黄培华
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
- 供职机构：河北工程大学教育技术中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 一种高通量快速鉴定重组子方法的建立
- 2014年
- 利用添加了RNaseA的1X cracking buffer直接裂解细菌增强观测效果,排除RNA干扰,通过琼脂糖凝胶电泳与空载体质粒进行比较,建立一种高通量快速鉴定重组子的方法。该方法方便易行,大大提高了工作效率。
- 王亚男黄培华樊宝良
- 关键词：CRACKINGBUFFER克隆鉴定
- RNA聚合酶Ⅱ启动子驱动的长双链RNA干扰载体的构建与验证被引量：1
- 2013年
- 为了探索构建由RNA聚合酶Ⅱ型启动子驱动、能有效避免干扰素反应的表达长双链RNA的RNA干扰载体,试验在转录单元两端各添加了一个自剪切核酶序列,在转录后切成RNA出核所必要的5'帽子和3'polyA尾,以绿色荧光蛋白(EGFP)基因为报告基因插入2个核酶之间作为试验载体,以表达红色荧光蛋白基因的载体作转染效率校准,通过瞬间转染对荧光蛋白的表达情况进行观察和RT-PCR分析。结果表明:在转染效率基本一致的情况下,试验组未观察到绿色荧光;2个核酶能够完全自剪切,试验组细胞质中有EGFP mRNA的存在,但与正常对照组相比下降了46.1%。说明研究设计的载体达到了延迟表达RNA出核的目的,为用该载体表达长双链RNA时在其出核之前被Dicer酶有效切割成小双链RNA从而避免其出核引起干扰素反应提供了时间保障。
- 曹柯孙朕黄培华樊宝良
- 关键词：RNA干扰核酶
