王翠芳
- 作品数：56 被引量：218H指数：10
- 供职机构：兰州大学第二医院更多>>
- 发文基金：甘肃省自然科学基金国家自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 周期性和持续性流体剪切力对成骨细胞OPG、RANKL蛋白表达的影响被引量：5
- 2015年
- 目的:观察两种不同加载模式的流体剪切力(周期性或持续性)对MC3T3-E1成骨细胞增殖以及骨保护素(OPG)、细胞核因子k B受体活化因子配体(RANKL)蛋白表达的影响,同时探讨影响成骨细胞功能的最佳流体剪切力加载模式。方法:对MC3T3-E1成骨细胞分别加载生理强度为12 dyn/cm2的周期性流体剪切力或持续性流体剪切力。其中,持续性模式采用12 dyn/cm2的流体剪切力,加载成骨细胞2 h,静息2 h;周期性流体剪切力采用12 dyn/cm2流体剪切力加载成骨细胞30 min,然后静息3 0min,如此往复循环4次,总的加力时间为2 h。最后,MTT法检测不同加载模式下成骨细胞的增殖情况,Westernblot检测两组成骨细胞OPG、RANKL蛋白的表达影响。结果:MTT结果显示,两种加载模式的流体剪切力均能够显著促进成骨细胞的增殖(P<0.05),与持续性流体剪切力相比,周期性流体剪切力更能有效的促进成骨细胞的增殖(P<0.05)。另外,两种模式的流体剪切力均能有效地调控MC3T3-E1成骨细胞OPG、RANKL的表达(P<0.05)。但与持续性流体剪切力相比,周期性流体剪切力对成骨细胞OPG蛋白的促进作用更为显著(41.34%±5.37%vs 80.42%±4.19%,P<0.05);对成骨细胞RANKL蛋白的抑制作用更为明显[(24.17±5.92)%vs(8.45±2.18)%,P<0.05]。结论:与持续流体剪切力相比,周期性流体剪切力对成骨细胞增殖以及OPG、RANKL蛋白有更显著的调节作用。
- 陈少龙赵良功滕元君陈孝琼姜金夏亚一汪静王翠芳安丽萍马靖琳
- 关键词：成骨细胞流体剪切力骨保护素
- 骨肉瘤组织环氧合酶-2、CD_(105)表达与预后
- 2007年
- 目的研究骨肉瘤组织中环氧合酶-2(COX-2)与 CD_(105)表达及其与预后的关系。方法应用免疫组织化学染色的方法检测人骨肉瘤中 COX-2和 CD_(105)的表达,并计算 CD_(105)标记的微血管密度(MVD),同时对预后进行 COX 多因素生存分析。结果 COX-2在骨肉瘤中表达阳性率为77.5%,COX-2的表达与外科分期和肿瘤的转移密切相关(P<0.05);外科分期的Ⅰ期与Ⅱb期、Ⅲ期间的 MVD值的差异有统计学意义(P<0.05),而Ⅰ期与Ⅱa期、Ⅱa期与Ⅱb期之间的差异无统计学意义(P>0.05);转移组的骨肉瘤其 MVD 值高于未转移组,二者之间的差异有统计学意义(P<0.05);COX-2表达与 MVD 值呈正相关(P<0.05)。多因素生存分析显示,Enneking 外科分期、COX-2表达及是否发生转移是影响患者预后的独立危险因素。结论 COX-2在骨肉瘤组织中呈现高表达,其高表达可能促进了骨肉瘤新生血管的生成。COX-2和 CD_(105)标记的 MVD 可以作为骨肉瘤外科分期和是否发生转移的重要指标。
- 欧阳振王栓科王翠芳康学文郭洪章
- 关键词：环氧化酶-2微血管密度骨肉瘤预后
- 全文增补中
- 幼年特发性关节炎Th1/Th2系统及细胞粘附分子的表达
- 沈海丽汪静杨雪梅魏玲君王翠芳王天成朱琴王丽萍汉华夏亚一张莉刘媛媛
- 该研究利用酶联免疫吸附法(ELISA)及放射免疫法(RIA)首次在JIA中引入了sICAM-1、sVCAM-1、IL-1、IL-4、IL-10、TNF-α水平检测，并对上述指标在各型JIA患者血清表达以及sICAM-1、...
- 关键词：
- 关键词：关节炎酶联免疫吸附法
- 组蛋白去乙酰化酶抑制剂联合吉西他滨对骨肉瘤MG-63细胞抑制作用的研究被引量：4
- 2013年
- 目的:研究组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylase,HDAC)抑制剂MGCD0103和吉西他滨(gemcitabine)单药或联合作用对体外培养的人骨肉瘤细胞株MG-63生长的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:体外传代培养人骨肉瘤MG-63细胞,将不同浓度的MGCD0103(1、10和100μmol/L)和吉西他滨(0.1、0.2和0.4mg/L)分别单独或联合作用于MG-63细胞;采用MTT法检测2种药物单药或联合作用对MG-63细胞的生长抑制作用,并观察其有效的作用浓度;在荧光显微镜下观察细胞的凋亡情况;实时荧光定量-PCR(real-time fluorogenic quantitative-PCR,RFQ-PCR)检测MG-63细胞中转移相关基因1(metastasis-associated gene1,MTA1)mRNA表达的变化,蛋白质印迹法检测p21、Bax及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达水平的变化。结果:MGCD0103和吉西他滨单药或联合作用都能明显抑制MG-63细胞的生长(P<0.05),并呈剂量依赖性,MGCD0103和吉西他滨具有协同作用。荧光显微镜下观察结果显示,MGCD0103和吉西他滨单药或联合作用于MG-63细胞后,大量具有凋亡形态特征的细胞出现,凋亡细胞数明显增多;RFQ-PCR和蛋白质印迹法检测结果分别显示,MTA1 mRNA及VEGF蛋白的表达量明显下调,而p21和Bax蛋白的表达量明显上调。结论:MGCD0103和吉西他滨通过诱导细胞凋亡及抑制细胞增殖而发挥体外抗骨肉瘤作用,其作用机制涉及细胞周期和凋亡相关基因表达的调控。MGCD0103和吉西他滨具有协同作用,有望成为治疗骨肉瘤治疗的一种新手段。
- 胡旭昌王栓科康学文汪静安丽萍夏亚一狄天宁马靖琳王翠芳胡杰亮
- 关键词：骨肉瘤吉西他滨抗肿瘤联合化疗方案MG-63细胞
- 脊髓损伤后神经细胞黏附分子的表达被引量：3
- 2007年
- 目的:观察大鼠脊髓损伤后神经细胞黏附分子的表达,分析其与神经修复的关系。方法:实验于2006-02/05在兰州大学第二附属医院骨科研究所完成。成年雄性Wistar大鼠36只,分为空白对照组(n=3)、假手术组(n=3)和损伤组(n=30)。损伤组采用Allen法制成急性外伤模型。分别于术后1,3,5,7,10d麻醉下处死。假手术组仅实施手术不行打击,空白对照组不做任何处理,均在实验初处死。对各组大鼠在处死前以改良的Tarlov评分检测行为及肢体运动功能,观察伤后各时相点大鼠后肢的活动、肌力等,以此评定损伤后大鼠运动功能的恢复情况。测量各组各时间点脊髓灰质中阳性反应细胞并测其灰度值,用免疫组织化学的方法测定脊髓片神经细胞黏附分子的表达。结果:纳入动物数量为36只,损伤组死亡4只,最终进入结果分析32只。①损伤组脊髓损伤后1d改良的Tarlov评分低于空白对照组和假手术组(P<0.01),损伤后10d高于损伤后1d(P<0.01),但评分仍低于假手术组(P<0.01)。②损伤后1d肉眼可见脊髓组织肿胀明显,软脊膜紧绷。光镜下可见中心灰质血管破裂。白质神经纤维水肿,轴突与髓鞘之间间隙增大,1d后肿胀逐渐加重。损伤5d后脊髓肿胀逐渐消退,10d后轴突及髓鞘已退变成空泡。③空白对照组、假手术组脊髓灰质神经细胞黏附分子的表达甚少,损伤组1,3,5,7,10d表达增加,与空白对照组、假手术组比较,差异有显著性意义[(175.38±4.51),(163.15±5.98),(196.28±6.57),(217.42±2.36),(228.36±2.62),(248.31±3.47)(245.28±3.87),P<0.01]。结论:脊髓损伤后神经细胞黏附分子表达增加,提示神经细胞黏附分子可能参与损伤后神经的修复。
- 王翠芳孙正义夏亚一
- 关键词：脊髓损伤神经再生疾病模型动物
- COX-2mRNA、CD105mRNA在骨肉瘤中表达的临床意义被引量：1
- 2007年
- 目的研究环氧合酶-2mRNA(COX-2mRNA)在骨肉瘤中的表达及其与CD105mRNA的相关性。方法应用原位杂交的方法检测人骨肉瘤中COX-2mRNA和CD105mRNA的表达,并计算CD105mRNA标记的微血管密度(MVD)。结果COX-2mRNA在骨肉瘤中表达阳性率为77.5%,COX-2mRNA的表达与外科分期和肿瘤的转移密切相关(P<0.05);外科分期的I期与Ⅱb期、Ⅲ期间的MVD值的差异有统计学意义(P<0.05),而I期与Ⅱa期、Ⅱa期与Ⅱb期之间的差异无统计学意义(P>0.05);转移组的骨肉瘤其MVD值高于未转移组,二者之间的差异有统计学意义(P<0.05);COX-2mRNA表达与MVD值呈正相关(P<0.05)。结论COX-2mRNA在骨肉瘤组织中呈现高表达,其高表达可能促进了骨肉瘤新生血管的生成。
- 欧阳振王栓科康学文王翠芳汪静郭洪章
- 关键词：微血管密度骨肉瘤
- ERK5阻断剂BIX02188介导的流体剪切力对成骨细胞OPG、RANKL mRNA表达的影响被引量：1
- 2014年
- 目的观察在流体剪切力(Fluid Shear Stress,FSS)作用下,成骨细胞(MC3T3-E1)中骨保护素(osteoprotegerin,OPG)和细胞核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of NF-κB ligand,RANKL)mRNA的表达情况,以及探讨ERK5信号通路在其中的作用。方法用不同浓度的ERK5特异性阻断剂BIX02188干预MC3T3-E1成骨细胞,用MTT比色法检测490nm吸光度值,观察成骨细胞的增殖情况,并检测ERK5 mRNA的表达情况。给成骨细胞加载生理强度为12 dyne/cm^2的流体剪切力,观察OPG、RANKL mRNA的表达。结果浓度为15μM的ERK5特异阻断剂BIX02188能够有效的抑制ERK5 mRNA的表达;生理强度为12 dyne/cm^2的FSS能够显著地促进OPG mRNA表达(P<0.05),降低RANKL mRNA表达(P<0.05);当BIX02188干预成骨细胞后,FSS对成骨细胞OPG、RANKL mRNA的影响明显减弱(P<0.05)。结论 ERK5特异阻断剂BIX02188能够有效介导FSS对成骨细胞OPG、RANKL mRNA的表达。
- 陈少龙滕元君赵良功姜金崔兆辉夏亚一汪静王翠芳安丽萍马靖琳
- 关键词：流体剪切力成骨细胞ERK5OPGRANKL
- ERK5信号通路介导流体剪切力对成骨细胞BMP2,BMP7mRNA的表达影响被引量：3
- 2014年
- 目的:观察流体剪切力对MC3T3-E1成骨细胞BMP2,BMP7mRNA的表达影响,并探讨ERK5信号通路在其中的作用。方法:应用不同浓度的ERK5特异性阻断剂BIX02188干预成骨细胞,MTT比色法检测酶标仪490 nm吸光度,观察成骨细胞增殖情况以及ERK5mRNA的表达。并采用生理强度为12dyne/cm2的流体剪切力干预成骨细胞,实时荧光定量PCR检测BMP2,BMP7mRNA的表达情况。结果:浓度为15μM的BIX02188干预成骨细胞后,成骨细胞的生长的抑制以及ERK5mRNA的降低呈浓度依赖性。流体剪切力能够明显增加BMP2和BMP7mRNA的表达(P<0.05),且该种反应能够被ERK5信号通路阻断(P<0.05)。结论:ERK5信号通路调控流体剪切力对成骨细胞BMP2,BMP7mRNA的表达。
- 滕元君赵良功陈少龙姜金崔兆辉夏亚一汪静王翠芳安丽萍马靖琳
- 关键词：流体剪切力成骨细胞
- 骨髓间充质干细胞和软骨细胞共培养复合同种异体脱钙骨基质修复关节软骨全层缺损被引量：12
- 2006年
- 目的：探讨自体骨髓间充质干细胞（BMSCs）与软骨细胞共培养复合同种异体脱钙骨基质（DBM）修复关节软骨缺损的可行性，评价修复效果，为优化种子细胞源提供依据．方法：取浓度为5×10^9／L的第二代BMSCs和软骨细胞，按2：1比例混匀共培养作为种子细胞．DBM与共培养细胞复合植入修复为实验组（A组），单纯材料DBM组（B组）和不处理组（C组）作为实验对照组．移植8和16wk后经大体观察、组织学评分和免疫组化染色评价缺损修复．结果：共培养的软骨细胞基质合成丰富，细胞增殖快，共培养5—7d两种细胞比例达1：1以上．A组缺损修复组织呈软骨样，表面光滑平坦，与周围软骨整合的软骨细胞更为成熟．B组和C组的修复组织呈纤维组织．组织学评分表明A组优于B，C两组，差异具有统计学意义（P〈0．01），B组与C组差异无统计学意义（P〉0．05）．免疫组化染色显示A组修复组织的细胞为透明软骨样细胞，柱状排列，Ⅱ型胶原染色阳性，与周围软骨及软骨下骨整合良好．结论：自体BMSCs与软骨细胞共培养，BMSCs能增强软骨细胞的增殖，促进软骨细胞基质合成，缩短软骨细胞培养时间和减少传代次数，可节省大量的软骨细胞，与DBM复合后能有效修复关节软骨缺损．
- 冯万文夏亚一孙正义吴萌王翠芳党跃修
- 关键词：骨髓间充质干细胞软骨细胞共同培养技术关节软骨修复
- 星形胶质细胞内谷氨酸-谷氨酰胺循环在大鼠神经病理性痛形成中的作用被引量：2
- 2010年
- 目的评价星形胶质细胞内谷氨酸-谷氨酰胺循环在大鼠神经病理性痛形成中的作用。方法成年雄性SD大鼠48只，体重200～230g，采用结扎胫神经和腓总神经的方法制备大鼠神经病理性痛模型。随机分成8组（n=6）：对照组（C组）不进行任何处理；假手术组（S组）仅穿线不结扎；神经病理性痛组（NP组）模型制备成功后鞘内注射PBS 50μl，M1-4组分别鞘内注射0．01、0．03、0．05、0．10mmol／L谷氨酰胺合成酶抑制剂MSO 50μl，MG组鞘内注射0．05mmol／L MSO 50μl，15min后鞘内注射0．25mmol／L谷氨酰胺50μl。于结扎前1周（T0）、结扎后1周（T1）、注射MSO后15、30、45、60min（T2-5）时测定机械痛阂，最后1次测痛阂后处死大鼠，取L4-6段脊髓，采用免疫组化法测定神经胶质酸性蛋白（GFAP）和谷氨酰胺合成酶（GS）的表达及共表达（GFAP／GS）情况。结果与NP组和MG组相比，S组cP组T1-5时、M3,4组T2-4时机械痛闽升高，S组、C组和M，组脊髓背角GFAP、GS和GFAP／GS表达下调（P〈0．05）；MG组和NP组上述指标比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论星形胶质细胞内谷氨酸-谷氨酰胺循环参与了大鼠神经病理性痛的形成。
- 耿彬夏亚一王翠芳陈永刚刘志龙沈海丽汪泽皓汪静
- 关键词：星形细胞神经痛
