崔自由
- 作品数：10 被引量：36H指数：3
- 供职机构：郑州大学医学院更多>>
- 发文基金：河南省科技攻关计划河南省高等学校创新人才培养工程教育部科学技术研究重点项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 真核绿色荧光蛋白表达载体pEGFP-C3-B7-2的构建被引量：1
- 2005年
- 目的:构建含人B7-2基因的绿色荧光蛋白表达载体pEGFP-C3-B7-2。方法:应用RT-PCR、巢式PCR方法从重症肌无力患者胸腺组织中扩增出人B7-2cDNA基因片段,经回收、纯化、酶切后,依次连接到质粒pGEM-T和pEGFP-C3上。结果与结论:酶切及测序证实成功构建了克隆载体pGEM-B7-2和真核绿色荧光表达载体pEGFP-C3-B7-2。
- 路静王明臣赵军宋谦崔自由赵继敏杨洪艳黄幼田汤黎明赵国强董子明
- 关键词：绿色荧光蛋白真核表达载体克隆
- 人B7-2基因修饰的食管癌细胞瘤苗抗肿瘤的免疫效应被引量：3
- 2005年
- 目的:研究人B7-2基因修饰的食管癌细胞作为瘤苗的抗肿瘤作用。方法:将真核荧光表达载体pEGFP-C3-B7-2,通过脂质体转染技术转染人食管癌细胞株EC9706。外周血来源的树突状细胞(DC)负载肿瘤抗原后,与自体T淋巴细胞共培养3d,获得细胞毒性T淋巴细胞(CTL)。用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测CTL对转染和未转染pEGFP-C3-B7-2的人食管癌细胞EC9706的杀伤活性。结果:CTL对转染pEGFP-C3-B7-2的肿瘤细胞的杀伤活性大于转染pEGFP-C3和未转染细胞的杀伤活性(P<0.05)。结论:人B7-2基因修饰的EC9706肿瘤细胞瘤苗,可诱导出明显的抗EC9706细胞的免疫效应。
- 赵国强汤黎明路静赵军宋谦崔自由杨洪艳赵继敏黄幼田董子明
- 关键词：绿色荧光蛋白肿瘤疫苗免疫效应
- 野生型DNA聚合酶β重组绿色荧光蛋白表达载体的构建被引量：3
- 2005年
- 目的:构建携带野生型DNA聚合酶β基因(wtDNApolβ)的重组真核绿色荧光蛋白表达载体pEGFP-C3-polβ。方法:运用PCR方法,从质粒pcDNA3.1-polβ中扩增出wtDNApolβ的开放阅读框序列,T-A克隆至pGEM-T载体,再定向克隆至pEGFP-C3,重组质粒pEGFP-C3-polβ用限制性内切酶酶切鉴定,通用鉴定引物PCR扩增鉴定,并进行DNA序列分析。结果与结论:多种鉴定方法证实了重组载体pEGFP-C3-polβ中的wtDNApolβ序列与GenBank中已知的序列相符。携带wtDNApolβ的重组增强型绿色荧光蛋白表达载体pEGFP-C3-polβ构建成功。
- 赵国强秦冰何炜赵军路静宋谦崔自由董子明
- 关键词：DNA聚合酶Β增强型绿色荧光蛋白DNA序列分析
- 人野生型DNA聚合酶β在NIH3T3细胞中的定位
- 2005年
- 目的:研究人野生型DNA聚合酶β(wtDNApolβ)在NIH3T3细胞内的定位。方法:将携带人wtDNApolβ的真核绿色荧光表达载体pEGFP-C3-polβ,用脂质体介导的方法转染NIH3T3细胞株,用荧光倒置显微镜观察转染细胞,观察wtpEGFP-C3-polβ融合基因表达。以转染空质粒pEGFP-C3的NIH3T3细胞为对照。结果:转染细胞均有GFP表达,说明转染成功。转染pEGFP-C3-polβ的细胞胞核荧光强度较胞浆强,而空质粒转染细胞胞浆胞核荧光强度无差别。结论:wtDNApolβ在NIH3T3细胞中定位于胞核内。
- 赵军赵勤赵国强秦冰路静宋谦崔自由赵继敏杨红艳黄幼田汤黎明董子明
- 关键词：转染蛋白质定位NIH3T3细胞
- IFNγ基因修饰的树突状细胞对小鼠抗H22肝腹水瘤的免疫调节作用
- 本实验在已构建好的重组真核表达质粒pcDNA3.1-IFNγ的基础上，获得小鼠IFNγ基因修饰的小鼠骨髓来源的DCs，拟初步观察IFNγ基因修饰对DCs的生物学功能的影响，并以此为疫苗免疫小鼠，观察IFNγ基因修饰DCs...
- 崔自由
- 关键词：树突状细胞基因修饰抗原递呈
- 文献传递
- DC-SIGN:C型凝集素中的新成员被引量：2
- 2005年
- DC SIGN是一种树突状细胞特征性的且具有多种功能免疫新分子 ,不但可以参与树突状细胞的迁移、粘附以及对抗原的识别与内化 ,还可以参与许多病原体的免疫逃避 ,本文拟就有关内容作一综述。
- 崔自由陈晓郁
- 关键词：DC-SIGN受体免疫逃避
- 应用流式细胞术动态观测小鼠树突状细胞诱导的T细胞增殖的变化被引量：3
- 2005年
- 目的:运用流式细胞术(FCM)分析小鼠混合淋巴细胞反应(MLR)中T细胞增殖的动态变化。方法:把分别经脂多糖(LPS)和生理盐水(NS)刺激的小鼠树突状细胞(DC)经H22肿瘤细胞抗原肽冲击后,以1:50的比例与小鼠T细胞(TC)进行同种MLR,分别作为LPS+DC+TC组和NS+DC+TC组,同时设LPS+TC组和空白TC对照组。经体外培养,分别于反应的第0d、1d、2d、3d、4d、5d、6d收集TC,FCM检测TC细胞周期。结果:随培养时间的延长,LPS+DC+TC组、NS+DC+TC组S期细胞及细胞增殖指数均先增后减、LPS+TC组和空白TC对照组则呈下降趋势(P<0.05),各组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:FCM可以从单细胞水平客观、准确地反映淋巴细胞增殖的动态变化。
- 崔自由黄幼田赵继敏赵军路静赵国强赵明耀董子明
- 关键词：混合淋巴细胞反应流式细胞术树突状细胞小鼠
- 中国林州市食管癌高发区人群病因学预防效果观察被引量：15
- 2008年
- [目的]探讨降低食管癌发病率的有效预防对策和措施。[方法]根据食管癌流行病学和病因学研究发现的主要可疑致癌因素、促癌因素和保护因素,组织实施五项综合性病因学预防措施。应用自身前后对照的类实验研究方法,以林州市居民食管癌标化发病率为终点指标,以食管癌的主要致癌、促癌因素和保护因素的暴露水平为中间指标,评价其预防效果。[结果]林州市居民20年来食管癌标化发病率呈显著下降趋势,2003年与1980年相比男性下降了56.33%,女性下降45.07%;林州市居民体内致癌性亚硝胺和霉菌毒素的暴露水平明显下降;体内维生素A、B2水平明显增高,个人行为与社会环境危险因素明显减少、保护因素明显增加。[结论]林州食管癌高发区居民食管癌发病率的显著降低可能与实施针对病因的五项综合性预防措施有关。
- 杨文献陆士新刘桂亭黎钧耀杨中枢程同吉连广庭甄应中徐友梅王瑞林裘宋良张云汉董子明杨观瑞杨胜利陆维权胡东生李文杰吕全军王留兴赵立群连士勇刘志才李变云常贵生王占伟崔自由
- 关键词：食管肿瘤流行病学发病率
- DNA聚合酶β过表达对食管癌EC9706细胞的影响被引量：4
- 2005年
- 目的:观察过表达的DNA聚合酶β对食管癌EC9706细胞系的影响.方法:运用PCR方法,从质粒pcDNA3.1-polβ中扩增出野生型和突变型的DNA聚合酶β基因,作为目的片段,定向克隆至pEGFP-C3真核绿色荧光蛋白表达载体,获得野生型和突变型的重组真核表达载体pEGFP—C3-polβ.分别将野生型和突变型的pEGFP—C3-polβ转染EC9706细胞,荧光显微镜观察其定位,绘制生长曲线,测定细胞周期.结果:DNA序列分析证实了重组载体中的DNA聚合酶β序列正确,荧光显微镜结果显示野生型的DNA聚合酶β表达以细胞核为主,突变型的DNA聚合酶β则表达在整个细胞中,明显与野生型的DNA聚合酶β的核定位不同.而且,野生型的细胞生长较对照组缓慢(P<0.05),野生型的还能抑制EC9706细胞的生长和使S期细胞减少(22.11±0.12vs44.86±0.03,P<0.05),而突变型的则不能促进EC9706细胞的生长,S期细胞增殖不明显(P>0.05).结论:过表达的野生型食管癌DNA聚合酶β可以降低EC9706细胞的增殖.
- 赵军路静宋谦崔自由赵国强黄幼田杨洪艳赵继敏董子明
- 关键词：DNA聚合酶Β食管癌EC9706细胞野生型
- 人B7-2瘤苗与DC瘤苗体外联合诱导抗食管癌的作用被引量：5
- 2005年
- 目的:研究人B7-2瘤苗和负载了肿瘤细胞冻融抗原的DC瘤苗体外联合诱导抗食管癌的免疫作用.方法:应用脂质体转染技术,将融合基因表达载体pEGFP-N3-B7—2转染人食管癌细胞株EC9706.采用密度梯度离心法从脐血中分离单个核细胞(MNC)后,获得单核细胞(Mo).在细胞因子作用下诱导分化,第3d加入EC9706的冻融抗原,共培养4d后获得负载肿瘤抗原的成熟树突状细胞(MDC).将致敏DC与从脐血中分离的T淋巴细胞共培养3d,获得细胞毒T淋巴细胞(CTL);四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测CTL对转染和未转染的EC9706的细胞毒作用.结果:融合基因在食管癌细胞株EC9706的胞膜上定位表达.脐血来源的DC可负载并递呈肿瘤抗原,激活自体T淋巴细胞,诱导肿瘤特异性CTL产生,对转染pEGFP—N3-B7—2的EC9706细胞有显著杀伤作用(F=21.672,P=0.000).结论:人B7—2瘤苗和DC瘤苗体外联合应用,诱导出明显的杀伤食管癌细胞的免疫效应.
- 路静赵军宋谦崔自由赵国强黄幼田杨洪艳赵继敏董子明
- 关键词：DC瘤苗食管癌
