宋惠萍
- 作品数：41 被引量：151H指数：8
- 供职机构：中南大学湘雅医学院医学检验系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖南省自然科学基金湖南省卫生厅科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学轻工技术与工程更多>>
- 长期雌激素替代治疗对心肌超微结构影响的实验研究
- 2012年
- 【目的】研究长期雌激素替代治疗对心肌细胞超微结构的影响。【方法】将50只5月龄SD雌鼠随机分成三组：构建对照组、去势（去卵巢）和雌激素替代三组动物模型。第13周处死大鼠，快速取左心尖组织，置于4％多聚甲醛或2．5％戊二醛固定液中固定，分别行石蜡和超薄切片，光学显微镜和电子显微镜下观察心肌细胞结构。【结果】光学显微镜下：对照组大鼠左心室心肌细胞呈梭形，肌纤维排列整齐；去势组大鼠与雌激素替代组大鼠心肌细胞形态与对照组相似，无明显改变；电子显微镜下：去势组大鼠左心室心肌细胞水肿，肌原纤维走向不规则，结构紊乱，部分肌丝甚至局部溶解；线粒体高度肿胀、空泡变。雌激素替代组大鼠左心室心肌细胞肌原纤维较去势组排列整齐，除少部分线粒体肿胀外，大部分正常，有的区域肌原纤维结构完整，排列整齐，且线粒体正常，与对照组结构无明显差别。【结论】从形态学上阐明长期雌激素缺乏能导致心肌亚细胞结构紊乱，雌激素替代能阻止心肌结构的破坏。雌激素在维持心肌亚细胞结构的完整中起着重要作用。
- 徐霞黄生鹏徐克前黄建军梁日初宋惠萍
- 关键词：心肌超微结构雌激素替代疗法
- 中国人2型糖尿病患者醛糖还原酶基因5调控区的多态性与功能
- 2002年
- 目的 检测AR基因5调控区可能引起启动子功能及蛋白表达的基因改变。
方法 应用PCR-SSCP对AR基因5'调控区进行筛选，所有变异体均进行DNA序列分析并克隆至氯霉素乙酰转移酶报告基因载体（pCAT），然后转染Hela细胞，检测CAT活性求出启动子相对活性。同时进行凝胶滞留试验与足纹分析以确定DNA与蛋白质的相互作用。
结果 在145名2型糖尿病患者及123名正常对照的醛糖还原酶基因5'调控区除野生型外，发现两种多态性C(-106)T 和 C(-12)G。在正常对照和2型糖尿病患者中，基因型WT/WT, WT/C(-12)G 和
WT/C(-106)T的发生率无显著性差异.在有视网膜病变和无视网膜病变的2型糖尿病患者中, WT/C(-106)T 的发生率分别为 31.5%和17.5% (P<0.05), WT/C(-12)G的发生率分别为 10.5%和2.5%（P>0.05）,在有并发症的患者中, WT/C(-12)G 和 WT/C(-106)T的总发生率为41.8%,明显高于无视网膜病变患者的发生率20.0%(P<0.025),野生型, C(-12)G和C(-106)T 的相对转录活性分别为15.7%, 31.0% 和
32.2%,DNA-蛋白质相互作用实验表明,这些变异未改变DNA与反式作用因子的结合位点。
结论 在中国人群中,AR基因5调控区C(-106)T 和 C(-12)G多态与2型糖尿病视网膜病变密切相关。
- 李清解谢平黄建军谷亚鹏曾卫民宋惠萍
- 关键词：中国人醛糖还原酶视网膜病变
- 胰岛素受体底物-1基因3′非翻译区的突变与中国人2型糖尿病的关系被引量：1
- 2003年
- 目的 :研究胰岛素受体底物 1(IRS 1)基因 3′非翻译区的突变与中国 2型糖尿病的关系。方法 :采用PCR SSCP技术扫描 12 0例中国 2型糖尿病患者和 12 0例正常对照的IRS 1基因 3′非翻译区序列 ,所有SSCP变异的样品进行DNA测序分析。结果 :SSCP分析存在假阳性结果。测序未发现有基因突变。结论 :IRS 1基因 3′非翻译区的突变不是引起中国人
- 陈淑华谷亚鹏曾卫民宋惠萍
- 关键词：基因突变胰岛素受体底物-12型糖尿病
- 17β雌二醇增强小鼠肌原细胞的胰岛素效应被引量：5
- 2003年
- 目的 :探讨 17β雌二醇对小鼠肌原细胞的胰岛素效应的影响和对高胰岛素诱导的胰岛素抵抗的防止作用。方法 :将小鼠肌原细胞分为 6组 ,3组不加高胰岛素 (5× 10 -7mol/L)预处理 2 4h后 ,以其中 1组为对照 ,另 2组分别用 1nmol/L、10nmol/L的 17β雌二醇再处理 2 4h。另外 3组加高胰岛素 (5× 10 -7mol/L)预处理 2 4h之后 ,弃培养液 ,用冷的PBS洗涤细胞 3次 ,即为胰岛素抵抗细胞 ,以其中 1组为胰岛素抵抗细胞组 ,另 2组分别用 1nmol/L、10nmol/L的 17β雌二醇再处理 2 4h。对上述 6组细胞进行胰岛素刺激的葡萄糖摄取能力、糖原合酶 (GS)、磷酸果糖激酶 (PFK)和丙酮酸激酶 (PK)的活性测定。结果 :17β雌二醇可提高小鼠肌原细胞的葡萄糖转运能力 ;提高总糖原合酶活性和糖原合酶的活性 ;还可增强细胞的磷酸果糖激酶和丙酮酸激酶活性。结论
- 李峰王文龙田宗城刘美莲谢平宋惠萍
- 关键词：雌二醇胰岛素胰岛素抗药性
- 基因工程的发展及其医学意义被引量：8
- 2000年
- 70年代初 DNA体外重组技术—基因工程技术的出现 ,将传统的生物学技术引向了高技术之路。分子生物学从而在广度、深度两个方面高速、蓬勃发展 ;至 90年代末 ,多利克隆羊的诞生 ,更是将基因工程技术推向了一个颠峰。基因工程是 2 0世纪科学技术最具革命性的成就之一 ,可以说它从分子水平上深刻地揭示出生命的本质和运动规律 ,也前所未有地提供了人类认识自我、保护自我的新手段。
- 谢平宋惠萍
- 关键词：基因工程分子生物学
- 雌激素和高胰岛素调节胰岛素受体底物-1,2表达机制研究被引量：1
- 2005年
- 目的研究雌激素和高浓度胰岛素对胰岛素受体底物(IRS)-1和-2表达的分子机理。方法将IRS-1,2基因5′调控区克隆至含荧光素酶表达载体pGL3质粒,转染HeLa细胞,加雌激素(1nmol/L)或高浓度胰岛素(100nmol/L)培养,检测IRS-1,2基因5′调控区相对转录活性。结果高浓度胰岛素刺激细胞48h,IRS-2基因5′调控区相对转录活性减低,IRS-1无明显差异;雌激素处理显著增加IRS-1,2基因5′调控区的相对转录活性。结论高胰岛素可能通过作用于IRS-2基因5′调控区中胰岛素作用元件,使其转录活性降低。而雌激素则通过作用于IRS-1,2基因5′调控序列,使其转录活性提高,增强其表达。
- 谢平刘美莲曾卫民黄建军陈淑华卢瑾徐霞宋惠萍
- 关键词：雌激素类胰岛素
- 成年大鼠胰岛细胞的体外培养
- 2007年
- 目的:建立一种高效、实用的成年大鼠胰岛细胞分离、纯化和体外培养的方法。方法:采用胰管内逆行灌注胶原酶溶液消化,密度梯度离心纯化胰岛,显微镜下手挑法捡出全部胰岛。分离后胰岛置胶原中培养,利用RT-PCR检测胰岛细胞特异基因的表达。结果:分离的胰岛细胞呈圆形或椭圆形,双硫腙染色呈猩红色,在胶原中培养能保持形态完整,表达胰岛细胞特异性基因PDX-1和insulin。结论:本胰岛分离技术已趋于完善,获得的胰岛纯度高,培养效果好。
- 徐霞卢瑾刘美莲谢平谷亚鹏宋惠萍
- 关键词：胰岛细胞培养
- 去卵巢和雌激素替代治疗对心肌细胞基因表达谱的影响被引量：4
- 2006年
- 目的:本实验通过高通量的cDNA微阵列技术,研究去卵巢和雌激素替代治疗对心肌细胞基因表达谱的影响,寻找雌激素的靶基因。方法:用1400个基因构建的cDNA微阵列检测假手术组(Ⅰ)、去卵巢组(Ⅱ,去势组)和雌激素替代治疗组(Ⅲ,替代组)3组SD雌鼠心肌组织的基因表达差异,随机选2个基因用半定量RT-PCR验证检测结果。结果:假手术组和去势组共检出心肌差异表达的基因177个,其中去卵巢导致上调的基因91个,下调的基因86个;去势组和替代组共检出心肌差异表达的基因164个,其中雌激素替代治疗后导致上调的基因113个,下调的基因54个。Ⅰ/Ⅱ和Ⅲ/Ⅱ比较,相同的差异表达基因54个,雌激素明显影响心肌膜通道和载体(18个)、细胞受体(9个)、信号转导相关基因(7个)和细胞代谢(6个)的mRNA水平。而大部分基因(45个)是在去势组表达下调,在雌激素替代组表达上调。RT-PCR实验证实了cDNA微阵列结果。结论:长期雌激素替代治疗明显影响心肌细胞膜通道和载体、信号转导、细胞受体和细胞代谢等相关基因的表达。长期雌激素替代治疗可通过增加Na+,K+-ATPase和Na+/H+交换蛋白的基因表达,稳定心肌细胞内Na+和K+的浓度。雌激素还可抑制多巴胺受体基因的表达,预防心肌肥大、充血性心衰等心脏疾病的发生。
- 刘美莲徐霞谢平卢瑾陈淑华曾卫民宋惠萍
- 关键词：雌激素类寡核苷酸序列分析
- 胰岛素信号蛋白与胰岛素抵抗被引量：16
- 2001年
- 胰岛素通过胰岛素受体、胰岛素受体底物及磷脂酰肌醇 3 激酶等一系列信号中介传递胰岛素信息来调节细胞生长、增殖以及物质代谢。 2型糖尿病病人主要表现胰岛素抵抗而引起的高糖血症 ,胰岛素信号在胰岛素敏感组织中的传递受阻或减弱是导致胰岛素抵抗的主要因素 ,而上述三种胰岛素信号分子的改变尤为重要。
- 谢平宋惠萍
- 关键词：胰岛素抵抗胰岛素受体
- 胰岛素受体酪氨酸蛋白激酶对醛糖还原酶的磷酸化作用
- 1997年
- 从人胎盘纯化了醛糖还原酶和部分纯化了胰岛素受体。通过磷酸化实验证明：醛糖还原酶是胰岛素受体酪氨酸蛋白激酶的底物，经分析揭示：胰岛素受体酪氨酸蛋白激酶可将醛糖还原酶的第40位和第49位的酪氨酸残基磷酸化。在试管内，未磷酸化的醛糖还原酶和磷酸化的醛糖还原酶的动力学常数无差异，而细胞内的情况有待于进一步研究。本实验提示：醛糖还原酶除具酶活性外，可能还有在细胞内传递胰岛素信息的功能。
- 宋惠萍韩秀云
- 关键词：醛糖还原酶胰岛素受体磷酸化糖尿病
