王良华
- 作品数：26 被引量：170H指数：8
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- 全自动血液核酸筛查及阳性献血员追踪的研究被引量：16
- 2005年
- 目的建立献血者全自动核酸检测方法,探讨在我国血液筛查中引进全自动核酸筛查方法的可行性。方法在酶联免疫吸附实验(ELISA)筛查血液基础上,选用全自动汇集仪进行血样汇集(24人份),在全自动核酸提取仪上提取样本核酸,应用聚合酶链反应(PCR),在COBASAMPLICOR进行扩增和检测结果,用国际标准核酸质控品考评检出限量,对阳性献血者追踪检测。结果经考评及常规应用表明,全自动汇集、全自动核酸提取及扩增和检测95%的检出限量HBVDNA、HCVRNA和HIV-1RNA分别为38·9、17·4IU/ml和20·6拷贝/ml,95%的可信限分别为[21,323]、[10·5,342]和[12,300]。通过对16512个样本共688汇集池分析,HBVDNA阳性8例,阳性率为0·048%,其中7例为Anti-HBc阳性,其余1例亦转换为阳性。HCVRNA和HIV-1RNA未检出阳性,6例HBVDNA阳性样本追踪发现,3例发生了血清转换现象。结论本实验结果认为全自动血样汇集,全自动核酸提取扩增和检测方法可应用于血液的筛查工作。
- 叶贤林王良华周一炎杨立新尚桂芳朱为刚
- 关键词：核酸扩增技术供血者
- 人外周血树突状细胞的体外诱导培养被引量：1
- 2004年
- 目的研究rhGM-CSF和rhIL-4培养体系对树突状细胞(DendriticCell,DC)的诱导培养。方法分离正常人或多发性骨髓瘤(MM)患者外周血中单个核细胞,体外培养树突状细胞。观察培养的DC的形态变化,并应用流式细胞仪分析DC表面的免疫分子的表达。结果100ng/mlrhGM-CSF和500U/mlrhIL-4能使正常人或多发性骨髓瘤患者外周血中单个核细胞分化发育为高表达CD80、CD86、HLAⅠ类和HLAⅡ类抗原的DC。结论rhGM-CSF和rhIL-4能使树突状细胞定向分化成为抗原提呈细胞,为DC疫苗治疗肿瘤感染性疾病奠定了基础。
- 王良华万军梅熊文
- 关键词：人外周血树突状细胞体外诱导免疫分子
- 建立病毒核酸检测系统追踪抗-HIV ELISA阳性结果
- 2004年
- 目的 建立病毒核酸检测系统追踪抗 HIVELISA初筛阳性结果的献血者。方法 献血初次抗 HIVELISA阳性结果者均进行PA硒标法及ELISA复检 ,WesternBlot确认及病毒核酸检测 ,对WesternBlot结果有条带者 ,3个月后追踪采血 ,进行上述检测。结果 81份初次抗 HIVELISA结果阳性标本 ,6 6份复检结果为阴性且无条带 ,9份复检结果为阳性但无条带 ,6份WesternBlot检测有条带者 ,3个月后再进行WesternBlot检测 ,结果无条带 ,上述标本核酸检测结果均为阴性。结论 有必要建立病毒核酸检测系统对抗 HIVELISA阳性结果进行追踪 。
- 周一炎尚桂芳杨立新王良华叶贤林
- 关键词：抗-HIV阳性结果ELISA病毒核酸复检核酸检测
- 不同ELISA试剂HBsAg初复检结果的比较被引量：13
- 2007年
- 目的探讨ELISA复检试剂在实际血液筛查HBsAg中的问题。方法使用加样仪和FAME全自动酶免分析仪,分别用不同厂家ELISA试剂对血标本作HBsAg筛查,并用临检中心定值质控血清和HBsAg血清盘检测最低检出量和符合率,部分HBsAg阳性标本用乙型肝炎荧光PCR试剂盒检测。结果219 974份标本中共检出HBsAg阳性1 829份,阳性率为0.83%,其中在1 829份阳性中,国产A的HBsAg阳性为1 439份,检出率78.67%,进口B的HBsAg阳性为1702份,检出率93.05%。进口B共检测15批次,最低检出量为(0.25-0.50)ng/ml,血清盘符合率11批次完全相符,其中血清盘阳性符合率15批次均为15/15,阴性符合率11批次为15/15,4批次为14/15。国产A共检测18批次,2000-2002年最低检出量为(0.50-1.00)ng/ml,2003-2004年为(0.25-0.50)ng/ml,血清盘符合率2批次完全相符,其中血清盘阳性符合率7个批次为14/15,阴性符合率8个批次14/15,1个批次12/15。结论2种不同ELISA试剂的HBsAg检出率存在差异,单独使用都有可能漏检,2次ELISA复检HBsAg在血液筛查中仍有实际应用价值,应重视HBsAg血筛试剂的质量标准和质量控制。
- 王良华邬旭群鲍自谦陈云龙叶贤林尚桂芳杨立新
- 关键词：血液筛查HBSAGELISA检出率
- 血液HCV/HIV-1全自动核酸筛查方法的应用研究
- 核酸扩增技术能直接检测病原体，将血液感染病毒的“窗口期”缩短，降低血源性病毒的传播，现已成为发达国家的血液筛查病毒的必要手段。目前自动化扩增和检测技术在上一世纪90年代已经完成并发展成熟，而样本制备提取核酸是NAT的重要...
- 叶贤林周一炎杨立新王良华尚桂芳朱为刚
- 关键词：血液筛查病毒检测核酸扩增技术
- 文献传递
- Flt3配体对培养的树突状细胞免疫表型影响的研究被引量：1
- 2004年
- 目的 研究早期造血生长因子 Flt3配体 ( Flt3L)对培养的树突状细胞 ( Dendritic Cell,DC)免疫分子表达的影响。方法 分离正常人外周血中单核细胞 ,以加入细胞因子 rh GM- CSF和 rh IL- 4的培养体系为基础 ,体外培养树突状细胞。观察加入 Flt3L因子后培养的 DC的形态变化 ,并应用流式细胞仪分析DC表面的免疫分子的表达。结果 Flt3L能协同 GM- CSF、IL- 4作用扩增 DC。
- 王良华熊文邹红岩
- 关键词：FLT3配体树突状细胞免疫表型
- 血液混样HCV/HIV-1 RNA全自动提取方法的应用评价被引量：2
- 2005年
- 目的:建立献血者全自动核酸检测方法,探讨在我国血液筛查中引进全自动核酸筛查的可行性。方法:选用STAR2000加样仪进行血样汇集(24人份),在COBASAMPLICOR进行扩增和检测分析结果,从灵敏度及抗干扰能力方面进行评价。结果:用国际标准核酸质控品考评及常规应用,表明全自动汇集、全自动核酸提取及扩增和检测95%的检出限量HCVRNA和HIV-1RNA分别为17·4IU/ml和20·6cp/ml,20mg/ml胆红素、1g/dl血色素及中等程度的脂血对结果无影响。通过对16512个样本共688汇集池分析,HCVRNA阳性1例(ELISA亦阳性),HIV-1RNA未检出阳性。结论:血液混样MPLC全自动核酸提取方法可应用于血液HCVRNA和HIV-1RNA的筛查工作。
- 叶贤林王良华周一炎尚桂芳杨立新
- 关键词：HCVRNAHIV-1RNA
- 对HBsAg(-)DNA(+)无偿献血乙肝感染者的追踪研究
- 目的了解和分析HBsAg(-)DNA(+)无偿献血者乙肝感染动态变化状况。方法应用Roche PCR定量检测方法追踪6位HESAg阴性,DNA阳性感染者的病毒载量,同时对进行基因分型、血清转换及ALT等多项指标的的动态追...
- 叶贤林王良华尚桂芳
- 文献传递
- 血液HBV DNA全自动检测及基因分型分析被引量：9
- 2005年
- 目的建立血液HBVDNA标本汇集、核酸提取、扩增及检测的全自动筛查模式,对阳性标本进行基因分型和血清学追踪检测,为血液HBVDNA自动化筛查提供科学依据。方法在酶联免疫吸附试验(ELISA)筛查血液基础上,应用STAR2000加样仪自编程序进行全自动血样汇集(24人份),在MPLC仪上全自动提取标本核酸,应用PCR方法在COBASAMPLICOR进行扩增和检测分析结果,用国际标准核酸质控品考评检出限量,对阳性标本进行基因分型并追踪血清转换过程。结果全自动汇集、全自动核酸提取和扩增及检测HBVDNA95%检出限量为38.9IU/ml,95%CI为(21323)。通过对16512个标本共688个汇集池分析,HBVDNA阳性8例,阳性率为0.049%。其中C型3人,B型2人,D型1人,2人未能确定基因型,6例阳性标本追踪发现,3例发生了血清转换现象。结论HBVDNA全自动核酸检测方法可应用于24人份血液混样核酸筛查。
- 叶贤林周一炎杨立新王良华尚桂芳朱为刚
- 关键词：全自动基因分型
- 免疫筛查阴性献血者血样病毒核酸检测的研究被引量：75
- 2005年
- 目的了解二次酶联免疫筛查献血者血样漏检的原因。方法将二次酶联免疫筛查阴性的献血者血样在加样仪上实现血液样本汇集,用全自动核酸提取仪提取样本核酸,以核酸扩增检测仪做HBV、HCV和HIV自动扩增检测。对HBsAg阴性、HBVDNA阳性献血者用核酸筛查试剂定量检测HBV,并每隔2周对其跟踪采血,做HBV两对半免疫检测和HBsAgV3的确认试验。结果16320份二次酶联免疫筛查阴性的合格献血者血样中,8份HBVDNA阳性(漏检率0.49‰),未发现HCV和HIV1RNA阳性。8份HBVDNA阳性献血者乙肝两对半免疫检测HBsAg、HBsAb和HBeAg均为阴性,HBcAb均为阳性,3份HBeAb为阳性。6例HBsAg阴性HBVDNA阳性献血者血样的病毒滴度在(76～1490)copies/ml,2例病毒滴度过低,未定量检测到病毒。跟踪6名HBVDNA阳性献血者,1例18周时HBsAg确认试验阳性,其余5例仍为阴性。结论现行的二次酶联免疫技术的血液筛查存在HBV漏检,原因可能是隐匿性乙型肝炎病毒感染。应重视血液筛查工作中HBV的漏检及输血传播,并在现有的血液筛查模式中或增加HBcAb检测,或增加病毒核酸筛查。
- 王良华叶贤林尚桂芳周雄伟周晓露
