蔡晶
- 作品数:21 被引量:111H指数:5
- 供职机构:华中科技大学同济医学院附属协和医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金湖北省自然科学基金湖北省卫生厅科研基金更多>>
- 相关领域:医药卫生化学工程更多>>
- Livin基因短发夹状RNA对子宫颈癌Siha细胞增殖迁移的影响被引量:7
- 2012年
- Livin基因作为近年来发现的一种人类凋亡抑制蛋白(inhibitorofapoptosisprotein,IAP),低表达于健康成人组织和胚胎组织中,而高表达于包括黑色素瘤、淋巴瘤、结肠癌、前列腺癌、宫颈癌、乳腺癌等^[1-3]多种类型的肿瘤组织中。
- 于利利吴莉英蔡晶黄在菊王泽华
- 关键词:LIVIN基因短发夹状RNASIHA迁移胚胎组织
- 靶向EZH2基因的shRNA干扰对人卵巢癌细胞Drosha基因表达的影响
- 2013年
- 目的:探讨RNA干扰沉默果蝇zeste基因增强子同源物2(enhancer of zeste homolog 2,EZH2)基因对卵巢癌细胞株A2780的Drosha基因表达的影响。方法:获得稳定表达EZH2短发夹状RNA(short hairpin RNA,shRNA)的人卵巢癌细胞株A2780-shEZH2,实时定量PCR法(qRT-PCR)和免疫印记法(Western blot)检测转染株的Drosha基因表达。结果:以未转染组A2780细胞Drosha的表达水平为100%,EZH2-shRNA转染组A2780-shEZH2细胞Drosha的mRNA及蛋白水平分别上升(53.02±4.32)%和(51.26±1.35)%,与未转染组比较差异有统计学意义(P<0.001)。结论:沉默EZH2基因可以上调Drosha基因的表达。
- 况燕蔡晶曹晋韩庆李桃王泽华
- 关键词:EZH2基因MICRORNA卵巢肿瘤
- 信号诱导增殖相关蛋白1和16、18型人乳头瘤病毒E6蛋白在宫颈癌中的表达及临床意义被引量:2
- 2011年
- 目的:探讨信号诱导增殖相关蛋白1(SIPA1)和16、18型人乳头瘤病毒E6蛋白(HPV16/18E6)在宫颈癌中的表达及其与临床病理之间的关系。方法:Western blot检测宫颈癌C33A、HT3、SiHa、HeLa和CaSki细胞株中HPV16/18E6和SIPA1蛋白表达;免疫组织化学Envi-sion法检测正常宫颈组织(40例)和宫颈癌组织(174例)石蜡标本中HPV16/18E6和SIPA1蛋白;分析SIPA1和HPV16/18E6相互之间及其与宫颈癌盆腔淋巴结转移之间的关系。结果:宫颈癌细胞系中SIPA1与HPV16/18E6表达呈负相关。SIPA1在正常宫颈组织和宫颈癌组织中阳性率分别为87.5%和58.6%,差异有高度统计学意义(χ2=11.78,P=0.001);SIPA1蛋白在有和无盆腔淋巴结转移时阳性率分别为19.0%和71.2%,差异有高度统计学意义(χ2=21.45,P=0.000),且SIPA1阴性者发生淋巴结转移风险高于阳性者(OR=5.011,95%CI2.311~10.866,P<0.01)。HPV16/18E6在正常宫颈组织和宫颈癌组织中的阳性率分别为30.0%和79.3%,差异有高度统计学意义(χ2=37.72,P=0.000);HPV16/18E6在有和无淋巴结转移时阳性率分别为97.6%和73.5%,差异有高度统计学意义(χ2=11.31,P=0.001),HPV16/18E6阳性者淋巴结转移风险高于阴性者(OR=14.794,95%CI1.960~111.634,P<0.01)。宫颈癌组织中SIPA1与HPV16/18E6蛋白呈负相关(r=-0.249,P<0.001)。结论:SIPA1蛋白表达与HPV感染有关,HPV16/18E6有抑制SIPA1表达的作用,SIPA1在抑制宫颈癌的淋巴结转移中发挥着重要作用,可作为宫颈癌盆腔淋巴结转移的早期预测因子。
- 李东林蔡晶况燕曹晋王泽华
- 关键词:宫颈癌肿瘤转移
- 人卵巢癌细胞EZH2基因下调对E-钙粘蛋白表达的影响被引量:4
- 2013年
- 目的探讨果蝇zeste基因增强子同源物2(enhancer of zeste homolog 2,EZH2)与E-钙粘蛋白(E-cadherin)在卵巢癌中的关系。方法采用短发夹状RNA的真核表达载体稳定转染人卵巢癌细胞C13*,建立稳定沉默EZH2基因的人卵巢癌细胞系shEZH2-C13*,采用Real-time PCR、Western blot和细胞免疫荧光方法检测EZH2下调后E-钙粘蛋白在mRNA水平和蛋白水平表达的变化,了解EZH2对E-钙粘蛋白表达的影响。结果 shEZH2质粒表达载体转染C13*获得的稳定转染细胞株shEZH2-C13*中,相对于未转染组,EZH2的mRNA和蛋白水平分别下降了(67.33±6.43)%和(71.21±5.77)%,差异有统计学意义(均P<0.05)。在稳定沉默EZH2的细胞中,E-钙粘蛋白的mRNA水平和蛋白水平相对于未转染组分别升高(52.33±19.03)%和(60.45±3.28)%,差异有统计学意义(均P<0.05)。细胞免疫荧光检测结果显示,EZH2沉默的细胞中E-钙粘蛋白表达明显高于未转染组,而空载体转染组没有明显变化。结论成功构建EZH2shRNA表达载体,获得EZH2基因稳定沉默的人卵巢癌细胞系shEZH2-C13*,同时发现在卵巢癌细胞中EZH2下调能升高E-钙粘蛋白的表达水平,推测EZH2可能通过催化H3K27三甲基化,介导DNA甲基化或组蛋白甲基化,抑制E-钙粘蛋白转录,进一步触发其下游事件,影响卵巢癌的侵袭和转移。
- 王俊杰蔡晶高艳萍周隽丁慧李桃王泽华
- 关键词:卵巢癌EZH2E-钙粘蛋白表观遗传学
- 人卵巢癌顺铂耐药细胞EZH2基因沉默对Drosha基因表达的影响
- 2012年
- 目的探讨RNA干扰沉默果蝇zeste基因增强子同源物2(EZH2)基因对卵巢癌获得性耐药细胞株A2780/DDP的Drosha基因表达的影响。方法获得稳定表达EZH2短发夹状RNA(shRNA)的人卵巢癌获得性耐药细胞株A2780/DDP-shEZH2,实时荧光定量PCR法和免疫印记法检测转染株的Drosha基因表达。结果以未转染组A2780/DDP细胞Drosha的表达水平为100.00%,EZH2-shRNA转染组A2780/DDP-shEZH2细胞Drosha的mRNA及蛋白水平分别上升(53.33±9.24)%和(51.28±3.25)%。结论沉默EZH2基因可以上调Drosha基因的表达。
- 况燕蔡晶李桃李东林周隽王泽华
- 关键词:EZH2基因
- Drosha基因在人卵巢癌顺铂耐药细胞中的表达研究被引量:1
- 2012年
- 目的探讨Drosha基因和卵巢癌顺铂耐药的关系。方法分别采用实时定量PCR和免疫印迹法检测Drosha基因mRNA及其蛋白在A2780/DDP及A2780细胞中表达的差异。结果 A2780/DDP细胞中Drosha基因mRNA及其蛋白的表达量分别是A2780细胞表达量的(56.79±1.65)%和(50.16±1.34)%,两者比较差异均有统计学意义(P<0.001)。结论 Drosha基因在A2780/DDP细胞中明显下调,提示Drosha基因和卵巢癌顺铂耐药相关。
- 况燕蔡晶李桃李东林周隽王泽华
- 关键词:卵巢肿瘤耐药性
- 上皮性卵巢癌患者组织中MiR-126的表达及其抑癌基因作用机制
- 曹晋蔡晶肖满王泽华
- 微小RNA27a在卵巢上皮性癌紫杉醇耐药细胞中的表达及其与耐药的关系被引量:12
- 2010年
- 目的研究微小RNA27a(miR-27a)在卵巢上皮性癌(卵巢癌)紫杉醇耐药细胞中的表达及其与耐药的关系。方法采用实时PCR技术检测卵巢癌A2780细胞及其紫杉醇耐药细胞A2780/Taxol中miR-27a的表达水平。利用脂质体lipofectamine2000将成熟miR-27a的模拟物、阻遏物及阴性对照(NC)转染A2780和A2780/Taxol细胞,实时PCR技术检测转染细胞中MDR1基因mRNA的表达;蛋白印迹法检测转染细胞中P一糖蛋白(P—gp)和同源结构域相关的蛋白激酶2(HIPK2)蛋白的表达;采用四甲基偶氮唑蓝比色法、流式细胞仪分别检测紫杉醇作用于转染后细胞的增殖情况及细胞凋亡率。结果(1)miR-27a在A2780/Taxol细胞中高表达,与A2780细胞相比表达水平增高2.2倍,差异有统计学意义(P〈0.05)。(2)转染miR-27a阻遏物后,A2780/Taxol细胞中MDRlmRNA的表达水平为0.61±0.14,与转染NC细胞(表达水平为1.00)比较下降39%,差异有统计学意义(P〈0.05);P.gP蛋白的表达水平为(26±5)%,HIPK2蛋白的表达水平为(30±6)%,分别与转染NC细胞的P-gp蛋白[(43±7)%]和HIPK2蛋白[(19±4)%]的表达水平比较,差异均有统计学意义(P〈0.05);A2780/Taxol细胞对紫杉醇的敏感性增加,半数抑制浓度(IC50)为0.5μmo]/L,与转染Nc细胞(Ic。为6.8Iμmol/L)比较,差异有统计学意义(P〈0.05);细胞凋亡率明显升高,达(32.5±3.6)%,与转染NC细胞的凋亡率(5.6±2.1)%比较,差异有统计学意义(P〈0.05)。(3)转染miR-27a模拟物后,A2780细胞中MDR1 mRNA的表达水平为2.21±0.11,与转染NC细胞(表达水平为1.00)比较升高121%,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论miR-27a在卵巢癌紫杉醇耐药细胞中高表达,其可能通过调控靶基因HIPK2,间接调节MDR1及P—gP的表达和功能而参与耐药。
- 李智敏胡沙肖兰王静蔡晶于利利王泽华
- 关键词:卵巢肿瘤紫杉酚微RNAS肿瘤
- 抑制卵巢癌A2780/Taxol细胞hsa-miR-27a表达对紫杉醇敏感性影响的研究被引量:1
- 2010年
- 目的:研究抑制卵巢癌A2780/Taxol细胞hsa-miR-27a表达对紫杉醇敏感性的影响。方法:用浓度递增法建立卵巢癌耐紫杉醇细胞系A2780/Taxol;Stem-loop real-time PCR技术检测A2780/Taxol及亲本细胞A2780中hsa-miR-27a表达水平;利用脂质体Lipofectamine2000将化学合成的miR-27a抑制物及阴性对照(Negative Control,NC)转染A2780/Taxol细胞;分别用Real-time PCR和蛋白印迹法技术检测MDR1mRNA和P-glyco-protein(P-gp)蛋白表达;MTT检测A2780/Taxol对紫杉醇敏感性的变化;流式细胞术检测细胞内P-gp荧光底物罗丹明123(Rh-123)的荧光强度。结果:(1)成功建立了卵巢癌耐紫杉醇细胞系A2780/Taxol;(2)miR-27a在A2780/Taxol细胞中高表达,与A2780细胞相比,表达增高2.2倍。(3)P-gp蛋白在A2780/Taxol细胞中高表达,在A2780细胞中未检测出其表达;(4)转染miR-27a抑制物后,A2780/Taxol细胞的MDR1mRNA和P-gp表达下降,与转染NC组相比,P-gp表达降低36%;对紫杉醇的敏感性增加,IC50为0.53μmol/L,与转染NC组IC506.8μmol/L相比,有明显差异;(5)流式细胞仪结果显示,细胞内Rh-123荧光强度在转染抑制物的A2780/Taxol细胞为5.10±0.35,与A2780/Taxol细胞的2.95±0.39和转染NC的A2780/Taxol细胞的3.30±0.45相比,差异均有统计学意义。结论:hsa-miR-27a在卵巢癌耐紫杉醇A2780/Taxol细胞中高表达,可能通过间接调节P-gp的表达和功能,参与耐药。抑制miR-27a表达后,可以增加A2780/Taxol细胞对紫杉醇的敏感性,部分逆转耐药。
- 李智敏王静胡沙吴莉英蔡晶于利利王泽华
- 关键词:细胞株P-糖蛋白药物耐受多药耐药相关蛋白紫杉醇
- VEGF及基质金属蛋白酶与卵巢癌临床分期的相关性分析被引量:21
- 2019年
- 分析血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)及基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)与卵巢癌临床分期及淋巴转移的相关性。以本院2006年1月至2009年4月期间诊治的卵巢癌患者为研究对象,采用酶联免疫吸附测定法分析140例不同临床分期卵巢癌患者(卵巢癌组,n=140)血清中VEGF、MMP-2、MMP-9及TIMP-1水平的变化。以本院同期健康体检者为对照(对照组,n=90)。结果显示:与对照组比较,卵巢癌组患者血清中VEGF等因子水平均明显升高(P<0.05),且随着临床分期的增加,上述因子水平明显升高(P<0.05);与未发生淋巴转移组患者相比,发生淋巴转移组患者的上述因子水平均明显升高(P<0.05);且上述因子与患者临床分期呈明显的正相关(相关系数分别为0.446、0.309、0.354、0.411和0.432)。因此,VEGF、MMP-2、MMP-9及TIMP-1与卵巢癌患者临床分期及淋巴转移密切相关。
- 张璐芳蔡晶王泽华
- 关键词:血管内皮生长因子基质金属蛋白酶卵巢癌淋巴转移