钟娜
- 作品数：2 被引量：5H指数：2
- 供职机构：暨南大学更多>>
- 发文基金：广州市天河区科技计划项目国家级大学生创新创业训练计划广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 基于独特型-抗独特型初步建立玉米赤霉烯酮无毒ELISA定量检测技术被引量：3
- 2013年
- 目的:初步建立以玉米赤霉烯酮(ZEN)抗独特型单抗替代玉米赤霉烯酮标准品,检测ZEN残留的无毒ELISA定量检测技术。方法:以ZEN-BSA为包被原,ZEN单抗(1G4)为反应抗体,分别以不同浓度的ZEN毒素或ZEN抗独特型单抗1D5(Ab2β-1D5)为竞争物,建立竞争抑制曲线。根据抑制率在20%~80%间,在相同抑制率条件下,ZEN与1D5间浓度对应关系,绘制替代标准曲线及对应的浓度转换方程。以ZEN类似毒素代替ZEN作为竞争抗原,检验方法的特异性;板内、板间试验检验方法的精密度。结果:初步建立了ZEN无毒ELISA定量检测技术,1D5与ZEN毒素之间的替代标准曲线方程为:y=1.2846x1.9310(y为ZEN毒素浓度ng/ml,x为抗独特型抗体浓度(μg/ml)。检出限(IC2 0)为1.041 ng/ml,检测范围为1.041~25.99 ng/ml。方法的批内平均变异系数为3.88%,批间平均变异系数为4.96%。方法特异性好,与ZEN类似毒素几乎无交叉反应。结论:利用ZEN单抗和ZEN抗独特型单抗初步建立了ZEN的无毒ELISA定量检测方法。
- 宋其芳向军俭骆敏儿钟娜黄婉君贾彦琼王宏
- 关键词：玉米赤霉烯酮
- 基于独特型-抗独特型玉米赤霉烯酮间接竞争ELISA检测方法的建立被引量：2
- 2014年
- 目的建立基于独特型．抗独特型玉米赤霉烯酮（zearalenone，ZEN）间接竞争ELISA检测方法，并进行验证。方法采用ProteinG亲和层析法纯化ZEN的p型抗独特型单抗1D5（Ab213-1D5）腹水；以ZEN单抗Fab片段包被酶标板，Ab2β-1D5为一抗，建立ZEN的竞争ELISA检测方法，绘制标准抑制曲线，根据回归方程计算半数抑制浓度（IC50），并确定检出限（IC10）及线性范围。以ZEN类似物呕吐毒素、伏马毒素、赭曲霉素A代替ZEN作为竞争抗原，用建立的方法进行检测，验证方法的特异性；配制6个浓度的ZEN溶液（20、30、40、50、60和75ng／m1），用建立的方法进行检测，计算试验内及试验间回收率和变异系数（CV），验证方法的准确性和精密性。结果Ab2β-1D5单抗的纯化效果较好，浓度为4mg／ml，效价为1：6×104；ZEN单抗Fab片段的最佳包被浓度为1μg／ml。建立的ZEN竞争EHSA检测方法的线性回归方程为：y=-34．099x＋81．857，R2=0．9944，IC50为8．60ng／ml，IC10为0．58ng／ml，线性范围为0．58-128．03ng／ml；该方法检测ZEN类似物伏马毒素、赭曲霉素A和呕吐毒素的交叉反应率均小于0．01％；检测不同浓度ZEN的试验内平均回收率在98．65％-113．45％之间，试验间平均回收率在82．96％-98．00％之间；试验内cy值在0．48％。6．40％之间，试验间cy值在0．94％-8．27％之间。结论应用ZEN单抗的Fab片段和ZEN的B型抗独特型单抗建立了ZEN的间接竞争ELISA检测方法，该方法特异性较强，准确性和精密性良好，且成本较低，快速简便，易于标准化，适用于样品的大量筛选。
- 黄婉君骆敏儿钟娜贾彦琼向军俭王宏
- 关键词：玉米赤霉烯酮FAB片段
