苏运贞
- 作品数：7 被引量：9H指数：2
- 供职机构：暨南大学生命科学技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金广州市属高校科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- GS介导RNase P对人巨细胞病毒ul54基因mRNA的切割作用被引量：1
- 2006年
- 引导序列(Guide Sequences,GSs)是与mRNA靶序列互补并引导RNase P切割的小RNA片段。设计与人巨细胞病毒HCMV(Human Cytomegalovirus,HCMV)ul54基因D片段mRNA序列互补的GS,将其共价结合到大肠杆菌来源RNase P催化核心M1 RNA,构建成T7-M1GS核酶。通过对ul54基因D片段转录产物体外切割实验和将T7-M1GS构建在含有U6启动子的逆转录病毒载体,与构建在真核载体pEGFP-N1的ul54基因D片段共转染人宫颈癌细胞系HeLa的体内切割实验,证实该核酶具备对ul54基因D片段mRNA的特异切割能力,为利用核酶治疗HCMV感染提供实验基础。
- 李弘剑黎景光苏运贞陈浩军李月琴叶飞舟张欣周天鸿
- 关键词：RNASE荧光定量PCR
- 以HCMVUL54为靶基因构建M1GS真核表达载体及两个M1GS体内活性的检测
- 源自大肠杆菌的RNaseP是促使ptRNA5’端成熟的天然核酶。其催化核心RNA亚单位(M1RNA)能在缺乏辅助单位C5蛋白情况下,发挥切割作用。RNaseP是结构识别酶,能与mRNA形成RNaseP识别的底物形式的小片...
- 苏运贞
- 关键词：体外切割病毒基因反义RNA技术
- 文献传递
- 异基因造血干细胞移植后人巨细胞病毒感染临床毒株UL54基因的克隆及序列分析被引量：2
- 2005年
- 目的 研究异基因造血干细胞移植(AlloHSCT)后感染人巨细胞病毒(HCMV)临床病毒株UL54基因的克隆与鉴定。方法 从异基因造血干细胞移植后感染HCMV的患者体内分离出HCMV临床毒株,根据GenBank提供的实验室标准病毒株HCMVAD169UL54基因DNA全序列及有关文献,从该临床毒株DNA中扩增分离出UL54基因片段,并克隆入pEGM3Z载体。对重组体pEGM3Z UL54进行测序鉴定,并进行初步的序列分析。结果 从临床病毒株中扩增出约3728bp的片段,克隆产物经琼脂糖凝胶电泳及直接测序鉴定,证实为HCMVUL54基因,其序列保守区域与GenBank报道AD169基本一致,但在第519、618、723、910、1188、1641、2070、2278、2279、2442、3140等11个位点发生碱基突变,涉及到编码氨基酸C304R、T760N、Y1047C、R1054K等位点发生改变,其中T760N为UL54保守区域改变。结论 成功克隆出AlloHSCT后感染野生型人巨细胞病毒的UL54基因,初步的序列分析证实其存在11个碱基发生突变,并导致编码产物4个氨基酸位点发生改变。
- 田传军李月琴王波叶铁真张纯青苏运贞何华坤周天鸿
- 关键词：异基因造血干细胞移植人巨细胞病毒
- 人重组核苷二磷酸激酶α亚基对MCF-7/S的影响被引量：2
- 2003年
- 软琼脂集落形成实验检测rhNDPK -α对乳腺癌细胞株MCF - 7 S集落形成率的影响 ,结果表明 ,MCF - 7 S集落形成率随rhNDPK -α浓度增高下降 ,提示rhNDPK -α可能具有抑制乳腺癌细胞株MCF - 7 S转移作用 ;MTT法检测rhNDPK -α分别联用丝裂霉素C、5 -氟尿嘧啶和千金藤碱对MCF - 7 S的增殖影响 ,结果显示 ,rhNDPK -α分别联用三种化疗物与这三种化疗药物单独作用于MCF - 7 S无明显差异 (P >0 0 5 ) ,提示rhNDPK -α对丝裂霉素C、5 -氟尿嘧啶和千金藤碱没有增敏作用。
- 苏运贞王一飞张美英邢少璟钱垂文罗勇李久香熊盛黄立
- 关键词：Α亚基乳腺癌细胞株增敏作用化疗药物
- 基于BAC重组酶系统构建奶牛多位点基因打靶载体的研究
- 以奶牛为研究对象,以其重复的rRNA基因间的间隔序列为靶位点,基于BAC重组酶系统构建多位点基因打靶载体,为建立体内多位点基因打靶技术获得关键材料.首先构建BAC-TDN筛选载体,然后构建pYLVS-GD表达载体.将BA...
- 唐冬生蒋泓苏运贞李月琴张欣李芳周天鸿
- 关键词：基因打靶细菌人工染色体奶牛
- 文献传递
- RNase P对人巨细胞病毒mRNA的体外靶定切割研究被引量：2
- 2004年
- 目的 探讨核酶P对HCMVUL97mRNA的体外切割能力。方法 以人巨细胞病毒 (humancytomegalovirus ,HCMV)磷酸转移酶mRNA序列为靶设计externalguidesequences(EGS) ,共价结合到大肠杆菌来源M 1RNA中 ,构建成M 1GS-T5核酶。对其进行UL97基因亚克隆片段转录产物的体外切割实验。结果 该核酶在一定离子浓度下具对UL 97mRNA片段产生特异切割能力。结论 新构建得到的核酶MIGS -T5具特异性切割活性 ,可发展为一种抗病毒试剂。
- 何华坤李月琴王波张文军苏运贞周天鸿
- 关键词：人巨细胞病毒磷酸转移酶
- 人巨细胞病毒临床低传代病毒株UL97基因的克隆与分析被引量：2
- 2005年
- 分离人巨细胞病毒(HCMV)临床低传代GZ02病毒株,并根据GenBank提供的实验室标 准病毒株HCMV AD169磷酸转移酶基因UL97 DNA序列及有关文献设计引物,从HCMY GZ02病毒 株基因组DNA中通过PER扩增UL97基因,并克隆至pGEM3Z质粒载体．重组质粒经测序鉴定,发 现HCMV GZ02病毒株UL97基因序列保守区域与HCMV AD169 UL97长度完全一致,但发生G205A、 G761A、T823C、T1173C、T1282C、T1334C、T2106C等7个位点的碱基突变,涉及到编码氨基酸E69K, S275P,CA28R和F445S位点发生改变．
- 王波李月琴田传军张纯青苏运贞何华坤周天鸿
- 关键词：人巨细胞病毒野生型突变克隆
