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王留东: 作品数：12 被引量：32H指数：3; 供职机构：郑州大学第一附属医院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金河南省教育厅自然科学基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学更多>>

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大鼠脑缺血急性期脑组织miRNA的表达变化被引量：20: 2008年; 目的:观察脑缺血急性期大鼠脑组织小RNA(microRNA,miRNA)差异表达。方法:采用双颈总动脉结扎方法制备大鼠脑缺血模型(2VO),脑缺血后30min,将动物断头取皮层脑组织,miRNA表达谱芯片检测miRNA差异表达。结果:与正常组比较,2VO术后60min大鼠皮层脑组织中35个已知miRNA表达上调2倍以上;89个表达下调2倍以上等,其中促进凋亡和影响细胞周期的miRNA,如miR-23、-24、-26、-30、-103、-107等显著上调,与神经干或前体细胞分化有关的let-7、miR-124、-128、-9等也显著上调。结论:miRNA在脑缺血早期表达即有明显差异,可能在大鼠脑缺血早期病理生理变化中发挥作用。; 文全庆贾延劼王明闯赵二义王留东张博爱刘洪波; 关键词：小RNA 脑缺血

Caveolin-1在大鼠骨髓间质干细胞分化为神经细胞中的作用被引量：2: 2010年; 目的:探讨caveolin-1在骨髓间质干细胞(MSCs)分化为神经细胞中的作用。方法:实验分为未转染组、转染组(转染Rn-caveolin-1-siRNA)、阳性对照组(转染Rn-MAPK-1control siRNA)及阴性对照组(转染negative control siRNA)4组。采用β-巯基乙醇诱导大鼠MSCs分化为神经细胞。倒置荧光显微镜下观察MSCs转染后荧光表达情况;RT-PCR检测caveolin-1和促分裂原活化蛋白激酶1(MAPK1)mRNA的表达变化;免疫细胞化学法检测caveolin-1、神经元烯醇化酶(NSE)、神经微丝亚单位(NF-M)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达变化;MTT方法检测细胞存活率。结果:(1)siRNA转染72h,MSCs荧光表达最强,转染率可达(81.5±2.8)%;而且转染组MSCs的caveolin-1mRNA转录下降(P<0.05);MTT提示转染组细胞存活率无显著变化(P>0.05)。(2)β-巯基乙醇可以诱导MSCs向神经细胞分化,其中以转染组诱导效果最佳,NSE、NF-M的表达率显著高于其它各组(P<0.01)。(3)随诱导时间延长,各组caveolin-1表达持续增加,诱导6d达到峰值,与诱导前、诱导6h相比有显著差异(P<0.05)。此外,转染组与其它各组同时点的caveolin-1表达均显著降低(P<0.01)。结论:以caveolin-1为标记蛋白的脂筏在MSCs诱导分化为神经细胞中可能起到重要的调控作用。; 王留东赵二义文全庆关文娟鲁晶晶彭涛张博爱贾延劼; 关键词：骨髓间质干细胞神经元 CAVEOLIN-1 RNA干扰

小凹蛋白-1在大鼠骨髓间质干细胞分化为神经元样细胞中的作用被引量：2: 2010年; 目的应用RNA干扰(RNA interference)技术,抑制沉默小凹蛋白-1(caveolin-1)基因的表达,观察小凹蛋白-1在骨髓间充质干细胞(MSCs)分化为神经元样细胞的作用.方法构建大鼠caveolin-1 siRNA(small interfering RNA),然后传染大鼠MSCs,诱导分化并在倒置显微镜下进行形态学观察,用MTT比色法检测细胞存活率,采用免疫细胞化学染色法检测Nestin、 NSE(神经元标记物) 、GFAP(神经胶质细胞标记物)的表达,设诱导未传染组和传染对照组作为对照研究.结果用caveolin-1 siRNA传染MSCs后,caveolin-1基因表达消失,传染后24 h和3 d MSCs细胞存活率下降,与诱导未传染组和传染对照组比较差异有统计学意义(P<0.01),传染caveolin-1 siRNA的MSCs向神经元样细胞分化效率显著提高,诱导24 h后NSE阳性细胞率为(75.5±2.5)%,6 d后达(81.6±3.5)%,且未见GFAP的表达,与诱导未传染组和传染对照组比较差异有统计学意义(P<0.01).结论 caveolin-1 siRNA抑制caveolin-1基因的表达,可提高MSCs向神经元样细胞的分化效率.; 王留东赵二义贾延劼; 关键词：小凹蛋白骨髓间质神经元样细胞 MARROW MARROW

大鼠骨髓间充质干细胞向神经细胞分化过程中Notch信号与RhoA/Rho激酶信号的协同作用被引量：1: 2010年; 目的探讨Notch信号通路在大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)向神经细胞分化中与RhoA/Rho激酶信号的协同作用.方法实验分为无血清培养基对照组和盐酸法舒地尔组.采用盐酸法舒地尔诱导大鼠MSCs分化为神经细胞.RT-PCR检测Hes1的表达变化;免疫细胞化学法检测神经元特异性烯醇化酶(NSE)、神经微丝蛋白亚单位(NF-M)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达变化.结果 ①盐酸法舒地尔组MSCs的Hes1 mRNA转录下降(P<0.05).②盐酸法舒地尔可以诱导MSCs向神经细胞分化,NSE、NF-M的阳性表达率显著高于无血清培养基组(P<0.05).结论盐酸法舒地尔在诱导大鼠MSCs向神经细胞分化过程中,可能存在Notch信号通路与RhoA/Rho激酶通路信号的协同作用,共同促进MSCs向神经细胞分化.; 赵二义王留东文全庆关文娟鲁晶晶彭涛张博爱贾延劼; 关键词：分化过程 MARROW GTPASE NEUROFILAMENT MARROW CROSS-TALK

PU-707 Notch-1/Hes1信号通路在大鼠骨髓间充质干细胞向神经细胞分化过程中的作用: 赵二义王留东关文娟文全庆沈雷石进峰张博爱贾延劼

S-209全面性癫痫伴热性惊厥附加症患者iPS细胞初步构建: 贾延劼景黎君魏建科张博爱文全庆关文娟彭涛赵二义王留东鲁晶晶

DSCAM在大鼠骨髓间质干细胞分化为神经细胞中的表达变化被引量：3: 2009年; 目的研究唐氏综合征细胞粘附分子(DSCAM)在大鼠骨髓间质干细胞(MSCs)分化为神经细胞中的作用。方法在建立黄芩苷诱导大鼠MSCs分化为神经细胞的基础上,采用免疫细胞化学法、Western blot法等检测DSCAM的表达变化;同时采用RNA干扰技术,观察DSCAM-siRNA转染MSCs后诱导分化情况。结果诱导前大鼠MSCs不表达DSCAM;预诱导液诱导24h,MSCs开始少量表达DSCAM(1.71±0.67)%;黄芩甙诱导6h,部分表达DSCAM(15.79±4.24)%;诱导后3d,DSCAM表达最高(53.16±5.94)%;诱导后6d,DSCAM表达明显下降(28.99±6.72)%。DSCAM-siRNA转染MSCs,DSCAM表达显著下降。而且,诱导前MSCs不表达神经细胞特异性标记蛋白β-ⅡI-tubulin;诱导6h,β-ⅡI-tubulin表达为(1.40±0.79)%,诱导3d达到(41.59±3.17)%,诱导6d为(59.11±4.76)%。但是,DSCAM-siRNA转染MSCs,诱导3d,6d,β-ⅡI-tubulin蛋白的表达显著下降,分别为(28.57±2.91)%和(43.90±12.31)%。结论DSCAM可能在MSCs分化为神经细胞中起到重要的作用。; 王明闯贾延劼文全庆关文娟赵二义王留东张博爱; 关键词：骨髓间质干细胞神经细胞 RNA干扰

S-228盐酸法舒地尔诱导大鼠骨髓间质干细胞向神经元样细胞分化: 关文娟赵二义王留东文全庆赵燕玲张博爱贾延劼

Caveolin-1在大鼠骨髓间质干细胞分化为神经细胞中的作用: 目的应用RNA干扰/(RNA interference/)技术,抑制小凹蛋白-1/(Caveolin-1/)基因的表达,观察小凹蛋白-1在骨髓间质干细胞/(marrow mesenchymal stem c...; 王留东; 关键词：骨髓间质干细胞神经细胞 CAVEOLIN-1 RNA干扰脂筏; 文献传递

caveolin-1对大鼠骨髓间充质干细胞神经分化影响的原子力显微镜观察: 2011年; 目的应用原子力显微镜观察大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)分化为神经细胞的过程中细胞膜超微结构的变化,并探讨caveolin-1在其分化中的作用。方法常规方法培养大鼠MSCs,采用RNA干扰技术,把Rn-siRNA-caveolin-1转染进第10代大鼠MSCs。采用RT-PCR法,分别检测转染组和未转染组大鼠MSCs caveolin-1的表达量,进行统计分析。盐酸法舒地尔诱导转染组和未转染组大鼠MSCs为神经元样细胞,并用免疫细胞化学法检测神经元特异性蛋白NSE、NF-M和GFAP的表达变化。用原子力显微镜分别在非接触模式和接触模式下观察MSCs成像及其细胞膜超微结构的变化。结果①未转染组MSCs表达caveolin-1,转染组MSCs表达caveolin-1-siRNA显著降低。②诱导前大鼠MSCs不表达神经元特异性蛋白NSE和NF-M。诱导后各组均表达NSE和NF-M。其中,转染组的NSE和NF-M的表达率显著高于未转染组。各组GFAP的表达率均小于5%。③原子力显微镜下观察,未转染组大鼠的MSCs以长梭形为主,细胞突起较多,且多集中于胞体一侧;转染组大鼠MSCs的细胞突起对称分布于胞体两侧。两个组均可见到大小不等的凹陷,环绕在细胞核周边,转染组的凹陷数量明显多于未转染组。结论原子力显微镜下从细胞膜的水平观察,cave-olin-1在大鼠骨髓间质干细胞诱导分化为神经元样细胞的过程中可能起到一定的作用。; 鲁晶晶景黎君贾永林李尽义王留东彭涛贾延劼; 关键词：原子力显微镜 MSCS CAVEOLIN-1

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