马贵亮
- 作品数：27 被引量：64H指数：4
- 供职机构：青岛大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部重点实验室开放基金山东省医药卫生科技发展计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 吡咯烷二硫代氨基甲酸盐增强肿瘤坏死因子α诱导人胃癌细胞株SGC-7901凋亡作用的研究被引量：3
- 2013年
- 目的研究核转录因子-κb（NF—κb）抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸盐（PDTC）对肿瘤坏死因子α（TNF—α）诱导的人胃癌细胞株SGC-7901生长抑制及凋亡的影响，并探讨其作用机制。方法应用噻唑蓝（MTr）法检测不同浓度的PDTC和TNF-α以及两者联合应用对SGC-7901细胞增殖的抑制率：采用Hoechst检测SGC-7901细胞凋亡情况：Westernblot检测SGC-7901细胞survivin和easpase-3蛋白的表达。结果PDTC在15、30、60和100μmol／L浓度时．对SGC-7901的细胞生长抑制率分别为（12．14±0．91）％、（20．00±1．11）％、（37．63±1．01）％和（41.46±1．07）％．均可抑制细胞增殖（P〈0．01）。TNF-α为25mg／L时，对SGC．7901细胞的生长抑制率为（2．38±0．67）％，与对照组（1．50±0．81）％相比，差异无统计学意义（F=28．28，P〉0．05）：而在50、100和150mg／L浓度时，对SGC-7901细胞的生长抑制率分别为（4．53±0．85）％、（4．43±0．70）％和（4．74±1．07）％，与对照组相比，差异有统计学意义（P〈0．05）。PDTC15μmol／L分别与25、50、100和150mg／L的TNF．仅联合应用时，对SGC-7901的细胞生长抑制率则分别为（18．94±1．10）％、（30．23±0．89）％、（41．55±0．94）％和（53．34±0．98）％，与单用TNF—α或单用15μmol／LPDTC比较，细胞生长抑制率增加（P〈0．01）。Hoechst检测结果显示，TNF-α100mg／L组、PDTC15μmol／L组及两者联合应用组细胞凋亡率均显著增加（P〈0．01），且联合用药组细胞凋亡率增高最为显著（P〈0．01）。PDTC（15μmol／L）与TNF-α（100mg／L）联合用药与单用TNF—α（100mg／L）比较，细胞survivin蛋白表达明显降低（P〈0．01），与单用PDTC（15μmol／L）比较，差异无统计学意义（P〉0．05）；但caspase-3蛋白的表达联合用药组较两者分别单用时显著增加（P〈0．01）。结论PDTC可增强TNF-α对人SGC-7901细
- 曹明争毛伟征马贵亮李杨
- 关键词：肿瘤坏死因子-Α核转录因子-ΚB吡咯烷二硫代氨基甲酸盐凋亡
- 转基因LIGHT的人脐血间质干细胞对胃癌抑制杀伤作用的研究被引量：3
- 2012年
- 目的探讨转基因LIGHT脐血间质干细胞对胃癌的抑制杀伤作用。方法采用慢病毒载体穿梭质粒pGC-FU-LIGHT．在脂质体Lipofectamine2000介导下与结构质粒pHelper1．0和包膜质粒pHelper2．0共转染293T细胞获得慢病毒后分别感染人脐血间质干细胞．获得重组慢病毒感染的脐血间质干细胞（MSC-LIGHT）和空载体慢病毒感染的脐血间质干细胞（MSC）。人胃癌细胞SGC-7901注射到裸鼠腹股沟皮下建立胃癌移植瘤裸鼠模型。荷瘤裸鼠分为MSC-LIGHT组、MSC组和生理盐水组，每组5只，向3组裸鼠瘤周分别注射MSC-LIGHT、MSC及生理盐水。隔日1次，注射3次，第4周取材，观察注射前后瘤体生长情况。反转录PCR和ELISA法测定3组胃癌组织中LIGHT的mRNA和蛋白表达；病理切片观察瘤体的坏死面积。结果MSC．LIGHT组、MSC组和生理盐水组裸鼠肿瘤体积分别为（0．45±0．25）cm3、（0．64±0．36）cm3和（1．21±0．79）cm3，3组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。3组LIGHTmRNA相对表达量分别为2．96±0．27，1．23±0．47和0．73±0．10．蛋白浓度分别为（167．89±2．31）、（73．22±5．74）和（49．66±5．25）ng／L；3组比较差异均有统计学意义（均P〈0．01）。病理切片显示MSC-LIGHT组坏死面积最大。结论转基因脐血间质干细胞旁分泌LIGHT对胃癌细胞具有明显的抑制杀伤作用。
- 马贵亮朱新红宣世英毛伟征
- 关键词：转基因治疗脐血间质干细胞
- 检测胃癌患者腹腔冲洗液中癌胚抗原mRNA和细胞角蛋白20 mRNA的临床意义被引量：5
- 2012年
- 目的探讨采用巢式逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测胃癌患者腹腔冲洗液中癌胚抗原(CEA)mRNA和细胞角蛋白20(CK-20)mRNA的临床价值。方法收集80例胃癌患者和10例胃良性病变患者的腹腔冲洗液或腹水,常规行HE染色细胞学检查,采用巢式RT-PCR方法检测腹腔冲洗液中CEA mRNA和CK-20 mRNA的表达,并以人胃癌细胞株SGC-7901作为阳性对照。结果80例胃癌患者腹腔冲洗液中CEA mRNA的阳性表达率为52.5%(42/80),CK-20 mRNA的阳性表达率为57.5%(46/80),CEA mRNA和CK-20 mRNA的联合检测阳性率为70.0%(56/80),皆高于腹腔冲洗液细胞学(PLC)检查的27.5%(22/80,P<0.05),且22例PLC检查阳性患者的CEA mRNA和CK-20 mRNA检测结果均为阳性。CEA mRNA和CK-20 mRNA的阳性率与淋巴结转移和TNM分期明显相关(P<0.05)。结论巢式RT-PCR检测胃癌患者腹腔冲洗液中CEA和CK-20基因,可以提高腹腔内游离癌细胞(IFCCs)的检测灵敏度和特异度,对于早期诊断胃癌腹膜微转移有一定的临床价值,可为手术方式选择及术中、术后化疗提供依据。
- 陈枫毛伟征李杨郑鸿伟马贵亮
- 关键词：角蛋白20癌胚抗原
- 人TNF-α重组慢病毒载体构建及其脐血间质干细胞表达被引量：10
- 2010年
- 目的构建带有人TNF-α基因的慢病毒载体,并且观察该基因在体外人脐血间质干细胞中的表达。方法通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)从PCD DNA-TNF-α质粒中获得人TNF-α基因,利用Infusion技术重组构建慢病毒载体穿梭质粒pGC-FU-TNF-α,在脂质体Lipofectamine 2000介导下与结构质粒pHelper 1.0和包膜质粒pHelper 2.0共转染293T细胞包装生产慢病毒。将人脐血间质干细胞分为实验组(pGC-FU-TNF-α)、空载体对照组(pGC-FU-EGFP)及空白组(脐血间质干细胞),分别用重组慢病毒、空载慢病毒、PBS感染后,采用RT-PCR以及ELISA方法检测TNF-α表达。结果所获TNF-α基因测序证明与GenBank中序列一致;重组慢病毒载体质粒pGC-FU-TNF-α经鉴定正确;三质粒共转染293T细胞成功,收集、浓缩病毒后测定其滴度为2×107TU/L,感染脐血间质干细胞后RT-PCR、ELISA检测3组细胞均有TNF-α表达,其中实验组大量表达TNF-α,与其余两组比较差异有显著性(F=11.677、21.321,P<0.01)。结论成功构建带有TNF-α基因的慢病毒载体并实现在脐血间质干细胞中的表达,为脐血间质干细胞转基因治疗胃癌的应用奠定基础。
- 马贵亮毛伟征杨堃安岗岱震波
- 关键词：慢病毒感染脐血间质干细胞
- TNF-α重组慢病毒对胃癌细胞自分泌杀伤作用的实验研究被引量：1
- 2014年
- 目的探讨TNF-α重组慢病毒对胃癌细胞自分泌杀伤作用。方法 TNF-α重组慢病毒感染SGC-7901胃癌细胞为实验组,并设立阴性对照组以及空白对照组,采用RT-PCR检测3组细胞中TNF-αmR NA的表达情况,ELISA检测3组细胞上清液中TNF-α蛋白含量,流式细胞术检测3组细胞凋亡情况。结果 PCR实验观察到TNF-αmR NA荧光条带24h后稳定表达。测得三组培养液中TNF-α含量,实验组[(2.6926±0.7563)ng/ml]明显高于阴性对照组[(0.9326±0.3091)ng/ml]和空白对照组[(0.8552±0.2768)ng/ml],且差异均有统计学意义(P均<0.01),而阴性对照组和空白对照组之间差别无统计学意义(P>0.05)。在流式细胞实验中,实验组细胞凋亡率明显高于其他组,差异有统计学意义(P<0.05),而阴性对照组和空白对照组差别无统计学意义(P>0.05)。结论TNF-α重组慢病毒可以感染SGC-7901胃癌细胞,并在胃癌细胞中稳定表达并自分泌TNF-α,诱导杀伤胃癌细胞。
- 刘同运刘春林李谦战淑慧马贵亮毛伟征
- 关键词：胃癌细胞TNF-Α慢病毒自分泌杀伤作用
- 胃肝样腺癌的诊治现状被引量：3
- 2020年
- 目的了解胃肝样腺癌(GHA)的研究现状,以期为临床诊治提供参考。方法查阅近年来国内外关于GHA研究的相关文献并进行综述。结果 GHA是一种具有腺样分化和肝细胞分化的特殊类型胃癌,在所有胃癌中发生率≤1%。GHA的组织学形态与肝细胞癌相似,常伴有血清甲胎蛋白升高,极易出现淋巴结转移和肝转移。根治性手术及化疗是其最主要的治疗方法,但即使是根治性切除后仍常见复发和转移,且目前尚无针对GHA的标准化疗方案。结论 GHA是一种恶性度较高的特殊胃癌亚型,临床进展迅速,预后差。组织病理学结果是诊断GHA的金标准。GHA治疗以手术与化疗为主的综合治疗方式,基因分子特征及靶向治疗是未来的研究方向。
- 俞程彬马贵亮毛伟征
- 关键词：胃肝样腺癌病理学特征预后
- 胃癌病人术后限制性输液对近期临床结局的影响被引量：2
- 2017年
- 目的观察胃癌病人术后限制性输液对近期临床结局的影响。方法将80例胃癌病人按照随机表格法分为常规输液的对照组40例和限制性输液的限制组40例。动态监测比较两组病人术后连续4天输液量、术后发热时间、术后恢复肛门排气排便时间、并发症发生例数(切口感染,切口裂开,吻合口瘘,心律失常,肺部感染,呼吸衰竭等)、术后住院天数及白细胞、C反应蛋白(CRP)、血红蛋白、谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、葡萄糖,尿素氮(BUN)、血肌酐(Cr)、BNP等。结果限制组病人术后第1和第3天白细胞明显低于对照组;术后第1、3天和第7天CRP明显低于对照组(P<0.05);限制组病人术后发热时间、肛门排气排便时间、住院天数明显少于对照组(P<0.05),术后并发症的发生减少。结论胃癌病人术后限制性输液可加速患者康复,降低术后并发症发生率。
- 李相峰刘超梁国刚马贵亮肖永来李林浩毛伟征
- 关键词：胃癌术后限制性输液加速康复
- 慢病毒载体MicroRNA-375过表达调控EMT通路抑制结直肠癌细胞侵袭和迁移被引量：3
- 2021年
- 目的:通过慢病毒载体构建microRNA-375过表达的结直肠癌细胞HCT116,研究microRNA-375通过调控EMT通路抑制结直肠癌细胞在人体中侵袭、迁移的作用。方法:通过慢病毒载体转染构建并培养出HCT116细胞的microRNA-375过表达实验组(过表达组)、设立空载体对照组(空载体组)、空白对照组(空白组)。实时逆转录PCR检测3组细胞中microRNA-375的表达情况。Trans-well小室模型检测3组细胞的侵袭能力。划痕实验检测3组细胞的迁移能力。Western blot蛋白质印迹法检测3组细胞EMT通路中蛋白质的相对含量。结果:慢病毒载体转染成功,构建并培养出microRNA-375过表达实验组和空载体对照组的HCT116细胞。过表达组细胞的microRNA-375相对表达量较空载体组和空白组明显升高(P<0.05);空载体组和空白组细胞的microRNA-375相对表达量差异无统计学意义(P>0.05)。过表达组细胞的侵袭、迁移能力较空载体组和空白组减弱(P<0.05);空载体组和空白组细胞的侵袭、迁移能力差异无统计学意义(P>0.05)。过表达组细胞的EMT过程较空载体组和空白组受抑制(P<0.05);空载体组和空白组细胞的EMT过程差异无统计学意义(P>0.05)。结论:MicroRNA-375作为抑癌因子,可通过抑制EMT通路,发挥抑制结直肠癌细胞在人体中侵袭和迁移的作用。
- 蔺杰祝志鹏马红梅马贵亮齐宏
- 关键词：上皮-间充质转化结直肠癌
- 双靶向HGFK1溶瘤腺病毒对不同胃癌细胞抑制作用的比较
- 2017年
- 目的比较肝细胞生长因子第一环状结构域基因(hepatocyte growth factor kringle 1,HGFK1)溶瘤腺病毒对三种胃癌细胞系SGC7901、MKN45、MGC803的抑制杀伤效果。方法以野生型腺病毒(AD5-EGFP)和空载体双靶向腺病毒(TH-AD-EGFP)为对照组,以双靶向HGFK1溶瘤腺病毒(TH-AD-HGFK1-EGFP)为试验组在感染复数(MOI)为100的条件下分别感染这三种胃癌细胞,测定其在72小时的细胞生存率状况(CCK8试验),并比较三种胃癌细胞试验组的差异。结果试验组双靶向HGFK1溶瘤腺病毒对三种胃癌细胞的72小时细胞抑制率均明显高于对照组(P<0.001),MKN45试验组明显低于SGC7901和MGC803试验组(分别是P=0.004和P=0.002)。而SGC7901试验组和MGC803试验组之间没有明显差别(P=0.599)。结论双靶向HGFK1溶瘤腺病毒对三种胃癌细胞SGC7901、MKN45、MGC803均具有抑制杀伤作用,但对SGC7901和MGC803的抑制效果明显高于MKN45。
- 林蕤巢晨马贵亮毛伟征李杨
- 关键词：溶瘤腺病毒胃癌细胞株SGC7901MKN45MGC803
- 结肠肉瘤样癌1例被引量：1
- 2011年
- 患者女,57岁,因＂反复性腹痛半月＂于2011年7月14日入院。患者半月前无明显诱因感腹部隐痛,右腹尤重,弯腰时加重,并伴坠胀感,无呕吐,无腹胀腹泻,二便可,体质量未见明显减轻。既往体健,家族无肿瘤病及遗传病。
- 肖永来李林浩张琳马贵亮
- 关键词：结肠肿瘤肉瘤样癌
