石碧珠
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- 百日咳杆菌腺苷酸环化酶毒素基因的克隆及原核表达
- 2010年
- 目的克隆百日咳杆菌腺苷酸环化酶毒素(CyaA,ACT)基因,表达并纯化重组CyaA蛋白。方法从百日咳杆菌CS株的基因组DNA中PCR扩增CyaA编码基因,克隆入载体pET30a,构建重组原核表达质粒pET30a/cyaA,转化感受态大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达。表达的重组蛋白经8mol/L尿素变性、透析复性、DEAE阴离子交换柱纯化后,采用Western blot法鉴定其反应原性。结果重组原核表达质粒pET30a/cyaA经PCR、双酶切及测序证明构建正确;表达的重组蛋白主要以包涵体形式存在,表达量约占菌体总蛋白的20%;纯化的重组蛋白纯度达90%左右,可与全细胞百日咳疫苗和无细胞百日咳疫苗免疫血清结合。结论已成功克隆了百日咳杆菌cyaA基因,并在大肠杆菌中表达了重组CyaA蛋白,为进一步开展CyaA的应用研究奠定了基础。
- 石碧珠张华捷孟民杰张庶民
- 关键词：百日咳杆菌克隆
- CpG ODN增强乙肝疫苗免疫反应的研究
- 2009年
- 目的研究人工合成的CpG ODN对乙肝表面抗原的免疫增强效应,评价CpG ODN的佐剂效应。方法将不同剂量特定的CpG ODN与乙肝表面抗原联合免疫小鼠,用ELISA检测小鼠乙肝表面抗体的滴度。结果CpG ODN联合乙肝表面抗原免疫小鼠,在短期检测中,高剂量组能较快的达到检测阈,各剂量组间抗体滴度检测值差异有显著性(P<0.05),在长期检测中,各剂量组间抗体滴度检测值差异有显著性(P<0.05),检测值随CpG剂量的增高而增大。结论CpG ODN增强乙肝表面抗原的免疫反应短期和长期都具有剂量效应。
- 戴帆董斌郭晓磊石碧珠方丽娟莫家琳田素娟孟民杰
- 关键词：CPGODN乙肝表面抗原免疫佐剂
- 百日咳杆菌腺苷酸环化酶毒素的功能性应用研究进展
- 2010年
- 石碧珠孟民杰张华捷
- 关键词：腺苷酸环化酶百日咳杆菌毒素免疫调节保护性抗原致病因子
- 百日咳杆菌腺苷酸环化酶毒素基因的克隆及原核表达
- 目的：克隆百日咳腺苷酸环化酶毒素(ACT，cyaA)基因，并进行表达和纯化，为进一步开展其应用研究奠定基础。
方法：从百日咳杆菌CS株的基因组DNA中PCR扩增目的片段，克隆人质粒pET30a，构建表达载体pE...
- 石碧珠张华捷孟民杰张庶民
- 关键词：百日咳杆菌原核表达免疫印迹基因克隆
- 文献传递
