袁春燕
- 作品数：25 被引量：93H指数：6
- 供职机构：青岛大学医学院附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山东省教委基金青岛市公共领域科技支撑计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 视网膜缺血再灌注损伤中WTp53蛋白、CyclinD1 表达的研究及bFGF对其的影响被引量：2
- 2005年
- 目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在大鼠视网膜缺血再灌注损伤(RIRI)中的治疗作用及机制。方法将28只Wistar大鼠随机分为正常组、缺血组和bFGF治疗组,其中后两组又按再灌注时间不同分为再灌注后1、6、12、24、48和72h6个时间段。通过前房穿刺加压法制作成RIRI动物模型,并在以bFGF(治疗组)或平衡盐溶液(缺血组)玻璃体腔注射后按不同时段处死动物,通过免疫组织化学链酶卵白素-生物素复合体(SABC)法检测各时段视网膜组织中野生型p53蛋白(WTp53)和细胞周期蛋白D1(CyclinD1)的表达变化。结果缺血组视网膜在再灌注后6h可发现有WTp53蛋白及CyclinD1的表达,24h达到高峰,48h仍持续强表达,72h表达已明显下降;bFGF治疗组各观察指标变化规律基本与缺血组相似,但表达量相对明显减弱,两组比较,在再灌注6-48h时段差别P值均<0.05,具有统计学意义。结论bFGF可抑制RIRI时WTp53蛋白和CyclinD1在视网膜表达的增高。
- 袁春燕周占宇牛膺筠赵岩松
- 关键词：视网膜WTP53细胞周期蛋白D1
- EPO对糖尿病大鼠视网膜caspases-3、NF-κB和TNF-α表达的影响被引量：6
- 2008年
- 目的研究促红细胞生成素(EPO)对糖尿病(DM)大鼠视网膜组织caspases-3、TNF-α和NF-κB表达的影响,探讨糖尿病视网膜病变(DR)的发病机制。方法采用链脲佐菌素诱导DM,成模后,随机分为DM未治疗组和EPO治疗组,再设亚组。应用SABC法检测EPO对大鼠视网膜组织中caspases-3、NF-κB和TNF-α表达的影响。结果在正常大鼠和DM1个月组,三者均无阳性表达或只呈弱阳性表达,3个月组视网膜中可见阳性表达,多位于神经节细胞层,6个月组可见表达向其他层次扩展。EPO治疗组三者的表达均较同期DM未治疗组下降,3个月和6个月组的表达差异有统计学意义(P<0.05)。结论早期糖尿病视网膜caspases-3、NF-κB和TNF-α的表达上调,三者可能均参与了早期DR的发生,上述结果将为EPO治疗视网膜疾病提供理论基础。
- 于晓牛膺筠王颖立袁春燕赵颖
- 关键词：糖尿病视网膜病变NF-ΚBTNF-Α
- 促红细胞生成素对人视网膜色素上皮细胞氧化损伤的保护作用被引量：9
- 2006年
- 目的探讨促红细胞生成素对过氧化氢氧化损伤人视网膜色素上皮细胞的保护作用及其机制。方法采用600μmol.L-1的过氧化氢造成体外培养的人视网膜色素上皮细胞氧化损伤模型。实验设计分为5组:对照组,过氧化氢模型组,过氧化氢+10 kIU.L-1EPO组,过氧化氢+20 kIU.L-1EPO组和过氧化氢+40 kIU.L-1EPO组。MTT法检测细胞活性,测定细胞内超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量,Annexin V-FITC/PI双染色流式细胞法测定细胞的凋亡率。结果过氧化氢模型组RPE细胞的活性明显降低,不同浓度的EPO药物干预组的细胞活性较模型组明显升高,并随着EPO浓度的升高而升高。过氧化氢模型组RPE细胞SOD活性降低,MDA的含量增加;而EPO药物干预组SOD活性较模型组明显升高,MDA含量减少,差异有显著性。过氧化氢模型组RPE细胞的凋亡率升高,而不同浓度的EPO药物干预组降低RPE的凋亡率,凋亡率随着EPO浓度的升高而降低。结论促红细胞生成素对过氧化氢诱导的人RPE细胞的氧化损伤有保护作用,其机制可能与抑制氧化反应、提高抗氧化酶活性、减少细胞凋亡有关。
- 赵颖牛膺筠周占宇袁春燕张蕾黄琰霞
- 关键词：促红细胞生成素视网膜色素上皮细胞凋亡
- 视网膜缺血再灌注损伤后凋亡相关基因表达的变化被引量：6
- 2006年
- 目的 研究视网膜缺血再灌注损伤（RIRI）中凋亡相关基因野生型p53（WTp53）、bax和bcl-2表达的变化，探讨其作用机制。方法 将28只Wistar大鼠随机分为正常组、缺血组，其中缺血组又分为再灌注后1、6、12、24、48和72h等6个组。建立RIRI动物模型，用免疫组织化学链霉亲和素-生物素过氧化物酶复合物（SABC）法检测再灌注后不同时段视网膜组织中WTp53、bax和bcl-2基因表达的变化。结果 缺血组视网膜再灌注后WTp53、Bax蛋白表达增加，与正常组比较．再灌注6～72h差异有显著意义（F=487．19、281．97，q=11．526～52．401，P〈0．05）。缺血组视网膜再灌注后Bcl-2蛋白表达无明显变化，与正常组比较，差异无显著性（P〉0．05）。结论 缺血再灌注损伤引起WTp53、bax基因在视网膜神经节细胞层、神经纤维层与内核层表达增高；WTp53和bax可能通过诱导或促进神经节细胞凋亡参与了视网膜缺血再灌注损伤的发生。
- 袁春燕牛膺筠张瑞丁玉枝
- 关键词：视网膜再灌注损伤基因,BCL-2WISTAR
- 碱性成纤维细胞生长因子及WTp53在大鼠视网膜缺血再灌注损伤中的作用被引量：1
- 2005年
- 目的:探讨碱性成纤维细胞生长因子(basicfibroblastgrowthfactor,bFGF)在大鼠视网膜缺血再灌注损伤中的作用及其机制。方法:随机将28只大鼠分为正常组和手术组,其中手术组大鼠左眼为缺血再灌注组,右眼为治疗组(玻璃体腔内注射bFGF),观察再灌注后不同时间段1,6,12,24,48,72h视网膜组织中细胞凋亡情况及WTp53的表达变化。前房加压法制作大鼠视网膜缺血再灌注损伤模型。应用末端脱氧核酸转移酶介导的脱氧三磷酸尿苷缺口末端标记(TUNEL)法检测视网膜组织中凋亡细胞数,免疫组织化学SABC法检测视网膜组织中WTp53蛋白的表达。结果:视网膜神经细胞的凋亡出现于再灌注后6h,并逐渐递增,24h达到高峰,48h开始下降,72h组不明显。WTp53蛋白表达改变与凋亡的神经细胞改变基本一致。治疗组各观察指标表达变化规律与缺血再灌注组基本一致,但凋亡细胞数目在6～48h犤6,12,24,48h分别为(358.3±43.4),(859.5±12.0),(1006.5±49.4),(695.7±72.2)个/mm2犦明显低于缺血再灌注组犤(444.8±89.7),(1053.0±96.1),(1254.0±164.8),(891.0±87.2)个/mm2犦(t=2.9131～4.299,P均<0.05);WTp53表达在6～48h缺血再灌注组显著下降(t=3.342～4.781,P<0.05;t=52.586,P<0.01)。结论:WTp53参与视网膜缺血-灌注损伤,促进神经节细胞的凋亡;
- 王红云牛膺筠袁春燕高云霞丁玉枝
- 关键词：WTP53视网膜缺血再灌注损伤凋亡细胞碱性成纤维细胞生长因子转移酶FGF
- 内源性眼内炎一例
- 2007年
- 袁春燕牛膺筠汪晓磊
- 关键词：内源性眼内炎视力光感眼球结膜前房深度房水闪辉前房积脓
- rhEPO对光损伤诱导的RPE细胞凋亡的抑制被引量：4
- 2007年
- 目的研究重组人促红细胞生成素（rhEPO）在人视网膜色素上皮（RPE）细胞光化学损伤中的保护作用及其作用机制，为年龄相关性黄斑变性等的药物治疗和预防提供理论依据。方法取成人ARPE-19细胞株传代培养的2～5代细胞建立光损伤模型，光照12h后再培养24h终止培养，采用AnnexinV—FITC／PI流式双染法检测不同浓度的rhEPO干预治疗前后RPE细胞凋亡的变化；采用酶联免疫吸附实验（enzyme linked immunosorbant assay，ELISA）及免疫组织化学法检测不同浓度的rhEPO干预治疗前后RPE细胞easpase-3及Bcl-2表达的变化；并添加AG490（Jak2激酶抑制剂），探讨人rhEPO对人RPE细胞光化学损伤的保护性作用机制。结果各rhEPO组均可明显减少光化学损伤诱导的人RPE细胞的凋亡，呈浓度依赖性，以40IY·ml^-1EPO组结果最明显，为（4．93±1．45）·ml^-1；在40IU·ml^-1EPO组caspase-3浓度最低，为（0．125±0．029）μg·L^-1；在40IU·ml^-1EPO组Bcl-2表达最高（168．21±3．87）；在加入AG490组，人RPE细胞凋亡增高为（11．29±2．11）·ml^-1；caspase-3浓度增高为（0．362±0．042）μg·L^-1；Bcl-2表达降低。rhEPO抑制凋亡作用均被阻止。结论rhEPO可抑制光化学损伤诱导的人RPE细胞的凋亡，抑制caspase-3的浓度，上调Bcl-2的表达，对人RPE细胞的光化学损伤有保护治疗作用；其保护作用机制主要通过EPO与受体结合后激活Jak2激酶途径完成的。
- 孟岩牛膺筠周占宇袁春燕
- 关键词：光刺激半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶B细胞淋巴瘤/白血病-2基因
- rhEPO对视网膜缺血再灌注损伤大鼠视网膜神经细胞凋亡及Fas、FADD表达的影响被引量：1
- 2009年
- 目的探讨重组人促红细胞生成素（rhEPO）对视网膜缺血再灌注损伤（RIRI）所致视网膜神经细胞凋亡的保护作用及机制。方法将52只Wistar大鼠随机分为对照组4只，不行特殊处理；模型组和观察组各24只，均通过前房穿刺加压法制成RIRI模型，并分别于缺血前24h腹腔注射生理盐水和rhEPo，于1～72h应用末端脱氧核酸转移酶介导的脱氧三磷酸尿苷缺口末端标记（TUNEL）法检测视网膜神经细胞凋亡，采用过氧化物酶标记的sP免疫组化方法检测Fas、Fas相关蛋白（FADD）表达。结果对照组未见细胞凋亡及Fas、FADD表达。观察组与模型组视网膜神经细胞凋亡及Fas、FADD表达均出现于再灌注后6h，24h达到高峰，48h开始下降，其中观察组细胞凋亡在12、24、48h明显低于模型组（P〈0．05），Fas、FADD表达在6、12、24h明显低于模型组（P〈0．05）。结论rhEPO可明显减轻RIRI所致大鼠视网膜神经细胞凋亡，可能机制为下调Fas、FADD表达。
- 赵岩松牛膺筠曹永亮袁春燕
- 关键词：重组人促红细胞生成素细胞凋亡
- 低氧诱导促红细胞生成素及其受体在人胚胎RPE细胞中的表达被引量：7
- 2006年
- 目的研究促红细胞生成素(EPO)及其受体(EPOR)在人视网膜色素上皮(RPE)细胞化学低氧损伤中的表达及意义。方法原代培养人胚胎RPE细胞,应用不同浓度氯化钴造成RPE细胞化学缺氧,应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测RPE细胞增生活力变化,采用免疫组织化学法检测EPO和EPOR在RPE细胞中的表达,应用W esternb lot法检测EPO和EPOR蛋白的表达变化。结果不同浓度的CoC l2均促进细胞生长。正常人胚胎RPE细胞检测到EPO和EPOR的弱表达,CoC l2处理组检测到EPO和EPOR的强表达。结论化学缺氧促进人胚胎RPE细胞的增生,EPO及其受体EPOR可能在这个过程中起重要作用。
- 赵颖牛膺筠黄琰霞袁春燕徐静
- 关键词：视网膜色素上皮细胞促红细胞生成素受体氯化钴
- 多西环素抑制视网膜母细胞瘤血管生成拟态的体外研究及组织学观察被引量：2
- 2009年
- 目的研究多西环素对人视网膜母细胞瘤（RB）细胞体外血管生成拟态（VM）和细胞增生的抑制效应。方法建立人RB细胞株三维培养系统，缺氧诱导后观察RB细胞能否形成血管网状结构及其特点；用5～20mg／L不同浓度多西环素处理RB细胞，过碘酸雪夫氏（PAS）染色观察对RB细胞体外血管生成拟态的抑制效应；噻唑蓝（MTT）比色法检测多西环素对RB细胞增生活性的变化；逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）技术检测不同条件下基质金属蛋白酶2（MMP-2）、基质金属蛋白酶9（MMP-9）mRNA的相对表达量；收集12例RB石蜡包埋样本进行CD34／PAS免疫组织化学双重染色，观察RB中的血管生成拟态。结果RB细胞在三维培养系统形成管网状的拟态血管；5～20mg／L多西环素能抑制RB细胞体外管状结构数量。MTT检测显示多西环素加药组3、5、7d的吸光度A[旧称光密度（OD）]值与对照组比较差异均有统计学意义（t=15．320，P〈0．01），且不同浓度的多西环素组之间细胞的增生抑制率差异亦有统计学意义（F=9．442，11．729，12．120；P〈0．05），其浓度与细胞的增生呈负相关（r=-0．924，P〈0．01），氯化钻缺氧组MMP-2、MMP-9的mRNA表达量明显增强，各浓度多西环素加药组显著低于氯化钴缺氧组（t=16．469，P〈0．01）。在12例RB组织标本中可见CD34阴性PAS阳性的瘤细胞围成管道样结构，部分管腔中可见红细胞。结论多西环素能够抑制RB体外血管生成拟态形成和细胞的增生，其机制可能是通过抑制MMP-2、MMP-9mRNA的表达而实现。
- 刘夫玲牛膺筠袁春燕周玮琰杨莹
- 关键词：基质金属蛋白酶9基质金属蛋白酶2血管生成拟态
