冯鉴强
- 作品数：163 被引量：662H指数：13
- 供职机构：中山大学中山医学院生理学教研室更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目广东省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学哲学宗教更多>>
- 非对称性二甲基精氨酸保护PC12细胞拮抗谷氨酸兴奋性毒性的损伤作用被引量：8
- 2009年
- 目的:探讨一氧化氮合酶(NOS)抑制剂-非对称性二甲基精氨酸(ADMA)对谷氨酸(Glu)兴奋性毒性损伤PC12细胞的影响及其机制。方法:用不同浓度的谷氨酸处理PC12细胞,建立谷氨酸兴奋性神经毒性损伤细胞的实验模型;应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞存活率;乳酸脱氢酶(LDH)释放试验评价细胞的损伤程度;双氢罗丹明123(DHR)染色后流式细胞仪(FCM)检测细胞内活性氧(ROS)水平;应用试剂盒及分光光度计测定NOS活性和NO水平。结果:谷氨酸(1-6mmol/L)处理PC12细胞24h,可呈剂量依赖性地降低PC12细胞的存活率;在谷氨酸作用PC12细胞前30min给予ADMA,可明显地抑制谷氨酸引起的细胞存活率降低及LDH释放增加,减少谷氨酸引起的细胞内ROS堆积,抑制谷氨酸过度激活NOS和增加NO的生成。结论:ADMA能显著地减弱谷氨酸对PC12细胞的兴奋性毒性损伤作用;其作用机制可能与抑制NOS活性,减少NO生成,进而减轻细胞内ROS的堆积有关。
- 唐小卿赵静杨春涛申新田范黎黎郭瑞鲜杨战利陈培熹冯鉴强
- 关键词：非对称性二甲基精氨酸谷氨酸一氧化氮合酶兴奋性毒性PC12细胞
- 过氧化氢预处理对抗氧化应激诱导的PC12细胞凋亡(英文)被引量：8
- 2005年
- 氧化应激可明显地诱导细胞凋亡。本研究旨在探讨H2O2。预处理能否对H2O2诱导的PC12细胞凋亡产生保护作用及ATP 敏感性K+(ATP-sensitive potassium,KATP)通道在其中的作用。采用PI染色流式细胞仪(flow cytometry,FCM)检测PC12细胞凋亡。结果表明,经10 μmol/L H2O2预处理90 min的PC12细胞,分别在20、30、50和100 μmol/L H2O2作用24 h后,其细胞凋亡率明显下降,与未经H2O2预处理的PC12细胞相比,差异极显著(P<0.01),表明H2O2预处理对H2O2诱导PC12细胞凋亡具有保护作用。用10μmol/L的KATP通道激动剂pinacidil(Pin)可显著减少30和50μmol/L H2O2诱导的PC12细胞凋亡,10 μmol/L的KATP通道拮抗剂glybenclamide(Gly)则可显著地抑制甚至取消KATP通道激动剂Pin对H2O2诱导PC12细胞凋亡的保护作用,但并不影响H2O2预处理对H2O2诱导PC12细胞凋亡的保护作用;然而,当联合应用H2O2预处理与Pin时,对PC12 细胞凋亡的保护作用明显大于各自的抗凋亡作用。提示KATP通道开放不仅对H2O2诱导PC12细胞凋亡具有保护作用,而且与H2O2预处理一起产生抗PC12细胞凋亡的协同作用,但KATP通道开放可能不参与H2O2预处理的适应性保护作用。
- 唐小卿陈静唐二虎冯鉴强陈培熹
- 关键词：H2O2PC12细胞凋亡
- 氧化应激通过抑制胱硫醚-γ-裂解酶介导阿霉素的心肌毒性被引量：7
- 2011年
- 目的探讨氧化应激是否通过抑制胱硫醚-γ-裂解酶的表达及活性介导阿霉素的心肌毒性。方法应用阿霉素处理大鼠胚胎H9c2心肌细胞以建立阿霉素心肌毒性的细胞模型。在阿霉素处理前60 min用活性氧清除剂N-乙酰半胱氨酸预处理H9c2心肌细胞以观察氧化应激在阿霉素心肌细胞损伤中的作用。应用CCK-8检测心肌细胞存活率;双氯荧光素酶染色及荧光显微镜照相术检测细胞内活性氧水平;Western blot检测胱硫醚-γ-裂解酶的表达;亚甲基蓝显色法检测胱硫醚-γ-裂解酶活性。结果 5μmol/L阿霉素处理H9c2细胞24 h引起明显的心肌毒性,使细胞存活率降低。阿霉素在促进细胞内活性氧生成的同时,还抑制胱硫醚-γ-裂解酶的表达及活性。N-乙酰半胱氨酸不仅抑制阿霉素对活性氧生成的促进作用,还减弱阿霉素的心肌毒性,并能阻断阿霉素对H9c2心肌细胞胱硫醚-γ-裂解酶表达及活性的抑制作用。结论活性氧可通过抑制心肌细胞胱硫醚-γ-裂解酶的表达及活性介导阿霉素的心肌毒性。
- 郑东诞王秀玉杨春涛莫利求兰爱平胡芬郭润民沈宁陈培熹冯鉴强
- 关键词：氧化应激活性氧胱硫醚-Γ-裂解酶阿霉素心肌毒性
- 胞外信号调节激酶1/2通路在阿霉素引起的心肌细胞损伤中的作用被引量：2
- 2012年
- 目的探讨胞外信号调节激酶1/2(ERK 1/2)通路在阿霉素(doxorubicin,DOX)引起的心肌细胞损伤中的作用。方法应用DOX处理H9c2心肌细胞建立细胞损伤的体外模型,在DOX处理前应用ERK 1/2抑制剂PD98059抑制ERK 1/2的活化;检测细胞存活率、ERK 1/2的活化、胞内活性氧(ROS)水平、线粒体膜电位(MMP)以及胱硫醚γ-裂解酶(CSE,为内源性硫化氢的合成酶)的表达。结果 5μmol·L-1DOX处理H9c2心肌细胞1～6 h,呈时间依赖性地促进ERK1/2的活化;5μmol·L-1DOX对心肌细胞具有明显的损伤作用,表现为细胞存活率下降、ROS水平升高、MMP丢失及CSE表达降低;在DOX处理H9c2心肌细胞前30min,应用ERK1/2抑制剂10μmol·L-1PD-98059预处理能明显拮抗DOX对心肌细胞的损伤作用,使ROS水平降低,细胞存活率MMP和CSE表达水平均升高。结论 ERK1/2通路参与DOX对H9c2心肌细胞的损伤作用。
- 张莉莉赖东平王秀玉郑东诞郭润民沈宁陈培熹冯鉴强
- 关键词：阿霉素心肌毒性H9C2心肌细胞线粒体膜电位
- 热休克蛋白参与PI3K/Akt介导H_2O_2预处理的抗凋亡作用被引量：6
- 2011年
- 目的:探讨热休克蛋白(HSP)是否参与PI3K/Akt信号通路介导的H2O2预处理的抗细胞凋亡作用。方法:利用PC12细胞建立H2O2预处理对抗高浓度H2O2诱导细胞凋亡的实验模型,分组如下:(1)空白对照组;(2)损伤组;(3)预处理+损伤组;(4)LY294002+预处理+损伤组;(5)LY294002组;(6)quercetin+预处理+损伤组;(7)17-AAG+预处理+损伤组;(8)溶剂对照组。应用Hoechst 33258染色观察细胞凋亡形态,碘化丙啶(PI)染色流式细胞术检测细胞凋亡率,比色法测定caspase-3的活性,免疫印迹法(Western blotting)测定HSP的表达水平。结果:100μmol/L H2O2预处理PC12细胞90 min可显著地抑制300μmol/L H2O2引起的细胞凋亡,使caspase-3的活性降低,同时上调HSP70和HSP90的表达。HSP70和HSP90的抑制剂quercetin和17-AAG拮抗H2O2预处理的抗细胞凋亡作用。PI3K抑制剂LY294002不仅拮抗了H2O2预处理抗细胞凋亡的作用,并且抑制H2O2预处理对HSP70和HSP90的表达上调。结论:PI3K/Akt通路、HSP70和HSP90均参与H2O2预处理诱导的细胞保护作用。并且HSP70和HSP90参与PI3K/Akt信号通路介导H2O2预处理的抗细胞凋亡作用。
- 张梅李卫郭瑞鲜罗健东冯鉴强
- 关键词：热休克蛋白质类预处理PI3K/AKT通路
- 雌激素膜快速效应对人成骨样细胞MG63 OPG mRNA快速表达水平的影响被引量：2
- 2009年
- 目的探讨17β-雌二醇(E2)膜快速效应对人成骨样细胞MG63的OPG mRNA快速表达水平影响。方法采用RT-PCR法分析经E2快速作用后的MG63细胞中OPG mRNA的表达水平。结果E2膜快速效应能诱导人成骨细胞MG63 OPG mRNA表达水平出现一个快速增高现象,其表达高峰时间为E2作用后的10 min左右,而且这一现象能被G蛋白藕联抑制苏拉明所抑制。结论而E2诱导的人成骨样细胞MG63中OPGmRNA表达水平的快速增高,可能与雌激素启动了雌激素膜受体介导的G蛋白藕联受体调节的磷脂酶C/腺苷酸环化酶通路有关。
- 武兆忠刘敏冯鉴强林伟邬恒夫王金玉李园
- 关键词：护骨素雌激素人成骨样细胞
- RNA干扰基因敲低雌激素受体β对雌激素诱导人成骨样细胞护骨素表达的影响被引量：2
- 2007年
- RNA干扰敲低人成骨样细胞株MG63中雌激素受体β后,RT-PCR法发现不同浓度的17β-雌二醇均能上调MG63细胞中的护骨素mRNA表达水平,其中以10^(-7)mol/L的作用最强。而这种作用不能被G蛋白抑制剂suramin所抑制。提示雌激素受体β可能不涉及雌激素上调MG63细胞护骨素表达的调控作用。
- 武兆忠刘敏冯鉴强林伟张昊吴长伟王金玉
- 关键词：RNA干扰护骨素雌激素受体Β人成骨样细胞
- 电刺激大脑皮层联合区对C类纤维传入诱发体感皮层电反应的影响
- 冯鉴强
- 热休克蛋白90在硫化氢对抗化学性缺氧引起的心肌细胞损伤中的作用被引量：6
- 2009年
- 目的探讨热休克蛋白90在硫化氢保护H9C2心肌细胞对抗氯化钴诱导的损伤中的作用。方法应用不同浓度的氯化钴处理H9C2心肌细胞,建立化学性缺氧诱导心肌细胞损伤的实验模型。硫氢化钠(硫化氢的供体)在氯化钴处理H9C2心肌细胞前30min加入培养基中,作为预处理。应用细胞计数试剂盒8检测细胞存活率;Hoechst33258染色荧光显微镜照相术检测凋亡心肌细胞的形态学改变;免疫印迹法检测热休克蛋白90的表达。结果在600～1000μmol/L浓度范围内,氯化钴处理H9C2心肌细胞24h,呈剂量依赖性地抑制细胞存活率。在应用不同浓度氯化钴处理H9C2心肌细胞前30min,应用400μmol/L硫氢化钠可分别显著地抑制600、800、1000μmol/L氯化钴对心肌细胞的损伤作用,使细胞存活率明显升高。400μmol/L硫氢化钠可促进H9C2心肌细胞的HSP90表达,在硫氢化钠作用6～9h时,HSP90表达最多,作用18h时表达恢复到基础水平。2μmol/L热休克蛋白90抑制剂17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素自身对H9C2心肌细胞无损伤作用,但是能加重氯化钴对心肌细胞的损伤作用,并能明显地阻断硫化氢抑制氯化钴对心肌细胞的损伤作用,使H9C2心肌细胞存活率降低,凋亡细胞数量增多。结论硫化氢能保护心肌细胞对抗氯化钴诱导的损伤作用,并能上调热休克蛋白90表达。热休克蛋白90介导硫化氢的心肌细胞保护作用。
- 李建平杨战利杨春涛廖新学黄雪王礼春陈培熹冯鉴强
- 关键词：硫化氢氯化钴细胞保护热休克蛋白
- p38丝裂原活化蛋白激酶对H2O2预处理的适应性细胞保护作用的影响
- 2009年
- 目的探讨p38丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）对H2O2预处理PC12细胞的适应性细胞保护作用的影响。方法在PC12细胞建立H2O2预处理对抗高浓度H2O2损伤的实验模型。将PC12细胞分组如下：（1）对照组，不加任何药物处理；（2）单纯H2O2处理组，细胞给予高浓度H2O2（50μmol／L）作用24h；（3）预处理组，10μmol／L H2O2作用PCI2细胞90min后撤去H2O2后继续常规培养24h；（4）预处理＋H2O2处理组，先用10μmol／L H2O2预处理，然后给予高浓度H2O2（50μmol／L）作用24h；（5）预处理＋H2O2处理＋p38抑制组，10μmol／L H2O2预处理后，在给以高浓度H2O2（50μmol／L）作用24h前20min加入10μmol／L p38特异性抑制剂SB203580；（6）p38抑制组，细胞仅用10μmol／L SB203580作用24h；（7）H2O2处理＋p38抑制组，PC12细胞在给以高浓度H2O2（50μmol／L）作用24h前20min加入10μmol／L p38特异性抑制剂SB203580。应用碘化吡啶（PI）染色，流式细胞术测定细胞凋亡率，免疫印迹法测定p38磷酸化水平并进行各组比较。结果单纯H2O2处理组细胞凋亡率较对照组明显升高[（48．33±7．41）％比（3．26±0．31）％，P〈0．01]。SB203580能显著抑制50μmol／L H2O2的致细胞凋亡作用，使细胞凋亡率降低[（23．42±3．52）％比（48．33±7．41）％，P〈0．01]。预处理＋H2O2处理组细胞凋亡率较单纯H2O2处理组明显下降[（16．93±3．50）％比（48．33±7．41）％，P〈0．01]。SB203580不影响H2O2预处理的适应性细胞保护作用。50μmol／L H2O2具有比H2O2预处理更强的激活p38的作用，H2O2预处理能明显地抑制50μmol／L H2O2对p38的激活作用。结论H2O2预处理抑制高浓度H2O2对p38的激活可能是其适应性细胞保护机制之一。
- 廖新学唐小卿郭瑞鲜陈正华杨春涛杨战利孟金兰陈培熹冯鉴强
- 关键词：过氧化氢P38丝裂原活化蛋白激酶类细胞凋亡适应性细胞保护
