尹玲玲
- 作品数:17 被引量:10H指数:2
- 供职机构:徐州医学院附属医院更多>>
- 发文基金:江苏省“六大人才高峰”高层次人才项目国家自然科学基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生农业科学更多>>
- TIRC7在慢性髓系白血病患者中的表达研究
- 目的:检测TIRC7(T-cell immune response cDNA 7)在慢性髓系白血病(CML)患者单个核细胞(MNC)中的表达水平并初步探讨其临床意义。方法:收集24例CML患者的新鲜骨髓或外周血,用Tri...
- 尹玲玲朱锋赵恺徐开林
- 关键词:慢性髓系白血病实时定量PCR
- IL1RAP单克隆抗体的制备与鉴定
- 本研究旨在制备针对白血病干细胞(LSC)表面标志蛋白IL1 RAP (IL-1 receptor accessory protein)的特异性单克隆抗体并对其进行鉴定。杂交瘤细胞3H6E10、10D8A7种植BALB/c...
- 尹玲玲
- 关键词:单克隆抗体白血病干细胞
- 60Coγ射线全身致死剂量照射对小鼠脾脏和淋巴结T细胞亚群表面免疫分子表达水平的影响
- 赵恺田宇赵冬梅尹玲玲阮素红徐开林
- ^60Coγ射线致死剂量全身照射对小鼠脾脏和肠系膜淋巴结T细胞亚群表面免疫分子表达水平的影响被引量:1
- 2016年
- 目的探讨小鼠接受^60Coγ射线致死剂量全身照射(TBI)后,脾脏和肠系膜淋巴结T细胞活化分子和黏附分子表达水平的变化。方法于2012年7月至10月,选择12只无特定病原体(SPF)级雄性BALB/c小鼠为研究对象。研究对象纳入标准:周龄为10~12周龄,体重为20-25g。按照完全随机法将其分为TBI组(接受致死剂量TBI)和对照组(未照射),每组6只。TBI组予^60Coγ放射源一次性照射(剂量率为0.66Gy/min,总剂量为7.5Gy)。于照射后第7天,脊椎离断处死两组小鼠,无菌条件下,取其脾脏、肠系膜淋巴结,研磨后采用密度梯度离心法收集单个核细胞。采用流式细胞术检测两组小鼠脾脏和肠系膜淋巴结中,CD4^+T,CD8^+T,辅助性T细胞(Th)1及细胞毒性T细胞(Tc)1细胞表面CD44和CD62L的表达水平。并采用统计学方法比较两组小鼠上述免疫分子表达水平。结果照射后第7天,TBI组小鼠脾脏和肠系膜淋巴结CD44^+CD4^+T细胞比例为(88.1±1.1)%和(76.7±1.8)%,均低于对照组的(95.0±1.1)%和(92.8±1.4)%,且差异有统计学意义(t=-11.01、-17.82,P〈0.05);而CD44^+CD8^+T细胞的比例分别为(99.0±0.3)和(92.5±1.7)%,均高于对照组的(88.7±0.8)%和(83.4±1.6)%,差异亦有统计学意义(t=31.15、9.54,P〈0.05)。TBI组小鼠肠系膜淋巴结CD44^+Thl比例为(4.1±0.4)%,高于对照组的(1.0士0.2)O,且差异有统计学意义(t=14.78,P〈0.05);而两组小鼠脾脏CD44^+Th1比例比较,差异无统计学意义(t=-0.93,P〉0.05)。TBI组小鼠脾脏和肠系膜淋巴结CD44^+Tc1比例分别为(65.5士4.6)O和(26.6±2.8)%,较对照组的(41.8±1.5)%和(18.7±1.3)%增高,且差异有统计学意义(t=9.97、6.51,P〈0.05)。TBI组小鼠的脾脏和肠
- 田宇赵冬梅尹玲玲阮素红赵恺徐开林
- 关键词:全身照射CD8阳性T淋巴细胞CD4阳性T淋巴细胞
- 白血病干细胞的新型标志蛋白IL1RAP杂交瘤细胞的制备及其分泌单克隆抗体的检测被引量:3
- 2013年
- 本研究旨在制备针对白血病干细胞表面标志蛋白IL1RAP(IL-1 receptor accessory protein)的特异性单克隆抗体并对其进行鉴定。用重组人IL1RAP作为抗原免疫BALB/c小鼠,通过常规杂交瘤技术将免疫后的小鼠脾细胞与SP2/0细胞经PEG融合,筛选阳性杂交瘤细胞株。分别应用ELISA和Western blot法对杂交瘤细胞上清中分泌抗体进行抗体类型、滴度和敏感性检测。分离人外周单个核细胞,检测所得抗体对细胞内源性抗原的特异性。结果表明,获得了8株可稳定分泌IL1RAP单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别为3H6E10、4B6A6、8G11B5、9E9F2、10D8A7、1C7H7、1D7G11和2D3D3;抗体类型鉴定为IgG1/κ型;分泌的单克隆抗体能特异性识别单个核细胞表达的IL1RAP。结论:本实验成功制备了可稳定分泌IL1RAP单克隆抗体的杂交瘤细胞及其特异性的IL1RAP单克隆抗体,为将来有效清除体内白血病干细胞提供了新途径。
- 赵恺尹玲玲赵冬梅吴庆运陈翀潘彬曾令宇姚瑶徐开林
- 关键词:单克隆抗体白血病干细胞
- 白细胞介素22对移植物抗宿主病小鼠胸腺的修复作用及功能的影响
- 2014年
- 目的 探讨白细胞介素22(IL-22)对异基因骨髓移植(allo-BMT)后并发移植物抗宿主病(GVHD)小鼠胸腺的修复作用及其对胸腺免疫功能的影响.方法 分别以6~8周龄、雄性C57BL/6和BALB/c小鼠为供受鼠,建立GVHD模型.实验分为正常对照组、GVHD小鼠注射IL-22组(BS+IL-22)、GVHD小鼠注射PBS组(BS+PBS).采用锥虫蓝染色法检测移植后不同时间点小鼠胸腺细胞数量.采用流式细胞术检测胸腺T细胞各亚群的比例、分泌IFN-γ和IL-17效应性T细胞及CD4+T和CD8+T细胞比例.结果 +14d时BS+IL-22组小鼠的胸腺细胞总数[(14.6±5.1)×10^4]明显高于BS+PBS组[(6.2±2.9)×10^4];BS+IL-22组小鼠胸腺细胞数量随移植时间延长持续增多,到+21和+28 d细胞数量与正常对照组小鼠相比差异无统计学意义,且仍高于BS+PBS组.小鼠allo-BMT后注射IL-22对胸腺成熟CD4+和CD8+T细胞的比例无影响,但可显著提高未成熟CD4+CD8+T细胞亚群的比例.IL-22可上调胸腺IFN-γ+CD4+T细胞[(2.42±0.75)%]和IFN-γ+CD8+T细胞[(5.44±0.47)%]比例,而对IL-17+CD4+T细胞和IL-17+CD8+T细胞无影响.结论 IL-22可加速allo-BMT后小鼠胸腺的修复过程,并增强胸腺CD4+和CD8+T细胞分泌IFN-γ的能力.
- 赵恺赵冬梅尹玲玲潘彬徐开林
- 关键词:白细胞介素22骨髓移植移植物抗宿主病
- 不同方法转染人外周血淋巴细胞效率比较被引量:1
- 2015年
- 目的 采用不同方法转染原代人外周血淋巴细胞,以寻找一种简便、高效的淋巴细胞转染方法.方法 采用聚蔗糖-泛影葡胺(Ficoll-Hypaque)分离法从健康人外周血中分离出单个核细胞,锥虫蓝检测细胞存活率.单个核细胞在6孔板内培养2h后吸出悬浮的淋巴细胞至24孔板中继续培养.分别采用电穿孔介导载体质粒(PEGFP-N1)转染活化的淋巴细胞、慢病毒(LVGFP)单次感染及慢病毒重复感染方法分别转染静息或活化的淋巴细胞,在荧光显微镜下观察感染后不同时间点细胞绿色荧光蛋白(GFP)表达情况,同时收集细胞用流式细胞术检测GFP阳性细胞的比例,比较不同条件下慢病毒感染淋巴细胞的效率.结果 通过Ficoll-Hypaque分离的单个核细胞的纯度可达95%,其活细胞率>95%,获得的淋巴细胞占90%~ 95%,形态较均一.“2 100V、10 ms、1个脉冲”电穿孔淋巴细胞后可见散在荧光,但随着时间推移荧光逐渐减弱,72 h基本看不到荧光.慢病毒单次感染静息期淋巴细胞48 h后无绿色荧光,流式细胞术检测GFP阳性细胞<1%.慢病毒单次感染增殖期淋巴细胞可见绿色荧光,且随着病毒浓度增大,荧光逐渐增强,GFP阳性细胞在1%~5%之间.慢病毒重复感染增殖期淋巴细胞可见较强绿色荧光,GFP阳性细胞在5%~10%左右,随着时间推移荧光逐渐增强.结论 慢病毒重复感染增殖期淋巴细胞,能有效地将外源基因导入淋巴细胞内稳定表达.
- 尹玲玲阮素红田宇赵恺徐开林
- 关键词:淋巴细胞转染电穿孔慢病毒
- ^60Co全身致死剂量照射对小鼠T细胞亚群分布及其IFN-γ和IL-17表达水平的影响被引量:2
- 2014年
- 目的 探讨致死剂量全身照射(TBI)对小鼠T淋巴细胞亚群分布及其细胞因子表达水平的影响.方法 将小鼠随机分为TBI组和未照射对照组.于致死剂量^60Co照射后第7天分离小鼠骨髓、肠系膜淋巴结、脾脏及肝脏的淋巴细胞,用流式细胞术检测细胞免疫表型及细胞内IFN-γ和IL-17表达水平.结果 ①TBI小鼠骨髓、脾、淋巴结及肝脏的淋巴细胞总数低于对照组[(5.34±1.14)×10^5对(3.08±1.13)×10^7、(2.10±0.54)×10^5对(2.71±0.83)×10^7、(5.89±1.07)×10^5对(7.92±1.15)×10^7、(3.45±1.01)×10^5对(7.44±0.79)×10^6,P值均<0.05];②TBI组小鼠脾、淋巴结及肝组织IFN-γ CD4^+T细胞百分比高于对照组[(20.77±2.03)%对(3.69±3.13)%、(6.28±0.46)%对(1.11±0.17)%、(27.24± 5.79)%对(9.01±1.24)%,P值均<0.05];③TBI组小鼠脾、淋巴结及肝组织IFN-γ^+ CD8^+T细胞百分比亦高于对照组[(52.40±9.26)%对(43.06±1.04)%、(33.56±5.02)%对(21.83±4.22)%、(44.27±8.97)%对(19.32±3.11)%,P值均<0.05];④TBI组小鼠脾及肝脏中CD4^+T及CD8^+T细胞IL-17A表达水平较对照组降低.结论 TBI可导致小鼠各脏器淋巴细胞数量减少、诱导IFN-γ表达阳性的效应性Th1和Tc1细胞百分比增加.
- 赵冬梅尹玲玲徐开林赵恺
- 关键词:全身照射白细胞介素17
- 髓细胞白血病干细胞表面标志蛋白白细胞介素-1辅助蛋白及其在血液系统疾病中的研究进展被引量:1
- 2015年
- 白细胞介素(IL)-1受体辅助蛋白(IL-1RAP)已被证实作为IL-1受体Ⅰ型(IL-1R Ⅰ)的共同受体,参与IL-1的效应发挥.最新研究表明,IL-1RAP是新鉴定的髓细胞白血病干细胞(LSC)表面标志蛋白,且IL-1RAP抗体,可通过抗体依赖性细胞介导的细胞毒性作用(ADCC),杀灭慢性髓细胞白血病(CML)患者体内的LSC,而不损伤正常造血干细胞(HSC).另有研究发现,IL-1RAP表达水平与急性髓细胞白血病(AML)临床预后密切相关,IL-1RAP表达水平亦是预测骨髓增生异常综合征(MDS)危险度的潜在指标.笔者拟就髓细胞白血病LSC表面标志蛋白IL-1RAP及其在血液系统疾病中的研究进展进行综述如下.
- 尹玲玲赵恺徐开林
- 关键词:白血病干细胞白血病
- 60Coγ射线全身致死剂量照射对小鼠脾脏和淋巴结T细胞亚群表面免疫分子表达水平的影响
- 目的:探讨小鼠接受60Coγ射线致死剂量全身照射(TBI)后,脾脏和肠系膜淋巴结T细胞活化分子和黏附分子表达水平的变化。方法:SPF级雄性BALB/c小鼠完全随机分为TBI组和未照射对照组,TBI组予60Coγ放射源一次...
- 赵恺田宇赵冬梅尹玲玲阮素红徐开林
- 关键词:TBIT细胞
- 文献传递