张利军
- 作品数：20 被引量：43H指数：3
- 供职机构：第四军医大学唐都医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 脂多糖通过自噬作用促进氧化低密度脂蛋白诱导的泡沫细胞的形成被引量：3
- 2014年
- 目的:研究脂多糖(LPS)促进氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的泡沫细胞形成的机制。方法:人源性THP-1细胞的培养,经ox-LDL诱导形成泡沫细胞。采用油红O染色鉴定泡沫细胞的形成,免疫荧光和Western blot方法检测自噬活性,观察自噬作用对泡沫细胞脂质沉积的影响。结果:①经形态学观察,脂多糖可以促进ox-LDL诱导的泡沫细胞的形成。②脂多糖可以激活自噬作用,并且自噬活性在16h达到最强。③脂多糖可以增强自噬激活剂雷帕霉素(Rap)的促自噬作用(P<0.05),并且削弱自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)的作用。④Rap单独作用不能影响泡沫细胞中脂质的累积,然而脂多糖能够增强Rap的作用,显著促进脂滴在泡沫细胞中的累积(P<0.05);3-MA可以抑制基础水平和脂多糖诱导后泡沫细胞中脂滴的积累。结论:脂多糖通过增强自噬作用促进泡沫细胞的形成。
- 袁媛张利军王超郑鹏飞张秀敏叶菁冯旭阳
- 关键词：脂多糖自噬泡沫细胞OX-LDL
- HCV多表位基因重组BCG的筛选及对其诱导的免疫应答研究被引量：3
- 2007年
- 目的将丙型肝炎病毒（HCV）多表位基因的穿梭质粒pDE22-CtEm电转化BCG，筛选重组BCG（rBCG），免疫BALB／c小鼠，研究其诱导的免疫应答。方法培养并制备BCG感受态，将重组穿梭质粒pDE22-CtEm电转化BCG，筛选rBCG。rBCG免疫小鼠，同时进行基因免疫，测定血清中特异性抗体，分离小鼠脾淋巴细胞，体外测定淋巴细胞刺激指数、IFN-γ和进行CTL杀伤实验，观察rBCG在小鼠体内诱导的体液和细胞免疫应答。结果筛选出HCV多表位基因rBCG，免疫小鼠后在小鼠体内诱导出特异性的体液和细胞免疫应答，免疫应答水平均高于重组的基因免疫。结论构建的HCV多表位抗原rBCG活疫苗优于基因疫苗。
- 韦三华尹文雷迎峰胡兴斌董轲李斌张青张利军张惠中
- 关键词：丙型肝炎病毒表位重组BCG
- 肝癌靶向SEA/CD80共表达腺病毒在小鼠体内的分布和表达
- 2016年
- 目的:研究肝癌靶向SEA/CD80共表达腺病毒(A-S-C)在小鼠体内的分布。方法:局部注射A-S-C后,采用实时定量PCR方法检测不同时间点BALB/c小鼠血液和粪便中腺病毒的含量。免疫组织化学染色检测腺病毒在BALB/c小鼠体内各组织中的分布情况。Western blot检测目的蛋白SEA和CD80在NOD/SCID小鼠种植瘤中的表达。结果:用药后BALB/c小鼠血液和粪便中腺病毒含量迅速上升,分别在第3天和第5天达到峰值,然后又迅速降低,到第14天时基本消失。免疫组化检测5型腺病毒抗原,结果发现腺病毒主要分布在小鼠的肝组织中,其他组织中均为阴性。免疫印迹结果显示目的基因SEA的表达量也在用药后第3天达到峰值,逐渐降低,至第14天降到最低水平。结论:肝癌靶向免疫基因治疗剂A-S-C在小鼠体内代谢稳定,目的基因能够在移植瘤中特异性表达。同时,初步结果显示A-S-C对正常器官无明显毒副作用。
- 袁媛吴雅岚张秀敏石剑宽孙超张利军
- 关键词：肝癌葡萄球菌肠毒素ACD80腺病毒
- 稳定表达丙型肝炎病毒HLA-A2限制性多表位基因C1R-AAD细胞克隆的建立
- 2010年
- 目的建立稳定表达丙型肝炎病毒(HCV)HLA-A2限制性多表位基因的C1R-AAD细胞克隆。方法合成人泛素基因(Ub)和HCVHLA-A2限制性多表位基因(Mep),分别克隆入原核表达质粒pRSET-A,构建多表位抗原基因的原核表达质粒pRSET-Ub-Mep。用BamHⅠ和HindⅢ双酶切质粒pRSET-Ub-Mep,得到复合多表位基因Ub-Mep,亚克隆入真核表达载体pcD-NA3.1(-),构建重组真核表达质粒pcDNA3.1(-)-Ub-Mep,转染至C1R-AAD细胞,G418压力筛选后,通过有限稀释法获得稳定表达Ub-Mep融合蛋白的C1R-AAD细胞克隆,采用RT-PCR法检测稳定转染细胞中Ub-Mep基因mRNA的转录;间接免疫荧光法和Westernblot法检测Ub-Mep蛋白在稳定转染细胞中的表达。结果重组真核表达质粒pcDNA3.1(-)-Ub-Mep经酶切鉴定证明构建正确;在稳定转染的C1R-AAD细胞中可检测到Ub-MepmRNA和蛋白水平的表达。结论已建立了稳定表达HCVHLA-A2限制性多表位抗原的C1R-AAD细胞克隆,为进一步研究HLA-A2限制性多表位基因诱导的细胞免疫应答建立了靶细胞。
- 韦三华张海董轲林芳王希李斌沈建军张利军张惠中
- 关键词：丙型肝炎病毒表位真核细胞
- 不同医院全血细胞计数比对实验结果分析被引量：2
- 2016年
- 目的分析3家医院不同分析仪全血细胞计数比对实验结果。方法以西安交通大学第二附属医院(简称交大二院)采用的日本希森美康公司XE-2100型全自动血细胞分析仪(简称XE-2100分析仪)作为参比仪器,以西京医院采用的日本希森美康公司XN-3000分析仪(检测XN-3000分析仪)及唐都医院采用的XE-2100作为实验仪器,按照美国临床和实验室标准化协会(CLSI)发布的EP9-A2文件的要求,对白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、血红蛋白(Hb)、血小板(PLT)、红细胞比容(HCT)检测结果进行比对分析,计算检测结果相关系数(r),以美国临床实验室修正法规(CLIA′88)规定的室间质量评价总允许误差范围为标准,判断检测结果偏差是否可接受。结果交大二院XE-2100分析仪和西京医院XN-3000分析仪WBC、RBC、Hb、HCT检测结果的r值分别为0.998、0.998、0.984、0.981,相关性良好,PLT检测结果的r值为0.953,相关性不佳;WBC、RBC、Hb、HCT检测结果比较差异无统计学意义(P>0.05),但PLT检测结果比较差异有统计学意义(P<0.05)。交大二院XE-2100分析仪和唐都医院XE-2100分析仪WBC、RBC、PLT、Hb、HCT检测结果的r值分别为0.999、0.999、0.998、0.999、0.998,相关性良好;各参数检测结果比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论不同医院全血细胞计数部分参数检测结果相关性良好,检测结果可以互认。
- 雷娜张彦平井敏敏胡恩亮程翔张利军张磊
- 关键词：全血细胞计数
- 脂肪储存小滴蛋白5的表达、纯化及多克隆抗体的制备
- 目的制备兔抗小鼠脂肪储存小滴蛋白5(LSDP5)蛋白的多克隆抗体并进行鉴定。方法将原核表达质粒pGEX-LSDP5转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达GST与LSDP5融合蛋白,经GSTrap FF柱纯化后...
- 刘芳叶菁张利军于铭李烦繁张丽英李航谷雨李青
- 关键词：原核表达多克隆抗体酶联免疫吸附试验
- 文献传递
- 携带人MAGE-1基因重组腺病毒的构建及其在肝癌细胞中的表达被引量：2
- 2008年
- 目的构建人黑色素瘤相关抗原-1(MAGE-1)基因的腺病毒,并研究其感染肝癌细胞系HepG2细胞的效率。方法采用基因克隆技术,将人MAGE-1基因克隆到腺病毒穿梭质粒pShuttle-IRES-hrGFP中,构建pShuttle-MAGE-1-IRES-hrGFP质粒,利用细菌BJ5183将穿梭质粒与pAdEasy-1进行重组,获得重组的腺病毒质粒。线性化的腺病毒质粒经脂质体转染AD293细胞,进行重组腺病毒的包装和扩增。采用CsCl密度梯度离心进行病毒浓缩和纯化。获得的腺病毒感染肝癌细胞HepG2,观察其感染效率和MAGE-1表达水平。结果通过酶切鉴定证明腺病毒载体构建成功,包装出携带人MAGE-1基因的腺病毒,滴度达2.1×1010pfu/mL,获得的腺病毒对HepG2细胞的感染效率高于98%以上。结论成功地利用细菌内同源重组方法构建了携带人MAGE-1基因的腺病毒,并能够在肝癌细胞中高效地表达,为利用MAGE-1进行免疫治疗提供了材料。
- 张利军张惠忠陈广生叶菁师建国
- 关键词：腺病毒肝细胞癌
- LSDP5在小鼠心衰发生过程中的作用研究
- <正>目的:脂滴表面蛋白LSDP5主要表达于心肌、肝脏、骨骼肌和棕色脂肪组织(BAT)等脂肪酸氧化代谢活跃的组织器官中,参与脂滴的代谢过程。有研究表明,在心脏中,LSDP5能通过保护脂滴,降低脂质的过氧化,减少ROS损伤...
- 武杰张利军王超叶菁
- 文献传递
- 嵌合HCV中和抗原表位的HBVS抗原病毒样颗粒制备及鉴定
- 目的 制备嵌合丙型肝炎病毒(HCV)中和表位的HBV 小S 抗原病毒样颗粒,并进行鉴定和纯化.方法 选择HCV E1和E2区保守的线性中和抗原表位,扩增HBV S 抗原基因,在HBV S 疏水区127 和128 位氨基酸...
- 韦三华舒放雷迎峰林芳崔颖李斌张利军刘昕阳张惠中
- 关键词：中和表位病毒样颗粒
- 肾综合征出血热血常规分析及外周血涂片观察被引量：4
- 2013年
- 目的研究肾综合征出血热患者各期血常规的变化,以及外周血涂片中异型淋巴细胞的数量和形态特点。方法分别测定52例肾综合征出血热患者发热期、休克期、少尿期、多尿期和恢复期的血常规,并观察不同时期外周血涂片中异型淋巴细胞的形态和数量,与随机抽取的80例体检人员的血常规检测结果进行对比,并进行统计学分析。结果肾综合征出血热患者外周血白细胞在休克期、少尿期和多尿期均增高,以休克期最为显著(P<0.01);作为肾综合征出血热的主要变化指标,血小板在休克期、少尿期均明显减低,其中以休克期最为明显(P<0.01);而血红蛋白在休克期及少尿期均增高。外周血涂片中,各时期均可观察到异形淋巴细胞,且休克期和少尿期以异型淋巴细胞III型多见,而中性粒细胞胞浆出现中毒颗粒及空泡变性在这两个时期也均可见到。结论肾综合征出血热的血常规检测及外周血涂片检查在疾病发展的各个时期均有其特点,可为疾病的诊断和监测提供依据。
- 翟鸿烨郭维宁静刘茜樊俊袁晖杨肖飞孙忍张利军
- 关键词：肾综合征出血热血常规
