王梦瑶
- 作品数：15 被引量：34H指数：4
- 供职机构：河南中医药大学更多>>
- 发文基金：河南省科技攻关计划国家自然科学基金河南省高校科技创新团队支持计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 基于GRP78/PERK/ATF4的泽泻汤改善脂质诱导肝细胞内质网应激作用机制研究
- 2023年
- 目的:基于GRP78/PERK/ATF4通路探讨泽泻汤改善肝细胞内质网应激的潜在机制。方法:采用油酸(OA)及高脂饮食诱导高脂细胞及动物内质网应激(Endoplasmic reticulum stress, ERS)模型。ER与Ca2+荧光共定位观察泽泻汤对ER-Ca2+稳态的调节情况;流式细胞术及Tunel法检测泽泻汤对凋亡的影响;Q-PCR检测ER核心信号1(Ern1)、转录激活因子6(Atf6)、CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CCAAT/enhancer-binding protein-homologous protein,Chop)、Grp78、Perk、X-盒结合蛋白1(Xbp1)、热休克蛋白90β1(Hsp90β1)、肿瘤坏死因子受体超家族成员10B(Tnfrsf10b)的mRNA表达;Western bolt法检测葡萄糖调节蛋白78/B细胞免疫球蛋白结合蛋白(GRP78/BIP)GRP78、类PKR的内质网激酶(PERK)、p-PERK和转录激活因子4(ATF4)的蛋白表达。结果:与正常对照组相比,模型对照组ER-Ca2+明显失衡(P<0.05),肝细胞凋亡增加(P<0.01),Perk、Xbp1等ERS相关mRNA的表达上调(P<0.05),ERS伴侣标志蛋白GRP78、ATF4蛋白表达明显上调(P<0.05);与模型对照组相比,泽泻汤逆转了OA诱导的ER-Ca2+失衡(P<0.01);显著改善OA及高脂饮食诱导的肝细胞凋亡(P<0.01);体内外下调ERS相关基因Ern1、Atf6、Chop、Grp78、Perk、Xbp1、Hsp90b1、Tnfrsf10b的表达(P<0.05);体内外逆转OA及高脂饮食诱导的ERS伴侣标志蛋白GRP78表达的显著上调(P<0.01),同时下调p-PERK及ATF4蛋白表达(P<0.05)。结论:泽泻汤抑制脂质诱导的ERS,其机制可能与调控GRP78/PERK/ATF4通路有关。
- 王梦瑶谢治深徐江雁丁婧赵洁孙意冉张效威王辉王潘张振强
- 关键词：泽泻汤内质网应激
- 一种化合物HSS-8的医药用途
- 本发明公开了一种化合物HSS‑8的医药用途。本发明首次发现化合物HSS‑8具有CREB激动活性，可以用于制备CREB激动剂药物。本领域技术人员知道：CREB与神经元保护息息相关；CREB在神经元的发育、再生、突触形成及修...
- 王潘谢治深李军张丽萍高改娄勇王梦瑶张振强徐江雁
- 文献传递
- 一种倍半萜二聚体类化合物的医药用途
- 本发明公开了一种倍半萜二聚体类化合物的医药用途。本发明发现，倍半萜二聚体类化合物1～2对CREB具有明显的激活作用，因而可以用于制备CREB激活剂药物。本领域技术人员知道：CREB与神经元保护息息相关；CREB在神经元的...
- 王潘高改赵怡楠陈晓辉王梦瑶李中华张振强徐江雁
- 文献传递
- 基于TrkB-CREB的白术神经保护作用机制研究被引量：4
- 2021年
- 目的基于TrkB-CREB探讨白术(AM)对神经退行性疾病的神经保护作用。方法首将温度诱导表达Aβ的AD模式秀丽隐杆线虫CL4176分为空白对照组,阳性对照组(50μmol/L咯利普兰),AM低、中、高剂量组(100,200,300μg/mL),检测其对Aβ诱导损伤的缓解作用;Aβ_(1-42)体外诱导N2a建立AD损伤细胞模型,评估AM的神经保护作用。采用MPP+或鱼藤酮体外诱导N2a细胞和N2线虫建立PD损伤模型,检测细胞活力和N2线虫寿命;荧光显微镜下检测PD转基因线虫NL5901头部α-synuclein的荧光强度。在分子水平上采用荧光素酶报告基因法检测CREB的转录活性;RT-PCR法检测Creb下游靶基因的表达;Western-Blot法检测CREB及p-CREB蛋白表达水平;Autodock Vina软件进行白术活性成分与靶点蛋白的分子对接。结果不同浓度的AM可提高MPP+或Aβ_(1-42)损伤下N2a的细胞活力(P<0.05),延缓CL4176的瘫痪时间(P<0.05)、显著延长N2的寿命(P<0.01)且降低NL5901线虫头部α-syn的荧光强度(P<0.01);增强CREB转录活性(P<0.01),并提高Creb下游基因Bdnf、Psd-95和Bcl-2的mRNA表达水平(P<0.05);剂量依赖性促进p-CREB的表达(P<0.05)。Docking结果显示白术中多个活性成分可与TrkB蛋白形成氢键稳定结合。结论白术具有神经保护的作用,其机制可能与激活TrkB-CREB通路有关。
- 吴丽敏王辉王辉王梦瑶张振强徐江雁张振强
- 关键词：白术MPP+神经保护
- 泽泻汤调控Akt/TFEB促进肝细胞脂噬机制研究被引量：1
- 2022年
- 以特异性吞噬脂滴并降解的脂噬为切入点,基于Akt/TFEB通路探讨泽泻汤(Zexie Decoction, ZXD)改善棕榈酸(palmitic acid, PA)诱导的高脂细胞模型及高脂饮食(high-fat diet, HFD)诱导的高脂动物模型肝细胞脂代谢的机制。体外转染GFP标记的微管轻链蛋白3(microtubule-associated protein light chain 3,LC3)质粒与脂滴共定位和小鼠肝脏LC3与脂滴包被蛋白(perilipin2,PLIN2)免疫荧光共定位,结果显示,与DMSO及NCD组相比,棕榈酸(PA)及高脂饮食(HFD)诱导肝细胞内蓄积大量脂质,LC3表达水平降低,脂滴与LC3共定位显著减少(P<0.001),脂噬受损,泽泻汤干预促进LC3的表达,降低肝细胞脂质蓄积,并增加LC3与脂滴的共定位,提示脂噬被激活;Western blot结果同步证实了泽泻汤体内外诱导自噬相关蛋白LC3Ⅱ/LC3Ⅰ转化比及溶酶体相关膜蛋白2(lysosomal associated membrane protein 2,LAMP2)的增加,促进泛素结合蛋白1(sequestosome-1,SQSTM1/p62)的降解(P<0.05),共同说明泽泻汤调控脂噬途径。荧光素酶报告基因结果显示泽泻汤激活肝细胞中TFEB的表达(P<0.05);泽泻汤体内外逆转PA及HFD诱导的肝细胞转录因子EB(transcription factor EB,TFEB)核定位的减少(P<0.05),同时激活肝脏TFEB上调其靶基因Lamp2、Lc3B、Bcl2、Atg5的表达(P<0.05);此外,泽泻汤体内外下调TFEB上游调控蛋白激酶B(protein kinase B,PKB,Akt)的磷酸化水平(P<0.05)。综上所述,泽泻汤促进脂噬,其机制可能与调节Akt/TFEB途径有关。
- 王梦瑶李二稳高改付中学张效威王辉王潘张振强徐江雁谢治深
- 关键词：泽泻汤
- 基于LKB1/AMPK/PGC-1α的泽泻汤改善非酒精性脂肪肝作用机制研究被引量：17
- 2022年
- 以棕榈酸(palmitic acid,PA)诱导的脂质堆积细胞模型和高脂诱导的非酒精性脂肪肝(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)动物模型,探讨泽泻汤(Zexie Decoction)体内外改善NAFLD的药效,以LKB1/AMPK/PGC-1α通路为切入点探讨其可能作用机制。MTT结果显示泽泻汤对HepG2细胞活力无影响,泽泻汤剂量依赖性下调PA诱导的肝细胞培养基谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)的水平,降低高脂饮食(high-fat diet,HFD)小鼠血浆ALT、AST及肝脏总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)水平。尼罗红染色观察PA诱导的细胞内脂质沉积,PA诱导的肝细胞脂质蓄积显著增加,体外细胞脂质堆积模型诱导成功,泽泻汤有效改善PA诱导的肝细胞脂质堆积;小鼠肝脏油红染色结果同样表明,泽泻汤剂量依赖性减少HFD小鼠肝脏脂质堆积。线粒体膜电位染色显示泽泻汤能够逆转PA诱导肝细胞损伤引起的线粒体膜电位的下降;同时泽泻汤激活PGC-1α上调其靶基因ACADS、CPT-1α、CPT-1β、UCP-1、ACSL-1、NRF-1等的表达;Western blot及免疫组化结果显示泽泻汤可体内外上调LKB1、p-AMPK、p-ACC、PGC-1α蛋白表达水平。综上所述,泽泻汤能够有效改善NAFLD,其机制可能与调控LKB1/AMPK/PGC-1α通路相关。
- 王梦瑶高改李二稳张效威王辉王辉徐江雁张振强谢治深
- 关键词：泽泻汤NAFLD
- 一种倍半萜类化合物的医药用途
- 本发明公开了一种倍半萜类化合物的医药用途。本发明发现，倍半萜化合物1～10对CREB具有明显的激活作用，因而可以用于制备CREB激活剂药物。本领域技术人员知道：CREB与神经元保护息息相关；CREB在神经元的发育、再生、...
- 王潘谢治深赵怡楠赵璇陈晓辉王梦瑶张振强徐江雁
- 文献传递
- 泽泻汤抑制肝细胞铁死亡改善非酒精性脂肪性肝病的作用机制被引量：8
- 2022年
- 目的:探讨泽泻汤(zexie tang,ZXT)抑制肝细胞铁死亡改善非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)的作用机制。方法:50只SPF级雄性C57BL/6J小鼠随机分为空白对照组、模型组及泽泻汤低(1.3 g·kg^(-1))、中(2.6 g·kg^(-1))、高(5.2 g·kg^(-1))剂量组,每组10只。除空白对照组,其余组小鼠均采用高脂饮食喂养建立NAFLD模型,同时各组灌胃给予10 mL·kg^(-1)相应药物,空白对照组和模型组灌胃等体积的0.5%羧甲基纤维素钠,每天1次,连续9周。免疫组化法检测小鼠肝脏中血红素氧合酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)、谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)、铁死亡抑制蛋白1(ferroptosis suppressor protein 1,FSP1)的蛋白表达水平;RT-PCR法检测小鼠肝脏FSP1、CoQ10、Nrf2及下游抗氧化基因的mRNA表达水平;硫代巴比妥酸(thiobarbituric acid,TBA)法检测小鼠肝脏丙二醛(malondialdehyde,MDA)的水平;比色法检测小鼠肝脏还原型谷胱甘肽(reduced glutathione,GSH)的含量;荧光显微镜观察活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平。选择Huh-7细胞及HEK-293T细胞,分为空白组、模型组、特丁基对苯二酚(tert-butylhydro quinone,t-BHQ)组及泽泻汤不同质量浓度(0.25 g·L^(-1)、0.5 g·L^(-1)、0.75 g·L^(-1)、1 g·L^(-1))组,MTT法检测细胞存活率;mitoSOX探针检测线粒体超氧化物含量;荧光素酶报告基因法检测核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)-抗氧化反应元件(antioxidant response element,ARE)的转录活性;RT-PCR法检测FSP1、CoQ10、ACSL4、Nrf2及其下游基因的mRNA表达水平;Western Blot法检测胞浆及核Nrf2蛋白表达水平。结果:ZXT可显著升高FSP1蛋白表达水平(P<0.05),显著升高FSP1 mRNA、Coq10 mRNA、Nrf2 mRNA及其下游抗氧化基因HO-1 mRNA、GPX4 mRNA、GSS mRNA、GCL mRNA、UGT mRNA、GST mRNA的表达水平(P<0.05),剂量依赖性上调Nrf2核蛋白表达量及Nrf2-ARE的转录活性(P<0.05),显著降低ACSL
- 李二稳高改王梦瑶吴丽敏谢治深张振强王辉徐江雁
- 关键词：非酒精性脂肪性肝病泽泻汤氧化应激NRF2
- 基于SREBPs的泽泻活性成分及其降脂作用研究被引量：5
- 2022年
- 目的基于固醇调节元件结合蛋白(SREBPs)探究泽泻降脂作用。方法MTT检测泽泻(ZX)对肝细胞HL7702活力的影响;尼罗红染色观察泽泻对油酸(OA)诱导HL7702细胞内脂滴蓄积的影响;试剂盒测定细胞内总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)含量;荧光素酶报告基因检测泽泻及其活性成分对SREBPs转录活性的影响;Q-PCR评估泽泻对SREBPs下游靶基因的影响。结果①泽泻在0~300μg/mL浓度范围内对HL7702细胞活力无显著影响,且不同浓度的泽泻均能降低OA诱导的细胞内TC、TG含量及脂滴含量。②泽泻能够剂量依赖性抑制SREBPs转录活性,并显著抑制SREBPs下游靶基因水平。③泽泻醇A等10个活性成分可以抑制SREBPs转录活性,且能降低OA诱导的细胞内高TC、TG水平。结论泽泻能够降低OA诱导的肝细胞内脂质蓄积,其可能是通过抑制SREBPs来降低胆固醇和脂肪酸合成。
- 高改李二稳王梦瑶张效威王辉王辉张振强徐江雁
- 关键词：泽泻活性成分降脂固醇调节元件结合蛋白
- 一种从中药材白术中制备化合物BZ-92的方法
- 本发明公开了一种从中药材白术中制备化合物BZ‑92的方法。本发明首次以白术为原料分离制备化合物BZ‑92，充分发挥了白术资源丰富的优势。现有技术没有报道过白术中含有化合物BZ‑92，也没有报道过白术所在菊科中其它植物含有...
- 谢治深高改吴丽敏李二稳王梦瑶赵建平
- 文献传递
