贾世海
- 作品数：7 被引量：24H指数：4
- 供职机构：中国科学院上海生命科学研究院植物生理生态研究所更多>>
- 发文基金：上海市科学技术发展基金国家重点基础研究发展计划上海市科学技术委员会科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学更多>>
- 重组NIS基因腺相关病毒的制备及其在甲状腺癌细胞系表达被引量：2
- 2005年
- 目的探讨钠碘同向转运体(NIs)基因介导的甲状腺癌基因治疗的可行性。方法构建腺相关病毒载体质粒pGA—NIS,并采用磷酸钙沉淀法制备重组NIs基因的腺相关病毒rAAV—NIs,体外感染甲状腺癌细胞系FTc—133、8505(:后,通过免疫荧光检测被感染细胞的NIs蛋白表达,并通过摄碘实验及Na(;10。摄碘抑制实验验证其表达的NIs蛋白功能和特性。结果成功制备了重组NIs基因的rAAV—NIs,其感染肿瘤细胞所表达的NIS蛋白位于细胞膜上,且具有介导碘摄取的功能,以及被Na(:10。抑制的特性,表明与正常甲状腺细胞的NIS具有相同的功能和特性。感染细胞的碘摄取较未感染细胞明显增高。结论rAAV—NIs能介导甲状腺癌细胞的碘摄取.为甲状腺癌NIS基因介导的基因治疗提供了实验依据。
- 张一帆李彪尤蓓尹桂芝贾世海杨卉朱承谟
- 关键词：钠碘转运体碘放射性同位素NIS基因甲状腺细胞腺相关病毒癌细胞系
- 杆状病毒介导NIS基因放射治疗甲状腺癌的实验研究被引量：7
- 2004年
- 目的探讨重组钠碘同向转运体(NIS)基因杆状病毒介导甲状腺癌细胞放射性碘治疗的可行性。方法构建杆状病毒载体质粒(pFBNIS)并制备重组NIS杆状病毒(BacNIS),体外感染甲状腺癌细胞,通过免疫荧光检测NIS蛋白的表达,通过动态摄碘及NaClO4摄碘抑制实验观察表达蛋白的功能和特性;进行131I杀伤细胞的克隆形成实验。结果成功构建了重组NIS杆状病毒,受巨细胞病毒(CMV)极早期基因启动子调控;BacNIS体外感染的甲状腺癌细胞表达的NIS蛋白具有摄碘功能和NaClO4抑制的特性;BacNIS感染的肿瘤细胞可被131I有效杀伤。结论BacNIS是介导肿瘤细胞摄碘的有效方法,为杆状病毒介导NIS基因治疗失分化甲状腺癌转移灶提供依据。
- 张一帆李彪赵龙尤蓓尹桂芝贾世海朱承谟
- 关键词：杆状病毒钠碘转运体基因疗法碘放射性同位素
- 杆状病毒介导内皮抑素抗兔动脉粥样硬化作用被引量：1
- 2005年
- 目的研究分泌型重组杆状病毒介导内皮抑素体内抗动脉粥样硬化的作用。方法采用髂动脉内膜剥脱联合高脂喂养法建立兔髂动脉粥样硬化模型。造模后第2周,对照组和实验组分别肌肉注射空载杆状病毒rBacGFP和携带人内皮抑素基因的分泌型重组杆状病毒rBachEndo各1×109pfu,比较治疗前后肝肾功能变化。于治疗2周后处死动物,取病变部位血管观察其病理学改变。结果肝肾功能检测结果表明,rBachEndo治疗未发生肝肾毒性反应;组织学观察显示,治疗2周后,病变血管内膜增厚和管腔狭窄程度较对照组显著减轻,且内膜新生血管明显减少。结论分泌型重组杆状病毒rBachEndo通过介导兔体内骨骼肌分泌内皮抑素,有效抑制动脉粥样硬化斑块生长,且安全性高。
- 尤蓓李彪沈卫峰陆林尹桂芝张一帆赵龙贾世海于金德
- 关键词：杆状病毒内皮抑素动脉粥样硬化
- 家蚕TCTP基因的克隆、分析及其表达被引量：3
- 2007年
- 【目的】在家蚕基因表达谱研究中鉴定了近4万个特异的SAGE标签,为了研究这些标签所对应基因的功能,选择了其中一个SAGE标签,探索这个SAGE标签对应的基因序列,表达特征以及相关的功能。【方法】在SAGE结合GLGI结果的基础上,利用5’RACE获得基因的全长,根据不同物种间该基因的同源性来构建系统发生树,通过PCR检测该基因在家蚕不同时期、不同组织中的表达特征,并在原核表达系统中表达该基因。【结果】从cDNA中获得了家蚕TCTP基因的全长序列,构建了不同物种间TCTP的系统发生树,PCR结果表明TCTP基因在家蚕的各个时期、各个组织中都稳定的表达,并且成功的在原核表达系统中表达了该基因。【结论】从cDNA中获得了TCTP基因的全长序列,并且成功在原核系统中表达,证明了通过笔者的实验方法能够获得新的基因;系统发生树显示亲缘性越近的物种TCTP间的同源性越高;家蚕TCTP基因在家蚕生命的各个时期、各个组织都有重要的生物学功能;这些工作为进一步研究其具体功能奠定了基础。
- 周博黄健华贾世海张勇黄勇平
- 关键词：家蚕TCTP同源性系统发生树原核表达
- 家蚕α淀粉酶基因的多态性研究被引量：4
- 2006年
- 【目的】从分子水平研究不同家蚕品种间淀粉酶基因多态性差异,为家蚕的育种选择和遗传进化研究提供有力的证据。【方法】根据网上基因数据库中的家蚕α淀粉酶基因序列(序列号:U07847),在第4和第5外显子区设计了一对特异性引物,在1个镇江野蚕和6个不同的家蚕品种基因组内进行PCR扩增,发现了该基因区域在不同品种间的多态现象。【结果】根据所得基因测序结果信息,用Clustalx软件进行分析并构建了分子系统树。其聚类结果在一定程度上也比较符合家蚕地理和化性的分布,而且镇江野蚕和家蚕品种距离较远。【结论】家蚕淀粉酶是一个为家蚕的起源和进化密切相关的分子标记基因,值得更深入的研究和探讨。
- 黄健华贾世海张勇李木旺刘文彬苗雪霞黄勇平
- 关键词：家蚕淀粉酶基因分子系统树
- 重组杆状病毒载体在哺乳动物细胞中的表达被引量：4
- 2004年
- 目的 探讨重组杆状病毒作为哺乳动物基因转导载体的可行性及其转导特点。方法 应用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统制备重组杆状病毒Bac-GFP,以不同MOI的病毒和不同终浓度丁酸钠感染各哺乳动物细胞系。通过荧光倒置相差显微镜和流式细胞仪观察检测细胞转导率和绿色荧光蛋白(GFP)表达强度。结果 发现HEK293细胞中,Bac-GFP转导率和GFP表达强度随着MOI和丁酸钠浓度的提高而显著增高(P<0.01),报告基因GFP的表达第2d最高,至少可持续9d。Bac-GFP可感染不同种属不同组织的哺乳动物细胞系,但转导率有差异。结论 重组杆状病毒可以用于体外基因转导。
- 尤蓓李彪陆盈曹文俊尹桂芝张一帆赵龙贾世海于金德
- 关键词：重组杆状病毒基因转导丁酸钠哺乳动物细胞钠浓度
- 利用昆虫杆状病毒表达SARS冠状病毒的刺突蛋白和膜蛋白被引量：4
- 2006年
- SARS冠状病毒是人的严重急性呼吸综合征的病原体。对其他种类冠状病毒的研究结果显示,刺突蛋白(S蛋白)和膜蛋白(M蛋白)是病毒主要的结构蛋白。重组M蛋白和S蛋白可被用来作为抗原检测冠状病毒的感染和制备疫苗。这两个蛋白质分别被克隆并重组到昆虫杆状病毒基因组中,利用重组杆状病毒感染昆虫细胞来表达重组M蛋白和S蛋白,并对M蛋白进行了细胞内定位,融合蛋白的绿色荧光暗示了该蛋白质定位在细胞膜上。
- 贾世海周博吴峻李木旺潘敏慧鲁成苗雪霞黄勇平
- 关键词：冠状病毒刺突蛋白膜蛋白昆虫杆状病毒
