赵华
- 作品数：3 被引量：9H指数：2
- 供职机构：广西大学动物科学技术学院更多>>
- 发文基金：广西壮族自治区自然科学基金广西大学科研基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 山羊Sox2基因克隆、原核表达和GST融合蛋白纯化被引量：4
- 2009年
- 本研究旨在克隆山羊Sox2基因,构建pGEX-Sox2原核表达重组质粒,从大肠杆菌中获得纯化的GST-Sox2融合蛋白。应用RT-PCR方法从6周龄胎山羊生殖嵴扩增Sox2基因编码全序列,将其克隆到pMD18-T载体,然后再亚克隆到pGEX-KG表达载体。重组质粒pGEX-Sox2转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导,用SDS-PAGE电泳及Western blotting检测GST-Sox2融合蛋白表达,用谷胱甘肽Sepharose 4B介质分离纯化该融合蛋白。结果表明,山羊Sox2基因编码序列全长为960 bp;在优化的表达条件(1 mmol.L-1IPTG,22℃诱导16h)下,重组质粒(pGEX-Sox2)在大肠杆菌得到了高效表达;谷胱甘肽Sepharose 4B颗粒纯化蛋白得到预期大小的融合蛋白(约60 ku)。结论,本研究克隆了山羊Sox2基因,获得了纯化的GST-Sox2融合蛋白,为制备其多克隆抗体奠定了基础,为进一步研究山羊iPS细胞(Induced pluripotent stem cells)创造了条件。
- 郑喜邦杨照海刘平赵华卢晟盛卢克焕毕方方
- 关键词：原核表达蛋白纯化山羊
- 氦氖激光麻醉对犬心肾功能的影响
- 2009年
- 杨照海赵华郑喜邦杨丰利
- 关键词：临床麻醉氦氖激光肾功能麻醉方法病畜
