吉小霞
- 作品数:2 被引量:5H指数:1
- 供职机构:南华大学医学院肿瘤研究所更多>>
- 发文基金:湖南省教育厅科研基金湖南省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 二烯丙基二硫对人白血病HL-60细胞凋亡启动过程的影响被引量:5
- 2009年
- 背景与目的:二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)作为一种抗肿瘤物质日益受到关注。本研究在建立DADS启动HL-60细胞凋亡模型的基础上,研究DADS启动人白血病HL-60细胞凋亡的相关蛋白。方法:提取未处理HL-60细胞和3.6mg/LDADS处理2d的HL-60细胞的总蛋白,双向电泳分离细胞总蛋白质,绘制图谱,PDQuest软件分析,切割差异蛋白质,进行质谱分析、生物信息学分析,Western blot以及RT-PCR验证部分差异蛋白。结果:对照组和处理组蛋白质表达量相差2倍以上的点有29个,其中22个上调,7个下调。质谱分析和数据库搜索鉴定了9个蛋白质点,其中7个蛋白质点有意义,这些蛋白功能分别与信号转导、基因转录及调控、细胞骨架、细胞新陈代谢等有关。Western blot结果显示DADS处理后Rac2(ras-related C3 botulinum toxin substrate2)蛋白表达明显上调,RT-PCR显示DADS处理后Rac2表达增强。结论:Rac2等蛋白参与了DADS诱导的HL-60细胞凋亡,但其具体机制还有待于进一步研究。
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- 关键词:DADS白血病HL-60细胞蛋白质组学
- DADS诱导人白血病细胞HL-60凋亡的流式细胞术检测
- 2009年
- 目的运用流式细胞术检测二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)诱导人白血病HL-60细胞凋亡的作用。方法实验分对照组和DADS处理组,进行体外细胞培养,进行细胞形态学观察,应用流式细胞术检测凋亡率、早期凋亡细胞以及caspase-3活性。结果DADS诱导前后,HL-60细胞形态学发生明显改变,PI单染法检测结果:随着不同浓度DADS作用HL-60细胞24 h,HL-60细胞出现明显亚二倍峰,细胞周期也发生了相应的改变;Annexin V/PI双染法检测结果:10 mg/L DADS作用HL-60细胞4、8、12和24 h后,早期凋亡细胞显著增加,具有明显的时间依赖性(P<0.05);间接免疫荧光流式细胞术结果显示在DADS诱导HL-60细胞凋亡过程中有caspase-3的活化,且与作用时间呈依赖关系。结论流式细胞术检测结果表明,DADS能有效诱导HL-60细胞凋亡。
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- 关键词:流式细胞术人白血病细胞DADS凋亡