刘健
- 作品数：19 被引量：42H指数：3
- 供职机构：华南农业大学更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生政治法律社会学更多>>
- 为社区建言,创和谐社会——社区老年人小组工作被引量：1
- 2009年
- 随着社区开始成为人们主要的活动场所和生活空间，老年人对社区福利和社区照顾的需求在不断增加，对社区的依附性也越来越强。且老年人群体在社会建设中发挥的力量越来越大，作为一支独立的社会力量，在构建和谐社会的今天，如何发挥这一部分人群的力量成为建设和谐社区不可忽略的部分。带着这样的出发点，我们来到广州某社区，以社区内的老年人为依托，通过开展小组活动，增强老年人的社会功能，以他们的经验与感受为社区的发展建言，以体现老年人群体在社区建设中特有的价值。
- 刘健
- 关键词：社区照顾老年人社会力量社区福利社会建设
- 牛分枝杆菌ESAT-6-CFP-10融合基因重组腺病毒载体的构建及表达被引量：3
- 2009年
- 目的构建表达牛分枝杆菌的ESAT-6-CFP-10融合基因的重组腺病毒载体,为研制能有效防治牛结核病的重组腺病毒活载体疫苗打下基础。方法以牛分枝杆菌ValleeⅢ株基因组DNA为模板,应用PCR扩增获得ESAT-6和CFP-10两个目的基因片段,采用重叠延伸剪接技术(SOE)将ESAT-6和CFP-10基因通过(G1y4Ser)3接头连接,得到融合基因。将融合基因T/A克隆后,亚克隆至腺病毒转移载体pShuttle-CMV中,构建重组穿梭质粒pShuttle-CMV-ESAT-6-CFP-10,限制性内切酶消化、菌液PCR、序列分析验证无误后,PmeⅠ酶切,转化含有腺病毒骨架质粒pAdeasy-1的BJ5183-AD-1感受态细胞,经同源重组获得复制缺陷型重组腺病毒载体pAd-CMV-ESAT-6-CFP-10。PacI酶切线性化的重组质粒pAd-CMV-ES-AT-6-CFP-10转染AD-293细胞进行病毒包装和扩增。PCR、Western blot检测包装病毒的融合基因及其表达情况。结果成功构建携带牛分枝杆菌的ESAT-6-CFP-10融合基因的重组腺病毒载体,包装病毒用PCR、Western blot检测到包装病毒的融合基因及其表达。结论本研究成功地构建携带牛分枝杆菌的ESAT-6-CFP-10融合基因的重组腺病毒,为下一步在动物体内进行免疫效果研究打下基础。
- 房红莹鲁俊鹏曾小娜王雷陈钜豪刘健罗满林
- 关键词：牛分枝杆菌ESAT-6CFP-10重组腺病毒载体
- 胸膜肺炎放线杆菌APXⅣ部分基因片段的表达及纯化被引量：1
- 2009年
- 参照GenBank中已发表的ApxⅣ基因序列,以自行分离的AppDNA为模板,利用PCR方法扩增出ApxⅣ3’端,大小为552bp的保守基因序列。将PCR产物克隆到pMD18-T Simple Vector中,获得重组质粒pMD-ApxⅣ,对其重组质粒pMD-ApxⅣ进行BamHI、HindIII双酶切,并将酶切产物克隆到原核表达载体pET-32a(+)中,构建了重组表达质粒pET-ApxⅣ。将表达质粒转化至大肠杆菌BL21中,用IPTG诱导表达,通过SDS-PAGE和Western blot分析,结果表明pET-ApxⅣ在BL21中成功表达,并能被App阳性血清所识别,具有良好的免疫原性。表达蛋白的分子质量约为39.5KDa。利用HiTrapFFcrude columns将表达的蛋白进行了纯化。
- 刘珊珊陈征刘健王新波罗满林
- 关键词：APP克隆纯化
- 副猪嗜血杆菌环介导等温扩增检测方法的建立被引量：15
- 2010年
- 本研究旨在建立检测副猪嗜血杆菌(Hps)的新方法。根据GenBank上发表的不同血清型Hps的16S rRNA序列,找出高度保守区域,再针对该区域设计了4条特异性引物,建立了Hps环介导等温扩增法(LAMP)。试验结果表明,LAMP方法在恒温(63℃)条件下特异性强,比PCR方法敏感100倍,鉴于目前副猪嗜血杆菌分离培养和鉴定的复杂性,LAMP操作简单、成本低,整个扩增反应在1 h内即可完成,为检测Hps提供了一个快速简便的分子生物学方法。
- 朱杰仪谭实勇曾小娜刘健刘中勇朱道中罗满林
- 关键词：副猪嗜血杆菌RRNA环介导等温扩增技术
- 猪α干扰素基因经密码子改造在毕赤酵母菌中的高效分泌表达被引量：8
- 2011年
- 根据毕赤酵母Pichia pastoris表达系统对于密码子的偏嗜性,将去除信号肽的猪α干扰素(PoIFN-α)基因重新设计改造并合成一段新的核苷酸序列,置于毕赤酵母菌α因子分泌信号的DNA序列后,构建成pPICZαC-PoIFN-α分泌型重组表达载体,电转化进入野生型毕赤酵母菌X-33中,经Zeoc inTM抗性筛选后获得大量多拷贝重组子,SDS-PAGE和W estern-b lot分析结果表明,所获得的重组子能够分泌表达出相对分子质量约为19 000的PoIFN-α特异蛋白,其有效蛋白表达量较高达54.105 mg/L.经Vero-VSV系统测定,PoIFN-α效价达到5.87×107U/L.试验将PoIFN-α成熟肽全基因密码子进行改造,并实现了其在毕赤酵母菌表达系统中的高效分泌表达.
- 刘健陈瑞爱刘珊珊朱杰仪唐明森罗满林
- 关键词：Α干扰素毕赤酵母分泌表达
- 鉴别猪圆环病毒1型和2型的二重PCR方法的建立被引量：1
- 2009年
- 根据GenBank上发表的PCV-1和PCV-2序列,设计2对引物分别扩增PCV-1和PCV-2的独特区域,长度为382 bp和222 bp。将PCR产物分别克隆至pMD-18T vector,经转化、PCR鉴定和序列测定,构建了PCV-1和PCV-2的阳性质粒,并等量混合作为二重PCR阳性模板。将2对PCR引物混合后,进行退火温度优化,敏感性和特异性试验,并用于临床检测。结果表明,该二重PCR方法可以特异性地鉴别PCV-1和PCV-2,最低检出量分别为0.1 ng和0.01 ng,敏感性较高。应用该方法可对临床样品进行准确、快速地诊断,为猪圆环病毒的临床诊断与流行病学调查等研究奠定了基础。
- 陈钜豪陈文玉甘志鹏刘健赵海参曾小娜罗满林
- 关键词：猪圆环病毒流行病学调查
- 猪α和γ干扰素的基因改造及表达产物的活性研究
- 干扰素(Interferon，IFN)是一类动物机体产生的多功能分泌蛋白，具有抗病毒、抗肿瘤、免疫调节等生物学功能。α干扰素(Interferon alpha，IFN-α)主要由单核一吞噬细胞产生，是天然免疫和获得性免疫...
- 刘健
- 关键词：猪Α干扰素猪Γ干扰素分泌表达免疫调节功能
- 一种木质素-壳聚糖多孔支架材料的制备方法
- 本发明属于生物复合功能材料、药物载体材料技术领域，具体涉及一种木质素‑壳聚糖多孔支架材料的制备方法，将包括木质素纳米粒子悬浮液和壳聚糖溶液的水相混合均匀，将包括聚酯有机溶液的油相混合均匀，然后将水相和油相进行混合乳化制备...
- 胡洋李耀宗杨卓鸿周武艺刘健巢妍霞林佳缅申瑶瑶
- 文献传递
- 充分发挥学生的主体作用，迎接新世纪的挑战
- 近几年，本校和全国其他高校一样，面临着扩招的压力。教学对象是多层次，任务也相当繁重，尤其是本科生教学，学校十分重视。五年一度的本科教学评估工作，要求以评促建，将许多工作规范化，制度化，而不是为了迎评在评审专家到校前自行加...
- 罗满林苏丹萍刘健陈钜豪张欣
- 关键词：本科教育教学评估
- 文献传递
- 副猪嗜血杆菌毒力基因的研究进展
- 副猪嗜血杆菌病是近年来严重危害我国养猪业发展的细菌性传染病,我们对其毒力基因了解却很少。本文主要对副猪嗜血杆菌的毒力基因的研究进行综述,相信随着科学研究的深入,副猪嗜血杆菌的毒力基因一定会确定和清楚。
- 朱杰仪刘健罗满林
- 关键词：副猪嗜血杆菌毒力基因养猪场致病机理
- 文献传递
