张强哲
- 作品数：8 被引量：59H指数：5
- 供职机构：清华大学更多>>
- 发文基金：中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- H5N1亚型禽流感病毒HA基因DNA疫苗的构建和活体电击免疫试验初报被引量：8
- 2005年
- 将高致病力禽流感病毒A/Goose/GuangDong/1/96(H5N1)的HA基因克隆到质粒pcDNA4/His鄄Max和pRc/CMV上得到真核表达质粒pC4H5和pCMVH5。将pC4H5和pCMVH5经活体电击和肌肉注射接种于3周龄SPF鸡的右腿内侧,并设空白质粒对照。二次免疫后第二周用104.2ELD50的同源病毒进行攻击。结果pC4H5和pCMVH5活体电击免疫SPF鸡能诱导产生持续表达的高水平特异性抗体,可产生100%的保护率,并能有效地阻止H5N1病毒攻击后病毒在泄殖腔的排出,而肌肉注射组和空白对照组在攻毒后全部发病并死亡。结果表明活体电击免疫是一条可以与基因枪免疫相媲美甚至优于基因枪免疫的有效免疫途径。
- 赵晓民张强哲段明星何宏轩秦曦明梁荣
- 关键词：DNA疫苗电击活体试验初报高致病力禽流感注射接种
- 猪放线杆菌溶血性毒素的研究被引量：2
- 2003年
- 在37℃条件下,将猪放线杆菌在胰胨酵母浸出物培养基(含10mmol/LCaCl2)上培养不同时间,离心、过滤后获得不同时间无菌滤液,检验滤液对猪、牛、山羊、绵羊、驴红细胞的溶血性,结果表明这种溶血性毒素对绵羊、牛的红细胞溶血性最强,猪次之,山羊、驴最差。同时对溶血性毒素理化特性做了初步研究,结果表明:滤液经2.5g/L胰酶处理后溶血活性几乎丧失,不同温度处理后溶血活性下降,经不同pH值溶液处理后也表现出溶血活性降低和失活现象。
- 许信刚张耀相张琪张强哲邢福珊李健强
- 关键词：放线杆菌理化特性
- 禽流感及其免疫防制研究被引量：5
- 2004年
- 禽流感一直是严重危害世界各国养禽业发展的头号大敌 ,近期又成为继严重急性呼吸道综合症 (SARS)后又一严重威胁人类生命安全的重要疾病 ,由于禽流感病毒抗原及其致病力的易变性 ,这就要求未来的防制策略要采取快速检测 ,并用先进的分子生物学技术进行病毒鉴定、检疫及免疫保护等措施 ,建立全国性甚至全球性禽流感检测防制网络 ,并且搞清禽流感与人类流感的关系 ,从而保证人和动物的安全 .
- 段明星何宏轩张强哲
- 关键词：禽流感分子生物学技术病毒鉴定免疫保护流行性感冒
- H_9N_2亚型鸡源禽流感病毒分离与鉴定被引量：1
- 2003年
- 马德慧何宏轩秦曦明张强哲汤义王新华刘丽艳郑昌学段明星
- 关键词：禽流感病毒
- H5亚型禽流感病毒HA DNA疫苗的研究
- 禽流感是由A型流感病毒引起的禽类烈性传染病,严重威胁世界各地的养禽业,常常造成巨大的经济损失,尤其是H5、H7亚型引起的高致病力禽流感是养禽业的一种毁灭性疾病.血凝素(Hemagglutinin,HA)是禽流感病毒的重要...
- 张强哲
- 关键词：禽流感病毒DNA疫苗HA基因免疫试验
- 文献传递
- 禽流感病毒HA基因真核表达质粒的构建与表达被引量：23
- 2003年
- 血凝素蛋白 (HA)基因是禽流感病毒 (AIV)重要的保护性抗原基因 .为了研究HA基因疫苗 ,用PCR扩增H5亚型AIVHA基因 ,将其克隆到质粒 pcDNA4/HisMax和pRc/CMV上得到真核表达质粒 pC4H5和pCMVH5 .采用TfxTM 2 0、Superfect转染试剂和电转染法转染HeLa细胞 ,转染后的HeLa细胞经蛋白质印迹和血凝试验检测HA蛋白及其活性 .结果表明 ,Superfect转染和电转染均能正确表达HA蛋白并具有生物学活性 ,蛋白质印迹检测到HA和HA裂解的HA1和HA2 ,与AIV的HA、HA1、HA2蛋白的分子质量一致 .从血凝试验结果看 ,Superfect和电转染表达的HA均具有血凝活性 ,而经Superfect转染的 pC4H5的表达量是pCMVH5的8倍 ,表明
- 张强哲秦曦明梁荣邓明俊何宏轩张彦明郑昌学段明星
- 关键词：禽流感病毒HA基因真核表达质粒构建血凝素蛋白
- 用电穿孔方法研究H5N1禽流感病毒DNA疫苗对动物的免疫保护作用(英文)被引量：7
- 2005年
- 为了研究H5N1DNA疫苗对小鼠和鸡的保护效率,用H5N1禽流感病毒HADNA疫苗免疫BALB/c小鼠和SPF鸡.小鼠和鸡分别经电穿孔和肌肉注射免疫两次,间隔为3周.二次免疫后,用致死量的同源病毒进行攻毒实验.空白对照组在攻毒后全部死亡,而经电穿孔免疫的小鼠和鸡均获得了完全的保护,并能有效地抑制病毒在小鼠肺脏和鸡泄殖腔的繁殖.同时,电穿孔免疫的小鼠和鸡均产生了高水平的特异性抗体.经电穿孔免疫的小鼠攻毒后CTL反应明显加强.这些结果表明,HADNA疫苗能有效地保护小鼠和鸡对禽流感病毒的感染,同时也表明电穿孔免疫是DNA疫苗免疫的有效途径之一.
- 张强哲秦曦明董海丽梁荣何宏轩李希姜北宇刘湘军段明星
- 关键词：H5N1禽流感病毒DNA疫苗
- H9N2亚型禽流感病毒HA基因的克隆及其DNA疫苗的动物免疫试验被引量：20
- 2004年
- 血凝素 (HA)是决定禽流感病毒的毒力强弱和免疫原性的主要蛋白质 .根据已发表的H9亚型AIV的HA基因序列 ,设计合成了 1对H9HA特异引物 ,以AIVA/Chicken/Henan/ 1 / 1 999/ (H9N2 )核酸为模板 ,通过RT PCR扩增出 1条 1 6kbcDNA片段 .将HA基因插入pVAX1中 ,构建了真核表达质粒pVAX H9.采用活体电击法免疫 3周龄SPF鸡 1 0只 ,剂量为 5 0 μg/只 ,3周后加强免疫一次 ,5周后以 1 0 0倍鸡胚感染剂量 (EID)的HA基因同源病毒对所有鸡进行攻毒 .其间每周检测抗体水平变化 ,6周后以棉拭子进行泄殖腔病毒分离 .结果为攻毒后免疫组鸡HI效价为 9log2～ 1 0log2 ,对照组为 2log2～ 4log2 ;免疫组病毒分离数为 0 / 1 0 ,对照组为 1 0 / 1 0 .
- 何宏轩秦曦明张强哲汤义刘丽艳郑昌学段明星
- 关键词：禽流感病毒血凝素基因DNA疫苗
