姚姿婷
- 作品数:19 被引量:3H指数:1
- 供职机构:广西大学更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划广西壮族自治区自然科学基金教育部高等学校骨干教师资助计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 与板栗疫病菌的DNA打靶效率相关的蛋白及其编码基因与应用
- 本发明公开了一种与板栗疫病菌的DNA打靶效率相关蛋白及其编码基因与应用。该蛋白,是如下(a)或(b)的蛋白质:(a)由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质;(b)将序列表中序列1的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基...
- 陈保善蓝秀万姚姿婷商巾杰林海燕周燕范云燕何小丹陈敏玫陈美佳
- 文献传递
- 基于原生质体转化的甘蔗梢腐病菌YN41基因敲除体系的构建
- 2023年
- 基因敲除技术日益成为基因功能研究的重要手段,为了深入研究甘蔗梢腐病菌致病基因的功能,构建了梢腐病菌YN41菌株的基因敲除体系。本研究构建了基于线性DNA的同源重组基因敲除技术,融合PCR构建敲除盒即带有潮霉素基因标记的线性DNA融合片段,配置0.05 g·mL^(-1)溶壁酶+0.01 g·mL^(-1)崩溃酶的复合酶液28℃酶解3 h获得了高产量的原生质体,利用聚乙二醇(PEG)介导的原生质体的转化,PCR鉴定技术和酶切鉴定技术对转化子进行鉴定,荧光定量PCR分析和Southern Blot方法进一步对基因缺失突变体进行验证,生物学表型(菌落形态、生长速率、产孢量、生物量和致病力)验证了PK基因敲除体系的成功构建。28℃酶解3 h获得了2×10^(7)个·mL^(-1)原生质体;对编码丙酮酸激酶的PK基因进行了基因敲除验证,获得了纯合敲除突变体;荧光定量PCR检测转录水平无表达;Southern Blot结果显示使用PK基因探针杂交,基因缺失突变体无条带,野生型杂交到目的条带;生物学表型验证了PK基因敲除突变体对比野生型菌丝色素加深,生长速率先慢后快、产孢量增加,致病力增强,成功构建了PK基因敲除突变体。甘蔗梢腐病菌YN41基因敲除体系的成功构建,为甘蔗梢腐病菌致病基因的功能研究提供了技术平台。
- 王爽潘开元姚姿婷姚伟张木清
- 关键词:基因敲除原生质体制备
- 大规模板栗疫病菌cDNA文库的特征和冗余序列的排除被引量:1
- 2005年
- 低毒病毒/板栗疫病菌是一个研究病毒宿主相互作用的优良的实验系统。为了更好的了解病毒与宿主相互作用的机制,我们建立了一个野生型无病毒板栗疫病菌菌株EP 155和受低毒病毒感染的菌株EP 713的cDNA混和文库,以进行表达序列标签(EST)测定。对543个克隆的外源片段的分析表明,该文库克隆中含外源片段的比例为89.8%;通过小规模测序,发现空质粒与小片段克隆占测序总数的10.1%;表达丰度最高的4个克隆出现次数的总和占测序总数的9.6%。通过设计引物进行PCR和原位杂交,对cDNA文库2万多个克隆进行了筛选,共筛除了占总数19.7%的空质粒与小克隆和5.5%的高丰度克隆,为高效率的大规模EST测序准备了条件。
- 吴晓松商巾杰范云燕蒋莹姚姿婷陈辉陈保善
- 关键词:CDNA文库原位杂交
- 板栗疫病菌产孢基因Pro1及其应用
- 本发明公开了一种板栗疫病菌产孢基因Pro1及其应用。该基因含有4个外显子和3个内含子,DNA全长1641bp,cDNA全长1416bp,编码471个氨基酸,表达的蛋白质如SEQ.ID.No.3所示,该蛋白可用于调控板栗疫...
- 陈保善姚姿婷邹承武周辉王金子卢立丹
- 文献传递
- 板栗疫病菌致病力基因P5Cdh及其应用
- 本发明公开了一种影响真菌致病力和产孢的板栗疫病菌致病力基因P5Cdh及其应用。该基因含有3个外显子和2个内含子,DNA全长2270bp,cDNA全长1782bp,编码594个氨基酸,表达的蛋白质如SEQ.ID.No.3所...
- 陈保善姚姿婷邹承武周辉王金子卢立丹李洋
- 文献传递
- 板栗疫病菌高效同源重组系统的构建
- 低毒病毒/板栗疫病菌系统是一个具有独特优点的、崭新的研究病毒与宿主相互作用的模型系统。以同源重组为基础的遗传操作技术是该系统中研究低毒病毒的宿主因子基因与靶基因的重要手段。为了构建一个高效的基于同源重组的板栗疫病菌遗传操...
- 蓝秀万姚姿婷陈保善
- 关键词:板栗疫病菌
- 文献传递
- 同时检测5种甘蔗病毒的多重RT-PCR方法及其引物和试剂盒
- 本发明公开了同时检测5种甘蔗病毒的多重RT‑PCR检测引物组,包括六对PCR引物,分别针对SCBV、SSV、SCMV、ScYLV、SrMV 5种甘蔗病毒和一个甘蔗内参基因GAPDH,它们分别具有序列表SEQ.ID.NO....
- 陈保善邹承武郭枫姚姿婷
- 文献传递
- 大规模板栗疫病菌突变体库的构建
- 用根癌农杆菌介导方法,构建了一个含有19973个转化株的板栗疫病菌(Cryphonectriaparasitica)插入突变体库。以表型分类,主要有5种表型:1)完全丧失气生及基生菌丝(626株);2)产生大量分生孢子(...
- 姚姿婷蓝秀万周燕周辉商巾杰陈保善
- 文献传递
- 与板栗疫病菌的DNA打靶效率相关的蛋白及其编码基因与应用
- 本发明公开了一种与板栗疫病菌的DNA打靶效率相关蛋白及其编码基因与应用。该蛋白,是如下(a)或(b)的蛋白质:(a)由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质;(b)将序列表中序列1的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基...
- 陈保善蓝秀万姚姿婷商巾杰林海燕周燕范云燕何小丹陈敏玫陈美佳
- 文献传递
- 板栗疫病菌产孢基因Pro2及其应用
- 本发明公开了一种板栗疫病菌产孢基因Pro2及其应用。该基因仅含有1个外显子,DNA全长1359bp,cDNA全长1359bp,编码452个氨基酸,表达的蛋白质如SEQ.ID.No.3所示,该蛋白可用于调控板栗疫病菌分生孢...
- 陈保善姚姿婷邹承武周辉王金子卢立丹
- 文献传递