黄茜华
- 作品数：10 被引量：41H指数：6
- 供职机构：北京出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金：国家攀登计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 猪瘟病毒石门株NS4B基因的序列测定及分析被引量：7
- 1999年
- 采用ＲＴ－ＰＣＲ技术，利用２对引物，从猪瘟病毒（ＣＳＦＶ）强毒石门株感染的猪血中成功扩增了ＮＳ４Ｂ基因，片段大小分别为７５７ｂｐ和７７４ｂｐ。克隆后经酶切鉴定，自动测序和序列分析，结果显示该基因较为保守，与其他猪瘟病毒毒株均有很高的同源性，与同属的ＢＶＤＶＳＤ－１株和ＮＡＤＬ株也有较高的同源性。
- 黄茜华张楚瑜
- 关键词：猪瘟病毒石门株猪瘟
- 荧光RT-PCR快速检测活禽和禽产品中新城疫病毒中强毒株的研究
- 魏传忠张鹤晓赖平安朱文斯孙颖杰刘环杨伟刘继红郭晋优谷强张利锋赖少梅刘艳华汪琳李宁段生涛张向东黄茜华
- 我国是一个养禽大国，禽产品主要出口日本、韩国、欧盟等国家，2001年韩国宣称从中国出口的鸭肉中分离出禽流感病毒H5亚型，并停止从我国进口禽肉，日本根据韩国的决定，加强了对我禽产品的检疫，仅去年就从中国出口的禽肉中11次分...
- 关键词：
- 关键词：新城疫病毒荧光聚合酶链反应
- 猪瘟病毒石门株NS5A基因的序列测定及同源比较被引量：8
- 1999年
- 根据已发表的猪瘟病毒序列，设计并合成了３对引物，利用ＲＴＰＣＲ技术，从猪瘟病毒石门株感染猪血中成功扩增了各ｃＤＮＡ片段，覆盖整个ＮＳ５Ａ基因，片段大小各为７７４，６８５，９１７ｂｐ。克隆后测序。序列比较结果显示，该基因在ＣＳＦＶ中较为保守。与同属的ＢＶＤＶ的序列同源性较低，且氨基酸的同源性低于核苷酸的同源性，推测它参与决定瘟病毒种的特异性。
- 黄茜华张楚瑜
- 关键词：猪瘟病毒石门株
- 荧光RT-PCR快速检测高致病力禽流感病毒H5亚型
- 魏传忠赖平安张鹤晓朱文斯刘环刘继红郭晋优谷强张利锋黄茜华杨伟宋维平刘月焕段生涛张向东
- 该课题组根据高致病力禽流感病毒H5亚型血凝素（HA）特有的基因序列，合成特异性强的引物和探针，利用荧光RT-PCR检测技术，检测方法易于标准化等优点，经引物、探针筛选及其最佳配比比例优化，离子浓度、循环参数、检样体积及核...
- 关键词：
- 关键词：荧光RT-PCR禽流感病毒
- 猪瘟病毒石门株全基因组cDNA文库构建、序列测定及分析被引量：18
- 1999年
- 根据已发表的猪瘟病毒序列 ,设计并合成了 1 8对覆盖全长基因组的引物 .应用RT PCR技术从猪瘟病毒石门株感染的猪血中扩增出各相应的cDNA片段 ,分别克隆 ,构建了石门株全基因组的cDNA文库并完成了序列测定 .石门株基因组全长 1 2 2 98nt,其中 5′端和 3′端非编码区长度分别为 373和 2 31nt,中间一个大的开放阅读框长 1 1 6 97nt,翻译成一个包含3898个氨基酸残基的多聚蛋白 .
- 黄茜华张楚瑜王家富付烈振王宁朱燕怀济森张玮于建石许晖
- 关键词：CDNA文库克隆
- 猪瘟病毒石门株NS4A基因的克隆、测序及分析被引量：2
- 1999年
- 采用RT-PCR技术，利用一对引物，从感染猪血中成功扩增了猪瘟病毒强毒石门株NS4A基因，片段大小为757bp，与预期大小一致。克隆后经酶切鉴定，自动化测序。序列比较表明，该基因为最保守的基因之一，其中石门株序列与ALD，GPE，HCLV及Brescia株均有很高的同源性，由其推导的氨基酸的同源性高达100％。仅与Alfort株的同源性消低。对石门株序列与同属的BVDVSD－1株和NADL株序列进行了比较。
- 黄茜华张楚俞
- 关键词：猪瘟病毒克隆
- 猪瘟病毒石门株NS2-3基因片段的序列测定及比较被引量：9
- 1999年
- 根据猪瘟病毒Ｃ株的序列，以计算机辅助设计，化学合成１对引物（ＰＦ５６４８／ＰＲ６６０４），应用ＲＴＰＣＲ技术从感染猪血中成功地扩增了我国猪瘟病毒强毒石门株ＮＳ２３基因片段，大小为９５７ｂｐ，位于ＮＳ３基因的中部ＮＴＰａｓｅ和Ｈｅｌｉｃａｓｅ活性区。克隆后测序，结果表明该段基因产物具有解旋酶超家族全部七个特征性保守序列，包括共同的ＮＴＰ结合基序Ａ位点（ＧＸＧＫＴ／Ｓ）和Ｂ位点（３ｈｙ，２ｘ）Ｄ。序列同源性比较表明，石门株与日本的ＡＬＤ和ＧＰＥ－株同源性最高，与其它３株猪瘟病毒（Ｃ株、Ｂｒｅｓｃｉａ株和Ａｌｆｏｒｔ株）的同源性也很高，并与２株牛病毒性腹泻病毒（ＢＶＤＶ）（ＮＡＤＬ株和ＳＤ１株）也有较高的同源性，尤其是由核苷酸序列推导的氨基酸序列，同源性均大于９０％，是瘟病毒属基因组中最保守的区段。
- 黄茜华张楚瑜王宁傅烈振王家富
- 关键词：猪瘟病毒
- 猪瘟病毒石门株非结构蛋白基因的结构分析
- 黄茜华
- 关键词：猪瘟病毒石门株
- 中国猪瘟兔化弱毒兔脾毒NS2-3基因的序列分析被引量：15
- 2000年
- 根据已发表的猪瘟病毒序列 ,设计并合成了覆盖有 NS2 - 3全基因的 4对引物 ,应用RT -PCR技术从接种了猪瘟兔化弱毒 (hogcholeraviruslapinizedChinesestrain ,HCLV)的兔脾组织中 ,成功地扩增了 NS 2 - 3基因 ,将其克隆到T载体后 ,测定了其核苷酸序列。结果显示 ,所克隆的NS 2 - 3基因长 2 96 4个核苷酸 ,编码 988个氨基酸。用DNASIS和PROSIS软件分析表明 ,该基因具有丝氨酸类蛋白酶活性及含有解旋酶超家族特征性保守序列。核苷酸序列同源性分析表明 ,HCLV与国外报导的 8株HCV毒株“C”、Riems、ALD、GPE、Glentorf、CAP、Brescia和Alfort株NS 2 - 3基因核苷酸序列同源性分别为 99%、99%、96 %、96 %、95 %、95 %、94%和 86 % ,推导的氨基酸序列同源性分别为 99%、99%、98%、98%、98%、97%、97%和 95 % ,氨基酸序列的高度同源性表明了NS 2 - 3是猪瘟病毒中高度保守的蛋白质之一 ,这与该基因产物参与病毒复制及多聚蛋白前体加工过程中的重要作用相对应。
- 王家富张楚瑜傅烈振黄茜华张芄伟
- 关键词：疫苗
- 猪瘟病毒石门株与兔化弱毒株E0糖蛋白基因的克隆及序列分析被引量：12
- 2000年
- 参考已发表的猪瘟病毒序列，设计并合成了一对引物，应用ＲＴＰＣＲ 技术，扩增了猪瘟兔化弱毒（Ｈｏｇ ｃｈｏｌｅｒａ ｖｉｒｕｓ ｌａｐｉｎｉｚｅｄ Ｃｈｉｎｅｓｅ ｓｔｒａｉｎ ， ＨＣＬＶ） 和石门强毒株的Ｅ０ 糖蛋白基因，并将其克隆到ｐＧＥＭＴ 载体中，测定了其核苷酸序列，并推导了其氨基酸序列。结果表明我国这两株强弱不同毒株Ｅ０ 糖蛋白核苷酸序列同源性和推导的氨基酸序列同源性分别为９５－０ ％ 和９４－３ ％ ，有１３ 个氨基酸的差异，ＨＣＬＶ 比石门株多了一个潜在的Ｎ糖基化位点。将我国这两株病毒与国外已报导的ＨＣＶ 毒株Ｅ０ 基因序列进行了比较，发现石门株与日本的两株毒株ＡＬＤ 和ＧＰＥ－ 同源性较高，核苷酸序列同源性分别为９７－４ ％ 和９６－５ ％ ，氨基酸同源性分别为９７－４ ％ 和９６－０ ％ ，而与欧洲Ｂｒｅｓｃｉａ 株和Ａｌｆｏｒｔ 株同源性较低，核苷酸同源性分别为９２－２ ％ 和８６－５ ％ ，氨基酸同源性为９５－２ ％ 和９２－５ ％ ， ＨＣＬＶ 与ＡＬＤ、ＧＰＥ－ 、Ｂｒｅｓｃｉａ、Ａｌｆｏｒｔ 株核苷酸同源性分别为９５－６ ％ 、９４－９ ％ 、９１－３ ％ 、８５－５ ％ ，推导的氨基酸同源性分别为９３－４ ％ 、９２－５ ％
- 王家富张楚瑜王宁傅烈振黄茜华
- 关键词：猪瘟病毒兔化弱毒疫苗
