杨春涛
- 作品数：67 被引量：282H指数：11
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- 一种糖基化终末产物的简易制备方法
- 本发明公开一种糖基化终末产物的简易制备方法，包括如下步骤：1)配制磷酸盐缓冲液，将动物血清蛋白加入到所配制的磷酸盐缓冲液中至浓度为50‑70g/L，获得动物血清蛋白溶液；2)向所获得的动物血清蛋白溶液里加入丙酮醛，获得丙...
- 杨春涛孟富慧张辉陈利李翔
- 文献传递
- 硫烷硫供体化合物在制备防治糖尿病性视网膜病药物中的应用
- 本发明公开了硫烷硫供体化合物在制备防治糖尿病视网膜病药物中的潜在应用，属于医药制品技术领域。生物信息学分析发现：糖尿病视网膜组织中存在谷胱甘肽代谢和硫代谢缺陷。在体外实验中，应用硫烷硫供体化合物处理可抑制糖尿病诱导的氧化...
- 杨春涛李可心李晓潼吴一行霍瑞陈友邦张辉
- 硫化氢对化学性缺氧诱导PC12细胞凋亡的影响被引量：9
- 2010年
- 【目的】探讨硫化氢(H2S)对抗二氯化钴(CoCl2)诱导PC12细胞凋亡的作用及其初步机制。【方法】应用化学性缺氧模拟剂CoCl2在PC12细胞建立化学性缺氧损伤模型;以硫氢化钠(NaHS)作为H2S的供体;应用CCK-8比色法检测细胞存活率;碘化丙啶(PI)染色流式细胞技术(FCM)检测细胞凋亡率;Hoechst33258染色检测细胞凋亡的形态学变化;罗丹明123(Rh123)染色荧光显微镜照相检测细胞线粒体膜电位(MMP);2',7'-二氯荧光黄双乙酸盐(DCFH-DA)染色荧光显微镜照相检测细胞内的活性氧(ROS)水平。【结果】CoCl2引起PC12细胞的存活率显著降低及凋亡率明显增加,同时引起PC12细胞的MMP明显降低及ROS生成显著增加。在600μmol/L CoCl2处理PC12细胞前,应用100～400μmol/L NaHS预处理30min,呈浓度依赖性地阻断CoCl2引起PC12细胞的存活率降低;200μmol/L、400μmol/L NaHS预处理能显著地降低600μmol/L CoCl2引起PC12细胞的凋亡率增加并阻断CoCl2引起的MMP降低及ROS升高。【结论】H2S具有神经细胞保护作用,能明显地对抗CoCl2诱导的PC12细胞凋亡,此作用可能与其减少ROS生成,提高MMP有关。
- 孟金兰兰爱平郭瑞鲜杨春涛杨战利黄雪冯鉴强
- 关键词：硫化氢二氯化钴缺氧PC12细胞凋亡
- 右美托咪定对抗化学性低氧引起的PC12细胞损伤被引量：14
- 2011年
- 目的探讨α2肾上腺素受体激动剂右美托咪定能否保护PC12细胞对抗化学性低氧引起的损伤。方法应用化学性低氧模拟剂氯化钴(CoCl2)处理PC12细胞以建立化学性缺氧损伤模型。应用CCK-8比色法检测细胞存活率;Ho-chest 33258核染色法观察细胞凋亡的形态学和数量的改变;双氯荧光素(DCFH-DA)染色荧光显微镜检测细胞内的活性氧(ROS)水平;罗丹明123(Rh123)染色荧光显微镜检测线粒体膜电位(MMP)。结果在浓度为100～600μmol.L-1的范围内,右美托咪定浓度依赖性地对抗CoCl2引起的细胞毒性,使细胞存活率明显增加。400μmol.L-1右美托咪定能抑制CoCl2的致凋亡作用,使凋亡细胞数量减少。右美托咪定也能抑制CoCl2引起的ROS过度生成及MMP降低的作用。结论右美托咪定能保护PC12细胞对抗CoCl2诱导的损伤,此作用可能与其抑制ROS过度生成及保护MMP有关。
- 莫利求兰爱平林琳周舸张莉莉杨春涛王秀玉杨战利陈培熹冯鉴强
- 关键词：氯化钴PC12细胞活性氧线粒体膜电位
- 胚胎海马来源干细胞移植治疗缺血性脑梗死的研究被引量：2
- 2009年
- 目的:对脑梗死大鼠进行胚胎海马来源的干细胞移植治疗,观察其能否在梗死灶部位分化为成熟的神经元而发挥神经替代作用,并最终改善动物的肢体功能。方法:从绿色荧光蛋白(GFP)转基因SD胚胎大鼠的海马提取细胞进行体外培养,免疫荧光染色观察这些细胞的特征。光化学法制作大脑皮层局灶缺血梗死模型,即光血栓皮层损伤(PCI)。PCI后1d将20只SD大鼠随机分为干细胞移植组和对照组,前者在梗死灶附近植入胚胎海马来源的干细胞,而后者不进行干细胞移植。在PCI后1、7、14、21d,用旋转实验对动物的肢体功能进行测试和评分。在PCI后3周和12周,以抗神经元核抗体(NeuN)染色成熟的神经元,观察移植干细胞的存活及其分化为各种亚型神经细胞的情况。结果:来自SD大鼠胚胎海马的细胞明显表现出神经干细胞的特征。移植的细胞可以在脑梗死动物模型中至少存活12周,并能分化为成熟神经元、星形胶质细胞等亚型的神经细胞。与移植后3周相比,12周时的NeuN+/GFP+密度和移植物体积均有所减少(P<0.05)。旋转实验结果表明,在PCI后7、14、21d,移植组动物在平衡木上的停留时间均显著长于对照组(P<0.01)。结论:来源于胚胎海马的细胞具有神经干细胞特征,其被移植入脑梗死灶周围后能存活12周以上,并可以分化为成熟的神经细胞,这可能与动物运动功能的改善有关。该结果提示由移植物分化的神经细胞可能对受损宿主细胞发挥了替代作用。
- 李欣廖新学荆小莉杨春涛熊艳廖晓星冯鉴强
- 关键词：神经干细胞脑梗死海马
- 磷酸化NF—κB亚基P65介导化学性缺氧诱导的HaCaT细胞炎症损伤被引量：1
- 2011年
- 目的探讨核因子-κB（NF—κB）亚基P65磷酸化是否参与化学性缺氧模拟剂氯化钴（CoCl2）诱导的永生化人皮肤角质形成细胞（HaCaT）毒性作用及炎症反应。方法用2mmol／LCoCl2处理HaCaT细胞，建立化学性缺氧诱导HaCaT细胞损伤的体外模型。RNA干扰法下调NF—κB亚基P65的表达。细胞计数试剂盒-8比色法检测细胞存活率；ELISA法检测培养基中IL-6和IL-8的含量；Western印迹法检测总量P65及磷酸化P65的蛋白表达。结果CoCl2处理HaCaT细胞0～4h，可促进NF—κB亚基P65的磷酸化，在0．5h时P65亚基开始磷酸化，1．5h时P65亚基的磷酸化水平达到高峰，约为对照组的6．6倍，而4h基本恢复到正常水平。CoCl2处理HaCaT细胞0～6h，可时间依赖性地降低细胞活力，2．4和6h的细胞存活率与对照组比较，P值分别〈0．05、〈0．01及〈0．01。CoCl2处理6h，还引起IL-6和IL-8的释放显著增加。RNA干扰法下调P65的表达后，CoCl2处理引起的HaCaT细胞毒性作用被明显减弱，即使细胞存活率升高了11％左右，下调P65表达还明显抑制了CoCl2处理引起的IL-6和IL-8释放增多。结论磷酸化NF—KB亚基P65介导CoCl2诱导的HaCaT细胞毒性及炎症反应。
- 杨春涛凌宏忠曾凡钦张辉杨战利傅璐叶锋莫利球韩艳芳冯鉴强
- 关键词：细胞低氧角蛋白细胞炎症
- 姜黄素保护大鼠肾小管上皮细胞对抗氧化应激引起的损伤作用被引量：5
- 2009年
- 目的探讨姜黄素对氧化应激诱导大鼠近端肾小管上皮细胞（NRK-52E）损伤作用的影响。方法用不同浓度的H2O2处理NRK-52E细胞，建立氧化应激损伤NRK-52E的实验模型。应用Hoechst33258染色法观察凋亡细胞的形态学改变；PI染色流式细胞仪检测细胞凋亡率；Western印迹法检测Bcl-2蛋白的表达。结果H2O2在100～500μmol／L浓度范围内处理NRK-52E细胞24h，呈浓度依赖性地增加细胞的凋亡率；500μmol／LH2O2能显著抑制NRK-52E细胞Bcl-2的表达（P〈0．05）。20μmol／L和40μmol／L姜黄素能显著阻断H202对NRK-52E细胞的致凋亡作用[（32．9±8．1）％、（22．23±9．3）％比（72．7±10．5）％，均P〈0．05]，并能显著拮抗H2O2对Bcl-2蛋白表达的下调作用（P〈0．05）。40μmol／L姜黄素本身也能上调Bcl-2蛋白的表达（P〈0．05）。结论姜黄素能保护NRK-52E细胞对抗氧化应激引起的细胞凋亡，此肾小管上皮细胞保护作用可能与其抑制H2O2对Bcl-2蛋白表达的下调作用有关。
- 洪汉利纪玉莲冯鉴强杨春涛彭炎强余学清
- 关键词：姜黄素氧化性应激过氧化氢肾小管上皮细胞
- 内皮微颗粒通过NADPH氧化酶损伤内皮细胞功能被引量：12
- 2010年
- 目的探讨冠心病患者循环内皮微颗粒(EMPs)与血流介导的内皮舒张功能(FMD)之间的关系以及EMPs损伤内皮细胞功能的机制。方法选择2009年3～6月在中山大学附属第一医院高血压血管病科住院的冠心病患者及冠心病高危患者各15名,检测血生化指标、循环内皮微颗粒水平及血流介导的内皮舒张功能,分析各项指标之间的关系;培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),制备内皮细胞来源的微颗粒,用内皮微颗粒刺激培养的人脐静脉内皮细胞,检测活性氧产物(ROS)及一氧化氮(NO)的水平。结果冠心病患者硝酸酯类的使用比率高于冠心病高危患者,冠心病患者循环内皮微颗粒水平高于高危患者,而血流介导的内皮舒张功能低于高危患者,在所有患者中,循环内皮微颗粒水平与血流介导的内皮舒张功能之间呈负相关;EMPs呈浓度依赖性地增加脐静脉内皮细胞活性氧产物的产生,并降低NO的生成,应用20μmol/lNADPH氧化酶抑制剂Apocyine能显著抑制EMPs导致的ROS增加和NO的降低。结论在冠心病患者中,循环EMPs可以损伤内皮细胞舒张功能,NADPH氧化酶参与EMPs导致内皮细胞功能障碍的损伤过程。
- 程飞陶军冯鉴强杨春涛王妍张媛媛张晓琳
- 关键词：内皮微颗粒NADPH氧化酶一氧化氮内皮细胞功能障碍
- Survivin在PC12细胞对抗化学性缺氧损伤中的作用被引量：5
- 2010年
- 目的探讨存活素(survivin)在PC12细胞对抗氯化钴(CoCl2)诱导损伤中的作用。方法应用不同浓度的CoCl2处理PC12细胞不同时间,建立化学性缺氧诱导PC12细胞损伤的实验模型。应用CCK-8比色法检测细胞存活率;Western-blot法检测CoCl2诱导缺氧与survivin表达间的量效(200～1000μmol·L-1)和时效(0～48h)关系。结果CoCl2可明显抑制PC12细胞的存活率,且呈浓度和时间依赖性。应用不同浓度CoCl2处理PC12细胞24h,在200～600μmol·L-1浓度范围内,呈浓度依赖性地促进survivin表达,600μmol·L-1CoCl2诱导survivin表达达高峰,超过此浓度,则随着CoCl2浓度的增加,survivin表达逐渐下降,CoCl2浓度达1000μmol·L-1时,survivin基本不表达;应用600μmol·L-1CoCl2处理PC12细胞,在0～36h时间范围内,呈时间依赖性地促进PC12细胞survivin的表达,但随着处理时间的延长,survivin的表达逐渐下降;加入2μmol·L-1Hsp90抑制剂17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素(17-AAG),不仅可以降低600μmol·L-1 CoCl2诱导的survivin高表达,而且加重了600μmol·L-1 CoCl2对PC12细胞的损伤作用,使细胞存活率降低。结论survivin表达上调可能是PC12细胞对抗化学性缺氧损伤的内在防御机制之一。
- 孟金兰董艳芬莫利求杨春涛兰爱平杨战利陈培熹冯鉴强
- 关键词：氯化钴化学性缺氧存活素热休克蛋白90PC12细胞17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素
- MPP＋对PC12细胞内源性H2S生成的影响被引量：1
- 2009年
- 目的:观察1-甲基4-苯基吡啶离子(MPP+)对PC12细胞内源性硫化氢(H2S)生成的影响,以探讨MPP+损伤PC12细胞的新机制。方法:RT-PCR方法检测PC12细胞胱硫醚-β-合酶(CBS)mRNA的表达;亚甲基蓝分光光度计法检测PC12细胞内源性H2S的含量及PC12细胞CBS活性;台盼蓝拒染色法观察PC12细胞的存活率。结果:MPP+可以抑制PC12细胞CBS的表达及其活性,减少内源性H2S的生成;MPP+可以明显地降低PC12细胞的存活率;H2S的供体硫氢化钠(NaHS)对MPP+诱导的PC12细胞损伤具有显著的拮抗作用。结论:MPP+能抑制CBS的表达和活性,减少内源性H2S生成,这可能与其损伤PC12细胞的机制有关。
- 唐小卿范黎黎杨春涛申新田赵静李玉娟郭瑞鲜冯鉴强
- 关键词：硫化氢胱硫醚Β合酶PC12细胞
