王晓冲
- 作品数：4 被引量：19H指数：3
- 供职机构：深圳市药品检验所更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学环境科学与工程更多>>
- 非水电位滴定法测定盐酸伊托必利的含量被引量：1
- 2012年
- 目的:建立非水电位滴定法测定盐酸伊托必利的含量。方法:采用非水电位滴定法,以冰醋酸-醋酐为溶剂,用高氯酸滴定液(0.1 mol.L-1)滴定,以非水pH玻璃电极用电位法指示终点。结果:电位突跃明显,测定结果与现行标准方法测定结果基本一致。结论:非水电位滴定法有效革除了汞盐,方法简便快速,准确度高,精密度好,可用于盐酸伊托必利的质量控制。
- 鲁艺刘敏王晓冲李玉兰
- 关键词：盐酸伊托必利
- 实时荧光定量PCR方法应用于药品无菌快速检测的研究被引量：11
- 2013年
- 目的建立应用实时荧光定量PCR进行无菌快速检测的方法。方法选取金黄色葡萄球菌及大肠埃希菌,用裂解试剂盒抽提细菌基因组DNA,进行实时荧光定量PCR检测,并应用叠氮溴化丙锭(PMA)抑制样品中死菌基因组DNA的PCR扩增。结果 PMA能有效去除样品中死菌干扰,针对16S rRNA基因保守序列进行扩增的荧光定量PCR方法具有较高的灵敏度。在金黄色葡萄球菌和大肠埃希氏菌检测中,最低含菌量组与阴性对照组Ct值有明显差异(P<0.05),其最低检出限为2 CFU/PCR。在对人工污染药品的无菌检测中,该方法与药典检测方法结果一致。结论进行无菌检查时,采用PMA去除样品中死菌基因组DNA干扰,以裂解试剂盒抽提细菌基因组后用荧光定量PCR分析样品中细菌污染,可将检测时间缩短到4 h左右,操作简单,灵敏性高,可应用于药品无菌检查的快速筛查。
- 王晓冲周继昌李军王晓炜应国红
- 关键词：荧光定量PCR细菌污染
- PMA在RT-PCR检测药品细菌污染中的应用被引量：5
- 2013年
- 建立有效区分死菌、活菌PCR检测方法,用于药品中细菌污染检测。选取金黄色葡萄球菌及大肠埃希菌,用叠氮溴化丙锭(PMA)前处理,使PMA与死菌DNA分子共价交联,抑制该DNA分子PCR扩增。当PMA浓度大于5μg·mL-1、曝光时间大于5 min时,PMA可抑制细胞膜破裂革兰氏阴性、阳性菌死菌DNAPCR扩增;PMA浓度大于20μg·mL-1时对活菌DNAPCR扩增产生一定影响。经过PMA前处理,能有效抑制死菌DNA扩增,在药品细菌污染PCR检测中有很好应用前景。
- 应国红王晓冲李军王晓炜周继昌
- 关键词：PCR扩增
- RP-HPLC梯度洗脱法测定盐酸伊托必利的有关物质被引量：3
- 2012年
- 目的:建立RP-HPLC梯度洗脱法测定盐酸伊托必利的有关物质。方法:Alltima C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为0.05 mol.L-1磷酸二氢钾溶液(调节pH至4.0)-乙腈进行梯度洗脱,流速1.0 mL.min-1,柱温35℃,检测波长258nm,进样量20μL。结果:本文色谱条件中盐酸伊托必利与杂质有较好分离,盐酸伊托必利浓度在1～10μg.mL-1范围内与峰面积线性关系良好(r=0.9999,n=5),最低检测限为6 ng。结论:本法简便、专属,重复性好,可用于测定盐酸伊托必利的有关物质。
- 李美芳刘敏王晓冲李军郭兴杰
- 关键词：盐酸伊托必利梯度洗脱高效液相色谱
