车文良
- 作品数：7 被引量：19H指数：3
- 供职机构：第二军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 基于凝血因子Ⅸ基因剔除小鼠建立血友病乙转基因动物模型
- 血友病乙的发生是由于位于X27.1的凝血因子IX基因结构改变而使凝血因子IX缺失或结构异常并致其功能缺乏，从而导致程度不同的凝血功能障碍。从大量的临床资料来看，导致血友病乙发病的基因缺陷的形式具有多样性，包括缺失、插入、...
- 车文良
- 关键词：血友病乙突变转基因小鼠模型
- 文献传递
- 分子遗传学与肝脏学讲座——第一讲 人类基因图
- 2000年
- 随着分子遗传学研究突飞猛进地发展 ,肝脏疾病的相关本质日益得以揭示。为了让广大基础和临床工作者了解这方面的信息和知识 ,本刊特邀请第二军医大学副校长 ,医学遗传学教研室主任傅继梁教授组织撰写一组“分子遗传学与肝脏学”的系列讲座。本期起始陆续刊出以飨读者。
- 车文良傅继梁
- 关键词：HGP物理图谱
- 基于凝血因子IX基因剔除小鼠建立血友病乙转基因动物模型
- 该研究所应用的凝血因子IX基因剔除小鼠基因组中,凝血因子IX基因的启动子至外显子c区段被neo△HPRT基因取代,使凝血因子IX基因失去转录功能,在血浆中无凝血因子IX蛋白.在该研究中对此动物模型进行了鉴定,通过分子水平...
- 车文良
- 关键词：血友病乙转基因小鼠模型
- 文献传递
- pMCLacⅠ/neo转基因小鼠靶基因突变检测的新策略被引量：1
- 2002年
- 由于pMCLacⅠ neo转基因小鼠含有两种不同状态的LacⅠ靶基因 ,有别于以往所建立的只含有一种靶基因的系统。因此 ,建立一种能快速、有效地分析这两种靶基因的检测方法 ,成为该转基因小鼠建立后的又一新课题。通过适当方法将pMCLacⅠ neo中两种LacⅠ靶基因分开后 ,采用了新近建立的M9 L正向选择系统进行检测 ,并用已知的LacⅠ基因突变子作为阳性对照 ,验证该策略的可行性。实验结果提示 ,M9 L正向选择系统可应用于pMCLacⅠ neo转基因小鼠中两种LacⅠ靶基因的检测 ;实验中所建立的突变检测方法快速。
- 姚真真黎怀星车文良贺艳傅继梁
- 关键词：突变检测
- 基于凝血因子IX基因剔除小鼠建立血友病乙转基因动物模型被引量：6
- 2002年
- 为在凝血因子IX基因剔除小鼠基础上建立基因组中整合有含特定点突变的人凝血因子IX基因表达载体的转基因小鼠家系 ,为血友病乙的研究提供更接近临床实际的动物模型。利用体外定点突变技术 ,构建含有特定点突变的人凝血因子IX基因表达载体 ,该载体包括由人凝血因子IX编码区及第一内含子构成的人凝血因子IX基因(hFIXml)、4个拷贝的MCK增强子 (MCKe)、鸡 β -肌动蛋白启动子 (bA)及PolyA ,命名为pMe4bAIXml质粒。将其线性化后 ,用显微注射法注射入 817只凝血因子IX基因剔除小鼠受精卵雄原核 ,再将它们分别回输 4 5只假孕受体母鼠的输卵管中 ,共产仔 6 9只 ,存活 6 3只。采用PCR与基因组Southern杂交筛选法鉴定小鼠 ,证实 6只小鼠基因组中整合有含特定点突变的pMe4bAIXml质粒 ,并对 1只小鼠的PCR产物进行测序 。
- 车文良贺艳姚真真李坚傅继梁
- 关键词：血友病乙转基因小鼠模型点突变
- 癌胚抗原与IL-2真核双表达质粒的构建及体外表达被引量：9
- 2002年
- 目的 :构建癌胚抗原 (CEA)与白细胞介素 2 (IL 2 )的真核双表达质粒 ,并检测其在体外的表达。方法 :利用分子生物学技术 ,将CEA基因片段和IL 2基因片段连接于真核双表达质粒 pIRES中 ,测定序列后 ,用脂质体包裹转染细胞 ,采用ELISA双抗体夹心法检测CEA和IL 2的表达。结果 :核酸序列测定证实本实验所构建的质粒正确 ,质粒上所接入的CEA和IL 2的碱基序列与标准序列的同源性分别为 99.8%和 99.9%。该双表达质粒在体外转染细胞内后可表达CEA和IL 2分子。结论 :实验所构建的 pIRES CEA IL 2双表达质粒能在体外同时表达CEA和IL 2分子 ,说明本质粒具有在细胞水平同时表达两种生物大分子的活性 。
- 王中川傅传刚王庆敏车文良戴建新
- 关键词：DNA疫苗癌胚抗原白细胞介素2CEAIL-2
