王红
- 作品数：9 被引量：22H指数：3
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 病例156:60岁男性阵发性左上腹剧痛、呕吐、大汗、心慌伴血压剧烈波动2d
- 2015年
- 患者，男性，60岁。因“阵发性左上腹剧痛2d，加重12h”于2012年10月18日就诊华中科技大学同济医学院附属同济医院（我院）心内科。现病史：患者人院前2天无明显诱因突发左肾区及左季肋区剧烈疼痛，疼痛每次持续15min左右可自行缓解，伴大汗、心慌、焦躁不安，几分钟后出现头痛症状，随即呕吐1次，非喷射性，呕吐物为胃内容物，混有黄绿色胆汁，量约150mL，无鲜血及咖啡渣样物质。
- 宋玉娥王红汪道文唐家荣
- 关键词：上腹剧痛阵发性心慌病例
- 病例156:60岁男性,阵发性左上腹剧痛、呕吐、大汗、心慌伴血压剧烈波动2d
- 2015年
- 患者，男，60岁，因“阵发性左上腹剧痛2d，加重12h”于2012年10月18日入华中科技大学同济医学院附属同济医院（我院）心内科。现病史：患者入院前2天无明显诱因突发左。肾区及左季肋区剧烈疼痛，疼痛每次持续15min左右，可自行缓解，伴大汗、心慌、焦躁不安，几分钟后出现头痛症状，随即呕吐1次，非喷射性，呕吐物为胃内容物，混有黄绿色胆汁，量约150mL，无鲜血及咖啡渣样物质。
- 宋玉娥王红汪道文唐家荣
- 关键词：上腹剧痛阵发性心慌病例
- 花生四烯酸细胞色素P450酶代谢产物的生理作用被引量：3
- 2002年
- 近十余年来对花生四烯酸细胞色素P450(CYP)氧化酶代谢途径及其产物的研究引起了学者们广泛的兴趣和重视,陆续发现并证实经此途径产生的花生四烯酸代谢产物有许多重要的生理和病理生理作用.
- 王红汪道文陆再英
- 关键词：花生四烯酸代谢产物细胞色素P450酶病理生理作用代谢途径
- TNF-α/放线菌素D诱导原代培养内皮细胞凋亡模型的建立被引量：3
- 2006年
- 目的建立RNA合成抑制剂——放线菌素D(actinomycin D,act D)作用下,TNF-α诱导原代培养内皮细胞凋亡的模型,并探讨其作用机制。方法在原代培养3～4代以内的牛主动脉内皮细胞中,加入一定浓度TNF-α/act D作用一定时间。采用MTT细胞活性检测确定最适TNF-α/act D作用浓度和时间。通过DNA ladder分析、流式细胞仪分析、丫啶橙/溴化乙啶染色等方法检测内皮细胞凋亡,用Western blot检测Bcl-2表达、MAPK(ERK1/2)激活水平,以p-NA为底物检测caspase-3活性。结果在一定浓度增敏剂放线菌素D作用下,TNF-α呈浓度依赖性降低细胞活性,促使部分内皮细胞核浓聚、碎裂,导致DNA ladder形成。流式细胞仪分析进一步证明TNF-α/act D增加内皮细胞凋亡比例,并且使内皮细胞中caspase-3活性增加,Bcl-2的表达水平呈时间依赖性的降低以及MAPK (ERK1/2)失活。结论本研究建立了放线菌素D作用下TNF-α诱导原代培养内皮细胞凋亡的模型,并初步探讨其机制,为进一步研究动脉粥样硬化、血管生成等内皮细胞凋亡相关疾病的发病机制提供一定的实验基础。
- 林立王红王燕王炎陆再英汪道文
- 关键词：TNF-Α凋亡内皮细胞MAPK
- 细胞色素P450花生四烯酸表氧化酶BM_3F87V上调内皮一氧化氮合酶基因的表达被引量：6
- 2002年
- 血管内皮细胞富含细胞色素P450表氧化酶，它代谢花生四烯酸产生内皮源性超极化因子，（EDHF，即EETs)，它与血管内皮细胞产生的一氧化氮（NO）之间的关系尚不清楚，经转基因技术在原代培养的牛主动脉内皮细胞中产生内源性EDHF，并研究了EDHF对NO合成的关键酶－内皮NO合酶（eNOS)基因表达的调节作用，将表氧化酶基因CYP BM3F87V克隆于真核表达载体pCB6,转染了经3－4代培养的牛主动脉内皮细胞，产生高浓度的内源性14，15－EET，采用Western blot和Northern blot分别从旧白质水平和NRA水平判断内源性14，15－EET对eNOS基因表达和转录的影响，同时根据[^H]L-精氨酸转变国[^3H]L-瓜氨酸的水平来判断其对eNOS活性的影响，结果显示：与传染pCB6的对照细胞相比，转染的pCB6-BM3F87V在内皮细胞中过度表达后能显著上调eNOS的蛋白表达和eNOS的mRNA水平，明显增加eNOS的活性，因此，转梁表氧化酶M3F87V对eNOS基因有显著上调作用，这提示细胞色素P450表氧化酶能够促进内皮细胞内EDHF的产生来调节NO生成，进而改善内皮细胞功能，这可能为治疗心血管疾病提供了一种新思路。
- 王红林立陆再英汪道文
- 关键词：细胞色素P450花生四烯酸内皮一氧化氮合酶内皮源性超极化因子血管内皮细胞
- 内皮源性超极化因子对内皮一氧化氮合酶基因表达的调节被引量：7
- 2003年
- 目的 以内皮细胞产生NO的关键酶———eNOS(内皮一氧化氮合酶 )为研究目标 ,探讨外源性内皮源性超极化因子EDHF(EETs)对内皮细胞合成NO的影响。方法 在原代培养 3～ 4代以内的牛主动脉内皮细胞中 ,分别加入不同浓度 (5 0～ 2 0 0nmol·L-1)的 8,9 EET、11,12 EET、14 ,15 EET ,作用 1h后用不同的方法收获细胞。用WesternBlot以及NorthernBlot方法检测EETs对eNOS基因表达的影响 ;同时通过检测L [3 H] 精氨酸转化为L [3 H] 瓜氨酸的量研究EETs对NOS活性的影响。结果 显示 8,9 EET、11,12 EET、14 ,15 EET均呈浓度依赖性地增加eNOS蛋白质的表达 ,并提高eNOSmRNA表达水平以及NOS酶活性。结论 外源性EDHF对eNOS基因表达是一种正反馈调节作用 ,从而能够促进内皮细胞NO的产生 。
- 林立王红陆再英李宏伟汪道文
- 关键词：内皮源性超极化因子EETS内皮一氧化氮合酶内皮细胞
- 花生四烯酸细胞色素P450表氧化酶对凋亡内皮细胞Bcl-2表达、Caspase-3及MAPK活性的影响
- 2007年
- 花生四烯酸经细胞色素P450表氧化酶代谢产生的内皮来源超极化因子(EDHF)[表氧化二十烷烯酸(EETs)]对内皮细胞具有保护作用。研究了转染细胞色素P450表氧化酶基因CYPBM3·F87V、CYP2C11OR及CYP2J2产生内源性EETs,通过检测内皮细胞中Bcl-2表达、caspase-3的活性及MAPK磷酸化水平探讨内源性EDHF的内皮细胞保护效应及其抗TNF-α诱导内皮细胞凋亡的作用机制。原代培养的牛主动脉血管内皮细胞转染CYP450表氧化酶基因24h后,加入TNF-α作用一定时间诱导内皮细胞凋亡,用Western印迹方法检测Bcl-2的表达,MAPK磷酸化水平,同时测定caspase-3的活性。结果显示转染表氧化酶基因能抑制TNF-α诱导的时间依赖性Bcl-2下调,抑制Caspase-3的激活。TNF-α使细胞内磷酸化MAPK水平呈时间依赖性减低,转染表氧化酶基因后细胞内的磷酸化MAPK水平较对照组升高。因此,转染表氧化酶基因CYPBM3·F87V、CYP2C11OR以及CYP2J2使内皮细胞产生内源性EETs(EDHF)通过激活MAPK(ERK1/2)途径,抑制抗凋亡基因Bcl-2的降解,抑制caspase-3的激活,从而抑制TNF-α诱导的内皮细胞凋亡,因而具有内皮保护效应。
- 林立王红陆再英汪道文
- 关键词：内皮源性超极化因子EETS凋亡内皮细胞
- 细胞色素P450花生四烯酸表氧化酶抑制TNF-α诱导的内皮细胞凋亡被引量：1
- 2007年
- 目的:以TNF-α/act D诱导的细胞凋亡作为一种内皮细胞损伤的模型,通过转染细胞色素P450表氧化酶基因BM3.F87V、2C11OR以及2J2产生内源性EDHF(EETs),探讨EDHF是否具有抗内皮细胞损伤的作用及其机制。方法:以CYP450表氧化酶BM3.F87V、2C11OR及2J2基因转染3-4代培养的牛主动脉血管内皮细胞。通过MTT方法检测细胞活性。基因转染24 h后,用TNF-α/act D作用一定时间诱导内皮细胞凋亡,以细胞形态学观察,DNA ladder分析,流式细胞仪分析(Annexin-V-FITC和propidium iodide双染法)作为检测细胞凋亡的指标。结果:MTT分析显示,转染CYP450 BM3.F87V、2C11OR以及CYP2J2基因的内皮细胞活性(分别为189.0%±18.0%,166.0%±22.6%或131.0%±22.8%)强于对照组(100.0%±21.3%)。经TNF-α/act D诱导,转染pCB6的对照组内皮细胞大量脱落,未脱落细胞中许多细胞核呈碎裂颗粒状(约20.1%±0.9%);而转染CYPBM3.F87V、CYP2C11OR或CYP2J2基因的内皮细胞仅见少数核呈碎颗粒状(分别约1.2%±0.2%,1.0%±0.2%或3.1%±0.2%)。DNA ladder分析显示TNF-α/act D诱导后,转染表氧化酶基因的内皮细胞所形成的梯形条带弱于对照组。进一步用流式细胞仪定量检测表明,转染细胞色素表氧化酶基因CYP BM3F87V或2C11OR内皮细胞中凋亡细胞所占比例(分别为12.35%±4.55%,10.92%±3.57%)明显低于对照组(29.57%±2.84%),而转染CYP2J2的细胞凋亡率也明显低于对照组。结论:转染CYP450基因能够增加内皮细胞活性,抑制TNF-α诱导的内皮细胞凋亡,具有内皮细胞保护效应。
- 林立王红王炎王燕陆再英汪道文
- 关键词：内皮源性超极化因子内皮细胞细胞凋亡
- 内外源性EETs对血管内皮一氧化氮合酶的表达及其在Thr-495位磷酸化的作用被引量：7
- 2004年
- 目的 研究细胞色素P4 5 0表氧化酶基因转染和直接加入EETs对内皮细胞eNOS表达及其在Thr 4 95位磷酸化的影响。方法 在原代培养的牛主动脉内皮细胞中 ,分别加入生理浓度的 8,9 EET(1 0 0nmol·L-1 )、1 1 ,1 2 EET(1 0 0nmol·L-1 )、1 4 ,1 5 EET(1 0 0nmol·L-1 )孵育 4h ,或直接用重组腺相关病毒介导的花生四烯酸表氧化酶转染牛主动脉内皮细胞2wk ,以产生内源性EETs ,用Westernblot法检测总eNOS蛋白的表达及eNOSThr 4 95磷酸化的水平 ;此外 ,从大鼠尾静脉注射真核表达质粒pCB6、pCB6 2C1 1OR、pCB6 2J2和pCB6 F87V ,2wk后检测大鼠主动脉总eNOS表达及eNOSThr 4 95磷酸化的水平。结果 与空白和溶媒组比较 ,外源性EETs明显促进内皮细胞总eNOS表达 ,增加eNOSThr 4 95的磷酸化 ,而CYP4 5 0抑制剂 (1 7 ODYA)则可明显降低eNOS表达和eNOSThr 4 95的磷酸化水平 ;与相应的对照组比较 ,体内和体外转染不同的表氧化酶基因均能明显上调内皮细胞eNOS的表达 ,增加eNOSThr 4 95的磷酸化水平。结论 EETs和CYP表氧化酶不仅能明显促进血管内皮细胞总eNOS蛋白的表达 ,而且还通过其翻译后修饰来增加其Thr 4
- 蒋建刚陈积雄王红邓良刚陈瑞娟汪道文
- 关键词：内皮源性超极化因子一氧化氮合酶主动脉内皮
