王远
- 作品数：5 被引量：11H指数：2
- 供职机构：第四军医大学西京医院更多>>
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- 下调Homer-1b/c基因对机械性损伤神经元存活率的影响被引量：2
- 2010年
- 目的既往研究表明,Homer-1b/c在神经元损伤后恒定表达,但下调Homer-1b/c能否对损伤的神经元具有保护作用尚不清楚,这也是本实验中待研究的问题。方法采用RNA干涉(RNAi)技术,抑制神经元Homer-1b/c基因及蛋白表达。通过Western blot法分析神经元转染小干扰RNA(siRNA)后Homer-1b/c基因抑制效果。建立神经元机械性损伤模型,通过细胞存活率、乳酸脱氢酶(LDH)活性测定,研究下调Homer-1b/c基因对神经元损伤的保护作用。结果 siRNA转染神经元后36 h,Homer-1b/c mRNA和蛋白质表达明显被抑制。siRNA转染组神经元损伤后细胞存活率明显比阴性对照组、空载体组高(P<0.05)。阴性对照组、空载体组和siRNA转染组神经元损伤前培养液LDH性无统计学差异(P>0.05),机械性损伤后24 h,与阴性对照组及空载体组比较,siRNA转染组LDH活性明显降低(P<0.05)。结论 Homer-1b/c siRNA转染神经元效率较高,基因抑制效果显著。降低Homer-1b/c蛋白表达能够减少机械性损伤后继发性神经元损害,对神经元具有一定的保护作用。
- 王远费舟黄卫东张磊刘文博陈涛李栋马义辉罗鹏
- 关键词：RNA干涉
- Homer1基因在人脑胶质瘤中的表达及意义
- 2009年
- 背景与目的:Homer1是一种与凋亡有关系的信号分子,其在人脑胶质瘤组织中的表达及作用尚未见报道。本研究旨在探讨Homer1在人脑胶质瘤中的表达及意义。方法:采用免疫组织化学化方法、Westernblot和实时荧光定量RT-PCR检测Homer1蛋白在3株人脑胶质瘤细胞系(U251、U87和SHG-44)、60例人脑胶质瘤组织和5例正常人脑组织中的表达水平。结果:(1)免疫组化结果显示:SHG-44和U87细胞中Homer1a染色呈强阳性,在U251细胞中弱阳性染色,肿瘤细胞的阳性染色都呈颗粒状分布于胞核、胞浆、胞膜及突起结构。3株细胞系中Homer1b/c染色呈阴性;Homer1a蛋白在人脑胶质瘤及正常人脑组织中的阳性率及免疫反应评分(IRS)分别为61.8%、4.35±3.99和1.2%、0.09±0.35(P均<0.01);Homer1a蛋白阳性率和IRS与脑胶质瘤Ⅰ～Ⅳ级病理级别间呈"U"型关系,其中Ⅰ和Ⅱ、Ⅲ级间差异非常显著(P<0.01),Ⅳ和Ⅱ、Ⅲ级间差异非常显著(P<0.01),Ⅰ和Ⅳ级、Ⅱ和Ⅲ级间差异显著(P<0.05),良、恶性脑胶质瘤之间Homer1a蛋白阳性率差异显著(P<0.05);Homer1b/c在人脑胶质瘤标本中不表达。(2)Homer1a蛋白及其mRNA在SHG-44和U87细胞中高表达,在U251细胞中低表达。Homer1b/c蛋白及其mRNA在3株细胞系中均无表达;Homer1a蛋白表达水平与Homer1 mRNA表达水平无明显差异(P>0.05);其他结果,mRNA表达情况和蛋白表达情况一致。结论:Homer1a蛋白和mRNA在人脑胶质瘤中有表达,并与脑胶质瘤的发生和发展密切相关;Homer1b/c不参与人脑胶质瘤的发生和发展。
- 张磊费舟费霏王远
- 关键词：胶质瘤肿瘤发生病理分级
- 一种新型大鼠颅脑爆炸伤模型建立被引量：4
- 2013年
- 目的建立一种模拟爆炸性武器原发性冲击波损伤(PBI)的大鼠颅脑爆炸伤(bTBI)模型。方法 60只雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为对照组和爆炸伤后6 h、12 h、24 h、3 d、7 d损伤组(n=10)。大鼠麻醉后,将2.5 mm直径PETN炸药球放置于大鼠右额叶顶部(人字缝和矢状缝中点右侧3.0 mm)上方2.0 mm,利用电雷管及银质柔性导爆索引爆后,造成颅脑爆炸伤。观察动物伤后存活率及生存质量,于损伤后取大鼠损伤区脑组织行病理检查,并对血清行神经元特异烯醇化酶(NSE)含量测定。结果损伤组大鼠全部存活,硬膜下血肿和蛛网膜下腔出血明显,HE染色示损伤区神经元大量坏死、皮层微血管破裂出血,脑挫裂伤程度均一。与对照组相比,伤后6 h,血清NSE含量开始上升,24 h达到高峰(P<0.05),伤后7 d仍高表达(P<0.05)。结论 2.5 mm直径炸药球在2.0 mm的爆炸距离可模拟冲击波原发效应,损伤确定的同时,致死率低,重复性和稳定性较好,是一种可靠的大鼠颅脑爆炸伤模型。
- 张弛王占江朱杰刘文博张磊王远惠浩费舟
- 关键词：爆炸伤爆震伤
- Homer与缺血性脑损伤中谷氨酸、γ-氨基丁酸相关性研究被引量：4
- 2009年
- 目的探讨Homer与神经元缺血性损伤中谷氨酸(Glu)、γ-氨基丁酸(GABA)相互关系。方法培养大鼠脑皮层原代神经元,先分为对照组、空载体组和Homerla siRNA转染组,检测Homerla变化。再将上述三组各分成正常组,缺氧缺血再灌注损伤后30min、1h、3h、12h、24h、48h共7小组,并进行Glu、GABA和Homerla的检测。结果①转染组神经元Homerla表达量明显减少;②损伤中,乳酸脱氢酶(LDH)活性增强;与其它两组比较,转染组培养液LDH活性最低;③损伤中,Glu和GABA与LDH变化正相关;Glu和Homerla的变化成反比;而GABA和Homerla的变化成正比。结论缺血性神经元损伤后,Homerla蛋白不仅调控Glu变化,还通过调控GABA变化保护神经元,在兴奋性和抑制性神经递质平衡中发挥重要作用。
- 张磊刘文博费舟陈涛李栋王远潘伟生
- 关键词：培养神经元缺血性损伤谷氨酸Γ-氨基丁酸
- 孤啡肽受体拮抗剂对机械性损伤神经元存活率的影响被引量：1
- 2011年
- 目的既往研究表明,孤啡肽在脑损伤后的表达明显升高,本研究通过特异性阻断孤啡肽受体(opioid-receptor-like receptor,ORL-1),观察对受损神经元是否具有保护作用。方法建立神经元机械性损伤模型,用孤啡肽受体特异性阻断剂([Nphe1]-NC(1-13)-NH2,Nphe)阻断孤啡肽受体,通过四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)活性,钙离子水平测定,研究Nphe对机械性损伤神经元存活率的影响。结果 MTT法测定神经元机械性损伤后12 h细胞存活率显示:单纯损伤组细胞存活率为46%±4%,与对照组相比显著下降(P<0.05),不同剂量Nphe(30、300、1 200 nM)干预组的细胞存活率分别为56%±5%、67%±7%、72%±8%,与单纯损伤组存活率46%±4%相比差异显著(P<0.05)。LDH活性检测提示损伤后12 h和48 h,Nphe干预组LDH活性与损伤组相比有显著差异(P<0.05)。神经元机械性损伤后12 h,Nphe能够降低损伤后细胞内钙离子水平(P<0.05)。结论 ORL-1的特异性拮抗剂Nphe能够减少机械性损伤后继发性神经元损害,对神经元具有一定的保护作用。
- 王远刘文博马义辉费舟陈涛李栋罗鹏张强苏宁李娟
- 关键词：孤啡肽孤啡肽受体拮抗剂创伤性脑损伤
