周志华
- 作品数：5 被引量：39H指数：4
- 供职机构：第三军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人恶性胶质瘤细胞株U251三种克隆的分化特性和胶质瘤干细胞的初步鉴定被引量：9
- 2008年
- 目的观测U251细胞的克隆在形态和分化上的差异，鉴定含胶质瘤干细胞的克隆。方法克隆形成实验观察U251细胞克隆的形态并分类，免疫细胞化学染色观测不同克隆GFAP和nestin的表达差异。分离低分化克隆，检测其自我更新能力、多向分化潜能及CD133表达情况。结果U251细胞可形成紧密型、中间型和松散型三种克隆类型。紧密型克隆分化程度最低，此克隆在无血清培养基内形成神经干细胞样细胞球，具有自我更新能力、多向分化潜能，并表达CD133。结论U251细胞的克隆在形态和分化程度上存在差异，紧密型克隆可能富含胶质瘤干细胞。
- 周志华易良卞修武余时沧
- 关键词：克隆细胞培养技术
- 胶质瘤干细胞研究进展被引量：4
- 2007年
- 随着对肿瘤干细胞（tumor stem cells）理论的深入认识和分离、培养肿瘤干细胞实验技术的不断进步，胶质瘤内肿瘤干细胞的存在已经有较多的证据和研究。这方面的研究不仅有助于深化人们对胶质瘤发生、复发和侵袭机制的认识，更重要的是可能改变以往胶质瘤的治疗策略，影响十分深远。新近，有学者将来自胶质瘤的肿瘤干细胞或具有干细胞特性的胶质瘤细胞称为“胶质瘤干细胞（glioma stem cells,GSC）”，较好地反映了这类细胞的特性。
- 周志华易良卞修武
- 关键词：胶质瘤干细胞肿瘤干细胞胶质瘤发生胶质瘤细胞CELLS细胞特性
- 应用长春新碱分离与鉴定U87细胞系中的胶质瘤干细胞被引量：10
- 2007年
- 背景与目的:研究表明,肿瘤干细胞具有化疗抵抗性。本研究拟利用肿瘤干细胞对化疗药物耐受的特性,在培养基中添加长春新碱的方法从人胶质瘤细胞系U87中分离鉴定肿瘤干细胞。方法:U87细胞于含血清培养基中贴壁后,换用含有5ng/ml长春新碱的神经干细胞培养基培养,获得第一代肿瘤细胞球后,将单细胞接种于神经干细胞培养基中,获得第二代肿瘤细胞球。免疫荧光检测巢蛋白(nestin)、胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)、β-微管蛋白Ⅲ(β-tubulin Ⅲ)、髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)在第二代肿瘤细胞球及其分化细胞中的表达。结果:成功地获得了第一代肿瘤细胞球以及来源于单细胞的第二代肿瘤细胞球;细胞间紧密相贴,表面较光滑;神经干细胞标志物nestin在第二代肿瘤细胞球中呈阳性表达;第二代肿瘤细胞球分化细胞中可检测到nestin、GFAP、β-tubulin Ⅲ、MBP的表达。结论:U87细胞系中存在具有自我更新及多向分化能力的胶质瘤干细胞,采用神经干细胞培养基中添加长春新碱的方法能简单有效地从胶质瘤细胞系中分离培养出胶质瘤干细胞。
- 余时沧易良周志华姚小红平轶芳卞修武
- 关键词：胶质瘤肿瘤干细胞长春新碱细胞分离细胞鉴定
- 人胶质瘤干细胞趋化因子受体CXCR4活化促进血管生成的作用被引量：17
- 2007年
- 目的从人恶性胶质瘤细胞系 U87中分离、培养和鉴定胶质瘤干细胞,观测其 CXCR4表达情况及其活化后促血管生成因子分泌的变化。方法通过流式细胞术检测 U87细胞中 CD133阳性细胞的比例。使用 CD133免疫磁珠分离试剂盒通过磁性细胞分选系统分离胶质瘤干细胞。采用间接免疫荧光标记、激光共聚焦扫描显微术观测胶质瘤干细胞中神经巢蛋白(nestin)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、趋化因子受体 CXCR4的表达;以 CXCR4配体刺激通过钙流试验检测受体功能,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测培养上清中血管内皮生长因子(VEGF)和白细胞介素-8(IL-8)的含量。建立裸鼠皮下移植瘤模型,观察胶质瘤干细胞成瘤情况及瘤体内 VEGF 表达情况。结果U87细胞系中 CD133阳性细胞的比例为0.5%,这些细胞具有干细胞增殖和生长特性;它们表达CXCR4,用其相应配体激活后导致胞内钙流增加、分泌 VEGF 和 IL-8增多。与 CD133阴性细胞相比,CD133阳性细胞在体外分泌 VEGF、IL-8多,在体内成瘤率高,形成的移植瘤生长迅速,表达更多VEGF。结论人恶性胶质细胞瘤细胞系 U87中含有极少量胶质瘤干细胞,表达功能性 CXCR4、分泌更多促血管生成因子,提示这些干细胞也直接参与胶质瘤血管生成。
- 平轶芳姚小红卞修武陈剑鸿章容易良周志华
- 关键词：神经胶质瘤肿瘤干细胞
- 基于克隆异质性筛选和鉴定人胶质瘤干细胞及其机制的初步研究
- 肿瘤具有明显的异质性。肿瘤实质中，不同肿瘤细胞群体在增殖能力、分化程度、侵袭能力以及治疗抵抗性等多方面存在差异。在体外培养条件下，肿瘤细胞的克隆形成能力也存在异质性，这种异质性在体内可能表现为不同肿瘤细胞在成瘤能力上的差...
- 周志华
- 关键词：肿瘤异质性细胞克隆干细胞神经胶质瘤
- 文献传递
