王建辉
- 作品数：5 被引量：3H指数：1
- 供职机构：郑州大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：河南省高校科技创新团队支持计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- RNA干扰介导的人肺腺癌A549细胞FasL基因沉默及意义
- 2009年
- 目的构建针对肿瘤凋亡基因FasL的小干扰RNA（siRNA）表达质粒，研究RNA干扰技术对人肺腺癌A549细胞FasLmRNA表达的抑制作用，探索Fas／FasI途径在肺癌转移中的作用机制。方法依据siRNA靶序列的设计原则，以FasLmRNA为靶基因，合成2对编码短发夹结构的两条DNA序列，经退火合成DNA双链，再克隆至siRNA表达质粒pSilencer2．0中，转化后进行PCR鉴定和DNA序列测定。用脂质体介导转染入人肺腺癌A549细胞株，采用实时荧光定量PCR检测细胞FasL mRNA水平的变化。结果成功构建发卡样FasLsiRNA真核表达载体，转染人肺腺癌A549细胞后，FasLmRNA的表达水平显著下降。结论成功构建的FasL基因siRNA真核表达载体pSi2．0-FasL能显著抑制人肺腺癌A549细胞FasLmRNA的表达。
- 王峰王建辉雷小婷张国俊
- 关键词：FASL基因RNA干扰实时荧光定量PCR
- FasL基因siRNA真核表达载体的构建及意义被引量：1
- 2009年
- 目的构建针对细胞凋亡基因FasL的小干扰RNA(siRNA)表达载体,探讨载体介导的RNA干扰技术用于肺间质纤维化基因治疗的可行性。方法依据siRNA靶序列的设计原则,以FasL mRNA为靶基因,合成两对编码短发卡结构的两条DNA序列,经退火合成DNA双链,再克隆至siRNA表达载体pSilencer2.0中,转化后进行PCR鉴定和DNA序列测定。将构建的载体用脂质体介导转染入人肺腺癌A549细胞株,采用实时荧光定量PCR法检测细胞FasL mRNA水平变化。结果成功构建发卡样FasL siRNA真核表达载体;其转染人肺腺癌A549细胞后,细胞FasL mRNA的表达水平显著下降。结论FasLsiRNA真核表达载体能显著抑制人肺腺癌A549细胞FasLmRNA的表达;本研究为肺间质纤维化的基因治疗奠定了基础。
- 王建辉雷小婷赵国强张国俊
- 关键词：FASL基因RNA干扰
- 罗格列酮对肺纤维化大鼠TGF-β_1表达的影响
- 2008年
- 将45只SD雄性大鼠随机分为对照组、模型组和治疗组,模型组和治疗组大鼠气管内一次性滴注博莱霉素-A5(BLM-A5),对照组大鼠滴注等体积生理盐水。注药后治疗组灌服罗格列酮8 mg/(kg.d),对照组、模型组给予等体积生理盐水。各组动物于7、14、28 d随机处死5只,取肺组织进行HE和M asson染色,免疫组化法检测肺组织转化生长因子β1(TGF-β1)的表达水平。HE染色示治疗组各时期肺泡炎和肺纤维化程度均较模型组轻;M asson染色示治疗组胶原沉积明显少于模型组。治疗组与模型组各时期TGF-β1表达水平均有统计学差异。提示罗格列酮能减轻BLM-A5诱导的肺纤维化大鼠肺泡炎和肺纤维化,其机制可能与抑制肺组织TGF-β1表达有关。
- 蒋莉张国俊邢丽华陈奎生高冠民王华启王建辉
- 关键词：肺纤维化博莱霉素罗格列酮转化生长因子-Β1
- siRNA沉默新生大鼠肺成纤维细胞转化生长因子-β1的表达及临床意义
- 2009年
- 目的利用RNA干扰技术（RNAi）抑制转化生长因子β1（TGF—β1）在新生大鼠肺成纤维细胞中的表达并探讨其临床意义。方法构建TGF—β1小分子干扰RNA（siRNA）重组表达载体，测序鉴定后转染新生大鼠肺成纤维细胞，应用RT—PCR检测其对TGF—β1mRNA表达的影响。结果实验组与对照组相比，TGF—β1mRNA的表达明显下调（P〈0．01），其中以T1实验组的沉默效率最为显著（P〈0．05）。结论成功构建并筛选出能高效抑制TGF—β1表达的siRNA真核表达载体，有望成为临床治疗肺间质纤维化的新靶点。
- 雷小婷张国俊赵国强王建辉
- 关键词：新生大鼠肺成纤维细胞转化生长因子Β1
- 人黑色素瘤相关抗原基因-12基因疫苗对Lewis肺癌小鼠肿瘤生长及体内抗体水平的影响被引量：2
- 2008年
- 目的:研究人黑色素瘤相关抗原基因-12(MAGE-12)基因疫苗pEGFP-C3-MAGE-12对Lewis肺癌小鼠肿瘤生长及体内抗体水平的影响。方法:小鼠80只,随机分为4组,每组20只。疫苗组、空质粒组和生理盐水(NS)组接种Lewis肺癌瘤组织制备Lewis肺癌小鼠模型。接种癌组织前14d、7d、0d,疫苗组按每次每只0.2mL(75ng/L)于右下肢内侧肌肉群内注射pEGFP-C3-MAGE-12;空质粒组和NS组每只每次注入pEGFP-C3空质粒或NS;空白对照组小鼠不做任何处理。每3d观察并记录1次肿瘤大小。接种瘤组织后14d每组取10只小鼠,ELISA法检测血清MAGE-12-Ab,余小鼠(每组10只)自然死亡,记录生存时间。结果:3组7d成瘤率均为100%。空质粒组、NS组及疫苗组生存期分别为(27.0±0.3)d,(27.2±0.3)d和(28.9±0.6)d;肿瘤体积分别为(179.775±9.085)mm3,(173.172±9.085)mm3和(144.923±9.528)mm3;疫苗组血清MAGE-12-Ab水平为(711.16±174.78),其他3组未检测到MAGE-12-Ab;与空质粒组、NS组比较,疫苗组生存期短(P<0.05),肿瘤体积小(P<0.05),体内抗体水平高(P<0.05)。结论:MAGE-12基因疫苗具有免疫治疗作用。
- 楚荷莹王华启陈闪闪赵国强王建辉雷小婷张国俊
- 关键词：肺癌免疫治疗小鼠
