通过实验和Illumina Mi Seq高通量测序应用验证,确立了一种土壤微生物群落多样性代表全、完整性好、提取率高、经济、安全、快捷的土壤总DNA提取方法,为今后的相关工作提供了一种技术手段。 涂祖新 王小红 张莉莉 金平 郑国华关键词:聚合氯化铝 腐植酸 DNA提取 PCR扩增 生物羊膜保存处理方法 本发明公开了一种生物羊膜保存处理方法,该方法为:将胎盘的羊膜与绒毛膜钝性剥离,洗净,得到的羊膜表皮细胞层在上,下面用硝酸纤维素滤纸托着,用0.1-10%的甘油保护,采用冷冻干燥工艺,将物料置工作室经0℃~-30℃预冻1~... 苗九昌 付筱冲 张莉莉 饶国厚文献传递 变温杀青工艺对野金柴老叶特性和品质的影响 2023年 为提高野金柴老叶饮品根皮苷的浸出率,省去鲜叶揉捻工序,降低鲜叶干燥能耗,对其进行了干热变温破蜡被杀青干燥工艺的研究;在单因素试验基础上,以鲜叶杀青温度(A)、杀青时长(B)及变温次数(C)作为影响因子,以经过该干燥工艺处理后的干叶沸水冲泡后其根皮苷的释放量(R1)为响应值,通过Design Expert 10软件的响应面Box-Behnken试验设计对上述3因子及其交互作用进行了研究。结果表明,C,B的交互作用对R1影响均达到了极显著水平,A的交互作用不显著。野金柴老叶预处理最佳工艺为:野金柴老叶(鲜叶)杀青破蜡被破细胞温度设定在85℃,杀青时长定在100 min、其间变温3次,即:烘25 min时取出、立即风冷2 min,再放入烘干箱继续加热杀青,在50 min和75 min时又如法“取出—风冷—放回—杀青烘干”操作2次。优化处理后的野金柴老叶干叶沸水冲泡后其根皮苷释放量可达11969 mg/kg,与最高预测值12285 mg/kg比较接近,表明该模型能较好地预测实际处理情况。同时,为大量野金柴老叶(鲜叶)的处理、加工和保藏缩短了所需时间,节省了大量的人工成本,并可使野金柴产品加工生产标准化、产品质量有所保障。 郑国华 黄虹 涂祖新 李江怀 张莉莉 邓涛 李娅一种样品总微生物及其总DNA的保护剂及保藏方法 本发明公开了一种样品总微生物及其总DNA的保护剂及保藏方法。样品总微生物及其总DNA的保护剂包括甘油、蔗糖、谷氨酸钠、聚乙二醇、EDTA二钠盐、柠檬酸钠、水和液体石蜡。所述样品总微生物及其总DNA的保藏方法包括以下步骤:... 涂祖新 郑国华 贺伟华 张莉莉 刘卓荣一种实时热启动Taq酶及其制备方法 一种实时热启动Taq酶及其制备方法,它涉及Taq酶的制备技术,即通过噬菌体表面展示肽技术,淘选出一种与Taq酶在65℃以下都有亲和性的阳性噬菌体,通过扩增该噬菌体并用胰蛋白酶处理后经超滤而得到含有亲和配体肽的滤液。或进一... 涂祖新 熊勇华 郑国华 陈媛 张莉莉文献传递 一种模拟双烯雌酚的抗原表位肽、其制备方法及应用 本发明提供了一种模拟双烯雌酚的抗原表位肽、其制备方法及应用。该技术方案首先基于噬菌体展示肽库技术,以抗DIS单克隆抗体为靶标,从噬菌体随机展示七肽库中淘选得一种序列为CTLNWAC的DIS抗原模拟表位。本发明分别给出了通... 邓省亮 李平 贺伟华 涂祖新 张莉莉文献传递 一种样品总微生物及其总DNA的保护剂及保藏方法 本发明公开了一种样品总微生物及其总DNA的保护剂及保藏方法。样品总微生物及其总DNA的保护剂包括甘油、蔗糖、谷氨酸钠、聚乙二醇、EDTA二钠盐、柠檬酸钠、水和液体石蜡。所述样品总微生物及其总DNA的保藏方法包括以下步骤:... 涂祖新 郑国华 贺伟华 张莉莉 刘卓荣文献传递 一种美国白蛾病毒杀虫剂及其制备方法 本发明提供一种美国白蛾病毒杀虫剂及其制备方法。通过人工饲料饲养美国白蛾,制备核型多角体病毒沉淀,并在病毒沉淀中添加微量无机纳米材料、芳香族氨基酸和少量精制荧光增白剂。本制备方法使昆虫病毒杀虫剂的组分更完整,悬浮性更好,保... 靳亮 王洪秀 陈晓燕 王金昌 张莉莉 黄朝文献传递 一种模拟双烯雌酚的抗原表位肽、其制备方法及应用 本发明提供了一种模拟双烯雌酚的抗原表位肽、其制备方法及应用。该技术方案首先基于噬菌体展示肽库技术,以抗DIS单克隆抗体为靶标,从噬菌体随机展示七肽库中淘选得一种序列为CTLNWAC的DIS抗原模拟表位。本发明分别给出了通... 邓省亮 李平 贺伟华 涂祖新 张莉莉文献传递