王永星
- 作品数：6 被引量：12H指数：3
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- 二氧化硅诱导大鼠肺成纤维细胞转分化中基因组甲基化水平被引量：3
- 2012年
- 目的探讨二氧化硅（SiO2）诱导大鼠肺成纤维细胞转分化过程中基因组的甲基化水平。方法采用直接和间接细胞共培养方法对sD大鼠巨噬细胞、肺成纤维细胞进行原代培养，以25、50、100μg／ml的SiO2作为受试物，采用免疫细胞化学方法对肺成纤维细胞转分化为肌成纤维细胞进行鉴定，采用高效液相色谱法检测成纤维细胞的基因组甲基化水平。结果间接共培养方式下，与空白组比较，25、50、100μg／ml SiO：剂量组成纤维细胞的基因组甲基化水平分别降低19．9％、26．9％、30．3％，差异有统计学意义（P〈0．05）；与100μg／ml SiO2剂量组比较，对照组5一氮杂-2-脱氧胞苷（5-aza—dC）处理后成纤维细胞基因组甲基化水平降低22．0％，差异有统计学意义（P〈O．05）。ThinCertTM共培养方式下，与空白组比较，25、50、1013μg／ml SiO2剂量组成纤维细胞的基因组甲基化水平分别降低22．2％、30．2％、36．7％，差异有统计学意义（P〈0．05）；与100μg／ml SiO2剂量组比较，对照组5-aza-dC处理后成纤维细胞基因组甲基化水平降低20．6％，差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论矽肺体外细胞模型共培养方式下，SiO2可引起成纤维细胞基因组甲基化水平降低，用ThinCertTM共培养方式建立的体外细胞模型在矽肺纤维化发生研究中有应用前景。
- 王永星姚武高彬姚永成吴逸明郝长付
- 关键词：二氧化硅甲基化
- 外泌体miR-125a-5p对NIH/3T3细胞增殖和凋亡的影响被引量：3
- 2019年
- [背景]矽肺发生涉及多细胞、多因子的变化和相互作用,其中成纤维细胞是肺纤维过程中关键的效应细胞。近年来研究发现,成纤维细胞的增殖除了受转化生长因子-β等细胞因子的调节之外,外泌体作为细胞间信号的载体也在其中发挥重要的作用。外泌体mi RNAs介导的细胞间信号可能在Si O2诱导的成纤维细胞转分化和增殖中发挥作用。前期研究发现mi R-125a-5p是一条差异表达的miRNAs。[目的]探讨外泌体miR-125a-5p对小鼠胚胎成纤维细胞NIH/3T3增殖和凋亡的影响。[方法]培养RAW264.7细胞,收取上清提取外泌体,并采用透射电镜、纳米颗粒跟踪分析和Western blot对其进行鉴定。设立对照组和SiO2组(100μg/mL SiO2),观察SiO2粉尘对RAW264.7细胞外泌体及其中miR-125a-5p表达的影响。建立RAW264.7与NIH/3T3的共培养模型,分为对照组、SiO2组(100μg/mL)和外泌体组(10μg/mL外泌体作用于NIH/3T3,并且该组无RAW264.7),24、48 h时采用Western blot和CCK-8检测NIH/3T3细胞Ⅰ型胶原(collagenⅠ)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达和增殖活性。培养NIH/3T3细胞,分为模拟剂组、抑制剂组和对照组,于转染24、48 h后收集细胞,采用荧光定量PCR、CCK-8和流式细胞术分别检测NIH/3T3细胞中mi R-125a-5p的表达、细胞的增殖活性、细胞周期和凋亡的情况。[结果]透射电镜下观察到外泌体具有圆形或茶托样的膜结构。纳米颗粒跟踪分析结果显示外泌体呈聚团或散在分布,粒径大多在30~150 nm。Western blot可检测到外泌体膜标志蛋白TSG101、Alix,未检测到内质网蛋白calnexin。与对照组相比,SiO2粉尘刺激后RAW264.7细胞外泌体含量增多;外泌体膜标志蛋白TSG101和Alix相对表达量升高;mi R-125a-5p的相对表达量上升(P <0.05)。共培养24、48 h检测结果显示,与对照相比,Si O2组和外泌体组collagenⅠ、α-SMA相对表达量均上升;细胞增殖活性升高(P <0.05)。NIH/3T3细胞转染24
- 张建会王永星郝长付于兴浩黄婼旋魏静静杨果姚武
- 关键词：外泌体增殖凋亡RAW264.7NIH/3T3
- 游离二氧化硅诱导大鼠肺成纤维细胞转分化过程中基因组甲基化水平
- 转分化是指一种分化完全的细胞在某些因素的刺激下,丢失其原有的表型特点而转变为其他类型细胞,是一种特定的生理或病理过程。在矽肺发生过程中,游离二氧化硅刺激肺泡巨噬细胞(Alveolar macrophage,AM)分泌各类...
- 王永星
- 关键词：游离二氧化硅甲基化水平MRNA表达肺成纤维细胞
- 细胞直接共培养模型在大鼠肺成纤维细胞转分化中的应用被引量：3
- 2012年
- 目的:探讨细胞直接共培养模型在大鼠肺成纤维细胞转分化研究中的应用价值。方法:分离SD大鼠肺巨噬细胞和成纤维细胞,采用ThinCertTM进行共培养,并分为4组:对照组加入无SiO2粉尘的培养基,SiO2低、中、高剂量处理组分别加入终质量浓度为25、50和100mg/L的SiO2粉尘悬液,培养24h后,收集成纤维细胞和培养上清,分别采用real-time PCR检测成纤维细胞中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原(COLⅠ)及Ⅲ型胶原(COLⅢ)的mRNA水平,ELISA法测定培养上清中α-SMA、COLⅠ和COLⅢ蛋白。结果:SiO2处理组的α-SMA、COLⅠ和COLⅢmRNA和蛋白的表达水平明显高于对照组,且随SiO2质量浓度的升高,α-SMA、COLⅠ和COLⅢmRNA和蛋白的表达水平有升高的趋势(P<0.05)。结论:细胞直接共培养模型可用于大鼠肺成纤维细胞转分化的研究。
- 曾鑫王永星姚武付晓丽郝长付
- 关键词：二氧化硅肺成纤维细胞转分化
- 肿瘤坏死因子-α基因308和238位点多态性与尘肺易感性的Meta分析被引量：1
- 2011年
- 目的 探讨肿瘤坏死因子-α（TNF-α）基因308、238位点多态性与尘肺易感关系.方法 检索中外数据库于1994年1月至2010年12月公开发表的文献,共检索到关于TNF-α基因308、238位点多态性与尘肺发病风险相关的病例-对照研究18篇.对文献进行Meta分析,并按尘肺类型和种族进行分层分析,计算合并OR值（95%CI）.结果 共纳入文献11篇,其中TNF-α基因308位点相关研究10篇,累计病例组1408例,对照组1639名;分析显示,携带精氨酸（Arg）/Arg、谷氨酰胺（Gln）/Arg、Gln/Arg＋Arg/Arg基因型个体与携带Gln/Gln基因型个体相比,尘肺发病风险分别为其1.89（95%CI：1.10～3.24）、1.53（95%CI：1.25～1.87）、1.56（95%CI：1.28～1.90）倍;分层分析显示,煤工人群中携带Arg/Arg、Ch/Arg、Gln/Arg＋Arg/Arg基因型的个体与携带Gln/Gln基因型者相比,尘肺发病风险分别为其2.29（95%CI：1.22～4.29）、1156（95%CI：1.20～2.03）、1.64（95%CI：1.28～2.11）倍;亚洲人群中携带Gln/Arg、Gln/Arg＋Arg/Arg基因型个体与携带Gln/Gln基因型者相比,尘肺发病风险分别为其1.58（95%CI：1.28～1.95）、1.57（95%CI：1.28～1.94）倍.共有4篇TNF-α基因238位点相关研究,累计病例组391例,对照组391名;分析显示,携带Arg/Arg、Gln/Arg、Gln/Arg＋Arg/Arg基因型个体与不携带者相比,尘肺发病风险分别为其6.03（95%CI：1.35～26.97）、1.87（95%CI：1.07～3.30）、2.36（95%CI：1.37～4.07）倍.结论 TNF-α基因308、238位点Arg/Arg、Gln/Arg＋Gln/Arg＋Arg/Arg基因型携带者易患尘肺.
- 李举郝长付姚武运玉霞高彬王永星
- 关键词：尘肺
- 尘肺患者血清肿瘤坏死因子-α表达水平的Meta分析被引量：3
- 2011年
- 目的运用Meta分析方法探讨血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在尘肺发生发展中的意义。方法通过计算机检索,收集所有有关尘肺患者血清TNF-α表达水平的文献,对符合标准的文献进行Meta分析,应用RevMan4.2软件进行异质性检验和效应值检验,用加权均数差(WMD)表示。结果纳入相关文献10篇。Meta分析结果显示,尘肺患者血清TNF-α表达水平与对照组之间的差异没有统计学意义(WMD=-0.66,95%CI:-3.82～2.49),对尘肺进行分期后发现,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期尘肺患者血清TNF-α表达水平与对照组之间的WMD分别为9.43、-4.47和-16.12,并且发现Ⅲ期尘肺患者血清TNF-α表达水平与对照组之间的差异有统计学意义(WMD=-16.12,95%CI:-28.27～-3.97)。不同尘肺类型患者血清TNF-α表达水平与对照组之间的差异无显著性(P>0.05)。结论尘肺患者血清TNF-α表达水平与尘肺的发展有关,尘肺早期表达升高,尘肺晚期表达降低。
- 高彬郝长付王永星姚武
- 关键词：肿瘤坏死因子-Α尘肺META分析
