姚婧
- 作品数:4 被引量:2H指数:1
- 供职机构:西北农林科技大学动物科技学院更多>>
- 发文基金:公益性行业(农业)科研专项中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生更多>>
- 奶山羊IL-1β在Sf9细胞中的表达
- 2011年
- 将CaIL-1β基因整个编码区cDNA亚克隆到杆状病毒载体pFastBac-HTb中,构建转移载体pFastBac-HTb-CaIL-1β,转座到宿主菌DH10 Bac中,在Kan+/Gm+/Tet+/X-gal/IPTG LB平板上筛选白色菌落,碱裂解法提取质粒即为穿梭载体Bacmid-CaIL-1β,转染Sf9细胞后获得有感染力的重组病毒re-Bac-CaIL-1β。重组病毒在Sf9细胞上来连续传代后,经Western blot检测,CaIL-1β主要表达于感染的Sf9细胞培养上清中。
- 姚婧赵莉娟敬晓棋赵光辉陈德坤
- 关键词:奶山羊IL-1ΒSF9细胞
- 卵清蛋白免疫耐受因子转移免疫耐受活性的研究被引量:1
- 2009年
- 目的:探讨卵清蛋白免疫耐受因子(OVA immune tolerance factors,OVAITFs)转移抗原特异性外周免疫耐受的特性。方法:分别从OVA耐受鼠或空白小鼠的脾淋巴细胞裂解液中分离分子量小于3kD的组分,即为OVA ITFs或OVA ITFs control。试验BALB/c小鼠分成5组,A、B、C、D组经尾静脉分别注射OVA ITFs、OVA ITFs control、OVA耐受鼠脾淋巴细胞或PBS给正常BALB/c小鼠,E组不做任何处理。流式细胞术检测转移前后受体鼠脾脏CD4+CD25+ T细胞亚群的比例变化,MTT法检测受体鼠OVA特异性T淋巴细胞的增殖情况,夹心ELISA法测定培养上清中IL-10、TGF-β1的水平。结果:转移OVA ITFs或OVA耐受鼠脾淋巴细胞后,受体鼠脾脏CD4+CD25+ T细胞亚群在总CD4+ T细胞的比例分别为(15.32±1.03)%和(15.35±0.62)%,与转移前(9.97±1.38)%相比显著上升(P<0.05);OVA特异性淋巴细胞增殖刺激指数(Stimulation Index,SI)分别为0.699±0.05和0.704±0.03,与PBS对照组(1.356±0.07)相比明显受到抑制(P<0.05);培养上清中TGF-β1的分泌量分别为129.15±6.14和106.71±2.89pg/ml,显著高于PBS对照组(52.82±3.68pg/ml,P<0.01),IL-10分泌量未检出。转移OVA ITFs control后,受体小鼠的CD4+CD25+ T细胞比例、OVA特异性淋巴细胞增殖及TGF-β1、IL-10分泌量均无显著变化。结论:OVA ITFs具有将OVA特异性免疫耐受传递给正常受体小鼠的特性。
- 马晓红武春燕姚婧赵丽娟陈德坤
- 关键词:卵清蛋白CD4+CD25+T细胞
- 奶山羊IL-1β基因的克隆表达
- 乳房炎可直接影响产奶量和乳品质量,造成严重的经济损失,是对奶山羊危害最大的常见病之一。研究发现Th17细胞在清除黏膜感染中发挥着重要作用,我们推测Th17细胞可能在乳房炎发生中也发挥着重要作用。与Th1细胞和Th2细胞相...
- 姚婧
- 关键词:奶山羊IL-1Β克隆原核表达SF9细胞
- 文献传递
- 奶山羊IL-22的原核表达
- 2010年
- 根据signal IP3.0信号肽分析软件分析结果,设计IL-22不含信号肽表达引物,PCR扩增获得奶山羊IL-22基因,连接表达载体pET-32a,重组质粒转化BL21感受态细胞。对阳性克隆进行诱导表达,对诱导温度、IPTG诱导浓度、诱导时间等条件进行优化,在最佳条件大量诱导蛋白表达。结果显示,在37℃、IPTG浓度为0.1mmol/L、诱导5 h可获得IL-22最大表达量,目的蛋白以包涵体形式存在,包涵体经洗涤、变性和复性,纯度可达90%以上。本研究为进一步探讨IL-22在奶山羊乳腺免疫中的作用奠定了基础。
- 赵莉娟姚婧韩炎森牟珊赵燕清陈德坤
- 关键词:奶山羊IL-22原核表达